广东地区鸭疫里默氏杆菌RAPD分型研究

为了解广东地区鸭疫里默氏杆菌的流行情况,研究采用随机引物初步建立了鸭疫里默氏杆菌RAPD扩增多态性方法,对分离自广东地区的20株鸭疫里默氏杆菌进行鉴定。结果显示:20株鸭疫里默氏杆菌产生16种不同的指纹图谱;有些鸭场存在两种或两种以上基因型的菌株并且不同鸭场流行基因型不一样。该结果可为该地区鸭疫里默氏杆菌病的防治提供参考。鸭疫里默氏杆菌RAPD指纹图谱存在丰富的多样性,可用于鸭疫里默氏杆菌的快速基因分型及分子流行病学调查。     

广东地区鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及双重PCR检测方法的建立

对来自广东地区疑似鸭疫里默氏杆菌病的病鸭组织进行了病原菌的分离培养和生化鉴定,确定得到20株鸭疫里默氏杆菌,动物回归试验结果表明,分离的鸭疫里默氏杆菌具有很强的致病性.对这20株鸭疫里默氏杆菌进行的药敏试验表明,分离株已广泛产生耐药性.参照已经发表的2对引物以细菌全菌体为模板建立双重PCR方法,结果均能扩增出2条目的片段,经测序证实为鸭疫里默氏杆菌,而对鸭源大肠杆菌、鸭源禽多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门菌和鸭源葡萄球菌的扩增结果均为阴性.说明建立的双重PCR方法能快速、准确的检测出鸭疫里默氏杆菌,并具有高度特异性,可用于鸭疫里默氏杆菌的快速鉴定和快速诊断.     

鸭疫里默氏杆菌PCR快速检测方法的建立

在鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白保守区设计了一对特异性引物,建立PCR方法,对5株已知血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌和6株临床分离未定型的里默氏杆菌菌株以及病死鸭病料组织进行检测,结果表明不同样品都可扩增出592bp的特异目的条带,而对鸭源大肠杆菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门氏菌的扩增结果均为阴性,说明该PCR法具有较好的特异性,可用于快速鉴定鸭疫里默氏杆菌,也适用于病料的直接检测.     

鸭疫里默氏杆菌大罐发酵培养条件优化及验证

为进一步了解鸭疫里默氏杆菌的生长特性,本研究利用改良酵母肉汤培养基运用正交设计的方法,在10L的小型发酵罐中对鸭疫里默氏杆菌各种发酵条件进行了优化。随后将优化结果在GMP生产车间,利用200L大型发酵罐规模化试生产3批鸭疫里默氏杆菌抗原进行验证,结果显示,鸭疫里默氏杆菌活菌数比优化前提高30%,为鸭疫里默氏杆菌产业化奠定了基础。     

鸭疫里默氏杆菌病的临床症状、诊断与防治

鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌感染引起的鸭、鹅等家禽的一种接触性传染性,临床症状以纤维素性心包炎、肝周炎为主,可导致患病家禽体重降低、产蛋量下降,甚至死亡,从而造成严重的经济损失.本文对鸭疫里默氏杆菌病的流行病学、临床症状、诊治方法和预防措施等方面进行综述,旨在为日常生产中鸭疫里默氏杆菌病的防治工作提供参考.     

鸭疫里默氏杆菌病的防制思路

作为鸭的主要细菌性疾病,鸭疫里默氏杆菌病已在我国流行了30多年.上世纪80年代,我国发生的鸭疫里默氏杆菌病主要由血清1型鸭疫里默氏菌(Riemerelle anatipestifer,RA)引起.但1996年以来,陆续在我国发现了血清2型、6型、7型、10型、11型、13型、14型、15型、17型等血清型RA所引起的鸭疫里默氏杆菌病.因此,RA血清型呈多样化分布是上世纪90年代中期以来我国养鸭业所面临的新问题.     

