萝卜下胚轴高效再生体系的建立

以7个萝卜品种为试材,开展下胚轴离体培养研究,通过基因型筛选确定具有较高再生频率的萝卜品种进行后续试验,探讨AgNO3浓度、激素配比、琼脂浓度等因素对萝卜下胚轴再生的影响。结果表明:萝卜下胚轴再生的最适培养基为改良MS+1.8 mg/L 6-BA+0.8 mg/L NAA+5 mg/L AgNO3+0.9%琼脂+30 g/L蔗糖,不定芽再生率高达78.3%,玻璃化率仅为2.8%。     

野生梭梭的离体培养和植株再生

以野生梭梭带腋芽茎段为外植体进行离体再生研究,探讨不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖的质量浓度对其愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,野生梭梭带腋芽茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,诱导率为100%;不定芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO33.5 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂6.5 g/L,不定芽分化率为97.8%;影响野生梭梭再生的最主要因素是NAA,其次是TDZ和AgNO3,蔗糖影响最小。     

白菜类作物子叶高频再生体系的建立

以大白菜品种北京80号、油青矮脚45天菜心、四季菜心王的带柄子叶为外植体,研究不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂质量浓度对不定芽再生的影响。结果表明,北京80号的最佳培养基为MS+5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2mg/L AgNO3,再生频率为83.6%;油青矮脚45天菜心和四季菜心王的最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+2 mg/L AgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。3个基因型的带柄子叶在0.5～1mg/L 2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。4～5d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的质量浓度以12g/L为宜。通过不定芽继代培养和生根驯化建立白菜类作物较高再生频率的再生体系。     

明水梨叶片不定芽再生体系的建立

以‘明水’梨(Akemizu)叶片为外植体,研究了不同基本培养基,不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)的组合,不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银(AgNO3)对梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明,在NN69+TDZ 1.5mg/L+IBA0.2 mg/L+AgNO31.0 mg/L中暗培养25 d后,叶片不定芽再生率最高,达到71.8%。     

澳洲青苹离体叶片不定芽再生体系的建立

以澳洲青苹试管苗的叶片为外植体诱导不定芽再生,研究不同的BA浓度、TDZ浓度、暗培养时间、叶片放置方式和AgNO3对叶片不定芽再生的影响。结果表明:最适宜的叶片不定芽再生的培养基为MS TDZ 2.0mg/L NAA 0.3 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L和MS BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L,最适的暗培养时间是20 d,在上述2种培养基中澳洲青苹离体叶片不定芽的再生频率分别达到100.0%和91.7%。     

2种基因型大白菜高效子叶离体不定芽再生研究

以2个优质大白菜材料德高早熟长江5号(DG)和双耐(SN)的子叶为外植体,研究了不同激素配比、苗龄和AgNO3浓度对子叶不定芽再生的影响,建立了2种大白菜的子叶不定芽高效再生体系,为进一步有效的利用基因工程技术改良大白菜品种奠定了基础.结果表明:与6-BA相比,TDZ对诱导子叶不定芽再生更有效.在单独附加细胞分裂素(6-BA或TDZ)的MS培养基上,不能诱导子叶不定芽的分化.DG在MS+ 1.5 mg/L TDZ+0.2 mg/LNAA+6 mg/L AgNO3分化培养基上再生频率最高,为73.80％,最适苗龄为6d,平均再生系数为4.27.SN在MS+1 mg/L TDZ +0.4 mg/L NAA+6 mg/L AgNO3分化培养基上再生频率最高,为59.09％,最适苗龄为6d,再生系数为4.03.     

花生幼叶丛生芽高效诱导的制约因素研究

以花生品种豫花14号4 d苗龄的幼叶为外植体,对花生幼叶高频不定芽诱导进行研究。在MS培养基的基础上,添加了芽诱导常用的细胞分裂素6-BA、生长素NAA及两种不太常用的脱落酸(ABA)、噻重氮苯基脲(TDZ),结果表明,单独使用6-BA,NAA或TDZ,不定芽诱导率较低;采用较高浓度的6-BA(8 mg/L)、较低浓度的NAA(1 mg/L),添加低浓度的ABA(1 mg/L),不定芽诱导率可达80%以上。最佳诱导培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 1 mg/L+ABA 1 mg/L+AgNO32 mg/L,从整体上观察,最佳继代培养基为MS+6-BA 5 mg/L+NAA 2 mg/L+AgNO32 mg/L。同时研究发现,花生幼叶近叶柄基部切口处不定芽诱导率较高,是较理想的不定芽诱导部位。     

