植物质膜蛋白质组学研究进展

植物质膜(plasma membrane,简称PM)是连接细胞内外的活性屏障,而PM蛋白作为PM的重要组成成分之一,对植物细胞膜功能有着重要的作用。植物PM蛋白质组学的研究有利于对PM的功能进行更加深入的探索。本文主要对近几年来在植物PM蛋白质组学的相关研究进行综合性论述,包括其研究方法、功能及其面临的问题等,以期为植物PM蛋白质组学的后续研究以及PM功能的深入探讨提供参考。     

番茄灰霉病生防菌株TL1的分离、鉴定及其生防能力分析

为了筛选对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)具有拮抗作用的菌株,通过平板对峙法从西藏高原土壤中分离筛选到一株具有较好拮抗作用的菌株TL1。形态学观察、生理生化分析以及分子生物学鉴定结果表明,该菌株为马氏类芽孢杆菌(Paenibacillus maysiensis),并具有固氮和溶磷作用。TL1在平板上能显著抑制灰霉病菌菌丝生长,抑菌率为74.32%,且该菌产生的挥发性物质呈现显著抑菌活性。进一步平板抑菌试验表明,TL1菌株对褐斑病菌等6种病原真菌均具有显著抑菌活性,其中对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抑制率最高(73.48%),对黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicola)的抑制率最低(57.37%)。TL1菌株能够在番茄果实上定殖并抑制由灰霉病菌引起的腐烂,且可以显著提高番茄种子的萌发率以及促进番茄幼苗生长。     

芽孢杆菌纤溶酶的纯化及其生物活性研究

芽孢杆菌2^#（Bs-2）的发酵液经过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层析、Q-Sepharose阴离子交换层析、电泳制备和电源洗脱。获得一种具有纤溶性的蛋白酶;该蛋白酶由3个亚基组成,分子量分别为23KD,SSKD,19KD,全酶分子量约为64KD;经纤维蛋白平板测定表明,该酶既具有纤溶酶作用,又具有激活纤溶酶原的作用。     

烟草诱导抗病性及其应用

烟草诱导抗病性是通过诱导因子诱导烟草自身的抗病潜力,是烟草重要的抗病机制之一。概述了烟草诱导抗病性的诱导因子、机制及其应用,为烟草诱导抗病性的进一步研究提供理论基础。     

川芎块茎腐烂病研究 Ⅰ.病原鉴定与侵染途径研究

川芎LigusticumchuamxiongHort。为四川产主要道地药材,具有活血行气、祛风止痛等功效,主产于都江堰市、新都、崇庆等县。川芎块茎腐烂病俗称“水冬瓜”,是川芎产区发生普遍而严重的一种病害。鉴于此我所1988～1992年开展“川芎块茎腐烂病病原及防治研究”,本文报道病原菌分离鉴定及其致病性测定。     

中药虻虫纤溶成分(TFC)及其性质

虻虫生药浸提液经 75%饱和度(NH4)2SO4 沉淀、Sephadex G-75 凝胶过滤层析得虻虫纤溶成分(TFC);TFC 的最适作用温度为 50℃,最适作用 pH 为 7.5;0.52 mmol/L PMSF 能完全抑制 TFC 的纤溶活性,金属离子 Ca++,Mg++,Zn++,Cu++,Mn++,Hg++ 对 TFC 活性有部分抑制作用;TFC 既具有纤溶酶活性,又具有激活纤溶酶原的活性,既可以降解纤维蛋白又可以降解纤维蛋白原.     

益母草抗菌蛋白LJAMP2的表达及抗菌活性分析

LJAMP2是一种分离自益母草(Leonurus japonicus Houtt.)种子的非专一性脂转移蛋白类抗菌蛋白.将编码成熟的LJAMP2蛋白的基冈(GenBank Accession No.AY971513)插入到巴斯德毕赤酵母(Pichia pas-toris)表达载体pPIC9K中;重组质粒pPIC9K-LJAMP2经线性化后,用电转化法导入毕赤酵母菌株GS115(his-/mut+)中.转化子用含1.75 mg/mL G418的YPD平板筛选获得多拷贝Mut+转化子.将1%甲醇诱导LJAMP2表达后的发酵液,经进一步浓缩、凝胶过滤脱盐、CM FF阳离子交换色谱和反相HPLC进行纯化,获得纯度90%以上的LJAMP2菌株诱导24 h即有LJAMP2的表达,诱导168 h表达量达到最高;表达的LJAMP2蛋白对黑曲霉(Aspergillus niger)、玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)、镰刀菌(Fusarium graminearum)真菌表现出抑制活性.     

假单孢菌20#-5菌株代谢产物对马铃薯晚疫病菌的抑制作用

为了深入研究抗生菌假单胞菌20#-5菌株的有关性状，采用固体平板抑菌法调查了其代谢产物的抗菌谱，用甲醇浸提和色谱分离法对其活性成分进行了分离纯化，并初步优化了其发酵条件。结果表明，该菌的代谢产物在固体培养基上对马铃薯晚疫病菌、苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌等有较强的抑制作用，抑菌直径大于20mm；对耶尔森氏菌有微弱的抑制作用，抑菌直径小于10mm；对小麦赤霉病菌、柑橘溃疡病菌、亚利桑那沙门氏菌、克雷伯氏菌等没有抑制作用。浓缩液经AcA202凝胶过滤和C-18反相色谱分离，结果显示该菌代谢产物中有多种抗菌活性成分。该菌株的最佳发酵条件是100ml的三角瓶中装10ml初始pH8．0的LB培养液，28℃摇床发酵4天。     

超量表达益母草种子抗菌蛋白提高番茄的抗病性

为了验证来自益母草Leonums japonicusHoutt种子的抗菌蛋白基因LjAMP1和LjAMP2对植物病害的广谱抗性,用根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导法,将其分别转入台湾圣女番茄品种。结果显示,利用黄萎病菌毒素浸泡番茄离体枝条,处理24h,空载转基因对照和非转基因再生植株枝条全部萎蔫,而LjAMP1和LjAMP2转基因番茄T0代枝条未出现萎蔫的株系比率分别为11.11%和6.25%;用离体叶片接种菌块,分别对T0代抗或耐黄萎病菌毒素的T1代株系接种早疫病菌,接种10天,空载转基因对照和非转基因再生植株的病情指数达到100,而LjAMP1和LjAMP2转基因番茄病情指数最低的株系分别为17.5和10.0,表明转基因番茄能同时提高对黄萎病菌毒素和早疫病的抗性;进而用叶盘法检测转基因植株对番茄青枯病菌的抑制作用,结果显示对真菌病害抗性强的转基因植株叶片对青枯病菌的抑菌圈更大。转基因番茄抗病鉴定结果表明,来自益母草种子的LjAMP1和LjAMP2基因对植物病害具有广谱抗性。