植物生长调节剂和AgNO3对大白菜外植体不定芽再生的影响

通过L25(56)正交试验,优化及筛选最适合大白菜'鲁白6号'子叶及下胚轴不定芽诱导的4种植物生长调节剂和AgNO3的浓度组合。结果发现,在α-NAA、6-BA、TDZ、ABA和AgNO3中,α-NAA对子叶不定芽诱导率的影响达到5%水平显著差异,确定以MS 1mg/Lα-NAA 2mg/L TDZ 5mg/LAgNO3为最佳子叶不定芽诱导培养基,MS 0.8mg/Lα-NAA 5mg/L6-BA 1mg/L TDZ 7mg/L AgNO3为最佳下胚轴不定芽诱导培养基。     

甘蓝型油菜下胚轴离体培养再生植株研究

[目的]为进一步通过基因转化获得预期优良性状的甘蓝型油菜提供借鉴。[方法]以甘蓝型油菜的下胚轴为外植体,研究不同苗龄、不同基因型、不同预培养条件以及各种生长调节剂组合对油菜外植体高频率再生的影响。[结果]试验中,7 d苗龄的甘蓝型油菜下胚轴再生频率可达35.83%;经3 d预培养处理的油菜下胚轴芽再生频率可提高至57.78%,油菜品种史力丰下胚轴的芽分化率较高,达35.00%,其次是N481-1,而N370-1的芽分化率最低;其最高分化率的激素组合为6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,达38.89%。史力丰品种6~8 d无菌种子实生苗的下胚轴在预培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L上预培养3 d,在最适分化培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO35.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L中培养,再生频率最高。[结论]建立了甘蓝型油菜下胚轴离体培养高频率再生植株模式。     

‘长富2号’红富士苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究

以‘长富2号’(Nagafu No.2)红富士苹果试管苗为试材,研究了BA和TDZ组合、不同浓度的TDZ、糖的种类和不同暗培养时间对红富士苹果离体叶片再生不定芽的影响。结果表明:高浓度的TDZ可以有效提高红富士苹果离体叶片再生效率;最适宜叶片再生的糖类为蔗糖,最适宜的暗培养时间为3周,最佳的叶片再生培养基为MS+TDZ 6.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂6.2 g/L。在上述培养条件下,‘长富2号’红富士苹果离体叶片再生率达到100%,平均叶片再生芽数达到10.6个。     

小白菜高效子叶离体植株再生体系的建立

以丰顺小白菜带柄子叶为外植体,研究了苗龄、不同激素配比、A gNO3浓度和抗生素、共培养时间对不定芽再生的影响。结果显示,子叶不定芽再生的最佳苗龄为5~9d;经过2d的预培养,在M S 1.0m g/L TDZ 0.1m g/L NAA 7.5m g/L A gNO3 0.5m g/L ABA培养基中,带柄子叶不定芽再生率最高,为82.53%;在含有2.0m g/LIBA的1/2M S0培养基中诱导生根,不定根形成率为100%。抗生素敏感性试验表明,可选择浓度为20m g/L Hyg(潮霉素)作为最适合选择压,抑制农杆菌生长的抗生素选用500m g/L Cb(羧卞青霉素)。不同浓度农杆菌菌液对子叶再生不定芽的影响不大,但共培养时间的长短却明显地影响不定芽的分化。     

TDZ和6-BA对芜菁离体再生过程中内源激素水平的不同影响(英文)

为研究外源TDZ和6-BA对芜菁离体再生过程中内源激素的影响来阐明TDZ在促进芜菁离体再生方面比6-BA更为有效的原因,采用不同浓度的TDZ和6-BA分别配合不同浓度NAA诱导芜菁带柄子叶离体再生.结果表明:适合芜菁带柄子叶离体再生的外源激素浓度组合分别是TDZ 4·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1和6-BA5·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1;在这2种组合诱导下的不定芽再生率分别是80·4 %和30·2 %.分别测定在这2种外源激素组合诱导下带柄子叶外植体内源生长素(IAA)、玉米素(Z)、赤霉素(GAs)和脱落酸( ABA)的绝对含量,并计算IAA/ABA和IAA/Z之间的相对含量.结果表明:TDZ 4·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1的激素组合诱导带柄子叶外植体产生内源IAA和Z的水平峰值显著高于6-BA5·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1的激素组合;而在2种外源激素组合诱导条件下,内源GAs和ABA的含量差异不显著;IAA的绝对含量左右了IAA/ABA和IAA/Z的变化趋势.综合内源激素的绝对含量和相对含量,TDZ比6-BA更好地诱导芜菁分化效果的关键因素是由于TDZ诱导外植体产生了更高水平的IAA含量和IAA/ABA比值.TDZ和6-BA诱导产生不同水平的内源Z和IAA/Z的作用还不明确.     

苹果组培苗离体叶片诱导不定芽分化

以福早红、鲁加3号和鲁加6号3个苹果品种的组培苗叶片为试材,研究了植物生长调节剂、基因型、暗培养、AgNO3对苹果叶片不定芽分化的影响.结果表明:福早红、鲁加3号和鲁加6号3个苹果品种的组培苗叶片分化最佳培养基分别为MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.20 mg/L,MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.10 mg/L,MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.05 mg/L;基因型是决定苹果组培苗叶片分化的重要因素,3个苹果品种叶片分化不定芽的能力从大到小依次是福早红、鲁加6号、鲁加3号;暗培养可以明显促进苹果叶片进行脱分化,提高叶片的分化率,苹果叶片暗培养处理的最佳时间为15 d;AgNO3抑制苹果叶片愈伤组织的形成,不能促进其叶片不定芽的形成.     

激素TDZ对促进白菜下胚轴不定芽再生的效应分析

以华阳三号(HY)大白菜和苏州青(SZQ)小白菜下胚轴为外植体，MS为基本培养基，将TDZ与NAA配置不同激素浓度组合，观察TDZ对下胚轴不定芽再生的影响，并对各组合的培养效果进行了比较。结果表明，TDZ能较好地促进大白菜下胚轴不定芽再生，在MS 0．5mg／LTDZ 0．5mg／L NAA的培养条件下，HY的不定芽再生频率达到45％，且再生周期短，芽点多，再生芽正常，可以满足植物遗传转化需要。TDZ很难诱导SZQ小白菜下胚轴不定芽再生，只能诱导产生大量愈伤组织。     

千层金离体组织培养与诱导再生研究

为了研究千层金快速繁殖技术和品种的基因工程改良,本研究以千层金叶片为外植体,研究了不同激素浓度对千层金叶片再生的影响。结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+TDZ 0.01 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达76.05%;最佳分化培养基为MS+TDZ 0.02 mg/L+NAA 0.05 mg/L,愈伤分化率可达67.13%;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.2mg/L,生根率最高为71.27%。     

罗汉果叶片培养及其不定芽形成的细胞学观察

以罗汉果叶片为外植体,探讨了不同基本培养基、不同培养方式、不同植物生长调节剂对不定芽分化的影响,并对不定芽的形成进行了细胞组织学观察。结果表明：基本培养基以改良MS较为适宜,在附加6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L的固体培养基中,平均每块愈伤组织再生芽高达5．6个。叶片正面接触培养基的培养方式芽分化率达到90．3％。芽苗在1／2MS＋NAA0．2mg／L＋IBA0．5mg／L＋蔗糖20∥L的固体培养基中诱发生根效果最好。硝酸银对不定芽分化具明显效果,分化率达到86．7％。细胞学观察发现,不定芽起源于叶片紧密愈伤组织表层。     

美女樱叶片离体培养研究

以美女樱品种"Quartz"离体叶片为外植体,探讨了不同细胞分裂素、暗培养、硝酸银质量浓度以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明:6-BA的诱导效果好于TDZ。在培养基MS+6-BA4.0mg/L+IBA0.15mg/L+蔗糖30g/L上可以使美女樱叶片不定芽的再生率达26.8%。2mg/LAgNO3可以将美女樱叶片的不定芽再生率提高到31.3%,并缩短不定芽发生时间。暗培养5d可以促进美女樱叶片不定芽的再生,活性炭对美女樱叶片离体再生有一定抑制作用。     

昌红苹果离体叶片不定芽的诱导及植株再生

 以昌红苹果的组培苗为试材,研究建立叶片的离体再生体系。用30~40 d继代的新梢顶部1~3节新展开的叶片作为外植体,分别接种在分化的培养基上,黑暗处理15 d, 昌红苹果叶片不定芽的最高再生率为100%。在6号培养基上,昌红苹果叶片的再生能力最高; 诱导叶片不定芽适宜的培养基为MS+TDZ 1.0 mg /L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30 g/L+ 琼脂 5.5 g/L。     

苎麻叶片高效再生体系的建立

以湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻的叶片为材料,构建4个品种高效、稳定的不定芽再生体系. 湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻最适诱导愈伤组织及分化不定芽的培养基分别为MS+0.7 mg/L TDZ+0.02 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.01 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D,MS+ 0.9 mg/L TDZ +0.05 mg/L 2,4-D;不定芽分化率分别为83.3%,81.7%,90.0%,86.7%;4个品种再分化时出现丛生芽,新宁青麻愈伤组织的平均再生不定芽数达2.62个,其他3个品种也都有数量不等的丛生芽产生,不定芽生根培养基为MS+ 0.05 mg/L NAA;叶块经过添加6%蔗糖培养基培养2周,再转入含3%蔗糖的培养基中培养,其中经6%蔗糖培养能显著提高湘苎2号、新宁青麻、四川洪县园麻不定芽分化率、平均再生不定芽数.