鸭疫里默氏杆菌病的流行病学调查诊治

鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎,其病原为鸭疫里默氏杆菌、革兰氏阴性菌.该病是近几年造成肉鸭严重死亡的主要疾病之一.笔者对门诊资料记载的171例鸭病进行了统计分析,其中鸭疫里默氏杆菌病83例,占48.54%,现将该病的流行病学调查和诊断治疗情况报道如下:     

鸭疫里默氏杆菌病的诊治

鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎，其病原为鸭疫里默氏杆菌（以往曾称鸭疫巴氏杆菌），是现代养鸭业中造成严重死亡的主要疾病之一。我国自１９８２年发现鸭群中存在鸭疫里默氏杆菌感染以来，现各个省市都相继分离出该菌。近年来随着养鸭业的发展，本病呈上升趋势，且本病易与鸭大肠杆菌病、沙门氏杆菌病相混淆，给诊断和治疗带来一定困难，该病的发病龄期在７～８０日龄，发病率为５％～９５％，死亡率为５％～８０％，严重时会全群覆没。我站曾诊断出多例鸭疫里默氏杆菌病，现将最近一例的发病和诊治情况介绍如下。一、发病情况２００…     

血清1、2、4、5型鸭疫里默氏杆菌的RAPD

以37℃摇震培养舜口烛缸厌氧培养，从12种培养基中选择出鸭疫里默氏杆茼的最优培养基和培养条件。以血清1、2、4、5型的鸭疫里默氏杆菌代表株A1、A2、A3、A4为研究对象，培养增殖后分别提取基因组DNA，利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，对其基因组进行了DNA分析。从20条随机引物中筛选出8条随机引物，这8条引物对4种血清型的鸭疫里默氏杆菌的扩增图谱有较好的多态性，可作为分子标记鉴别4种不同血清型的鸭疫里默氏杆菌，同时还筛选出能在4个血清型的鸭疫里默氏杆菌代表株均出现相同的特征条带，而对照茼大肠杆菌、沙门氏茼无该条带的随机引物，从而为鸭疫里默氏杆菌病的分子诊断打下了一定基础。     

鸭疫里默氏杆菌病病原分离鉴定与血清抗体检测

湖北某鸭场10日龄雏鸭发生疑似鸭疫里默氏杆菌病,观察其临床具有神经症状,剖检具有心包炎、肝周炎和气囊炎等典型病变。无菌采集发病鸭脑组织进行细菌分离,并取血清进行抗体检测。分离菌经过菌落形态、染色形态、PCR以及血清学鉴定为Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌,血清OmpA-ELISA抗体反应呈阳性。15种抗生素的药敏试验结果显示分离菌对萘啶酸等喹诺酮类药物耐药,对头孢曲松等头孢类药物高度敏感,结果为鸭疫里默氏杆菌病防控提供依据。     

江苏安徽两省鸭疫里默氏杆菌病的流行病学调查研究

1996年1月至2001年6月，对江苏、安徽两省86个鸭场的发病鸭从日龄、品种、流行季节、流行菌株的血清型以及血清流行病学等方面进行了鸭疫里默氏杆菌病的调查。结果，在57个鸭场的樱桃谷鸭、番鸭及野鸭体内分离到鸭疫里默氏杆菌92株，而从麻鸭的病料中未分离到该菌；分离到病原的鸭最小为12日龄，最大为41日龄，主要集中在12－30日龄；这些地区鸭疫里默氏杆菌病的流行无明显季节性；这些地区鸭场疫里默氏杆菌流行菌株的血清型至少有5个，其中1、2和10是流行株的主型。     

鸭疫里默氏杆菌病防治

正1流行病学鸭疫里默氏杆菌病是强传染性、高死亡率的细菌性传染病,多见于1～8周龄雏鸭,2～3周龄雏鸭发病风险较高,成鸭发病较少。鸭疫里默氏杆菌病多发于春夏、秋冬交替时节,当环境改变,雏鸭免疫力低下时,其易发生鸭疫里默氏杆菌病。鸭疫里默氏杆菌病传播途径较多,病菌可通过种蛋、呼吸道及饮水、饲料等传播。     

鸭疫里默氏杆菌病与大肠杆菌病混合感染的综合防治

鸭疫里默氏杆菌病,又名鸭传染性浆膜炎或鸭疫巴氏杆菌病,是由鸭疫里默氏杆菌引起的接触性传染病,主要侵害雏鸭、雏鹅,是近几年水禽饲养场普遍存在、广泛流行的疫病之一,尤其是该病和埃希氏大肠杆菌病混合感染,对水禽生产造成严重威胁。1病原特性鸭疫里默氏杆菌是革兰氏阴性、不     

鸭疫里默氏杆菌巢式PCR检测方法的建立

为建立一种更加准确、敏感的鸭疫里默氏杆菌检测方法,根据鸭疫里默氏杆菌16S rRNA基因序列设计2对巢式PCR引物,在完成最佳反应条件筛选、特异性、敏感性、重复性试验的基础上,建立巢式PCR检测方法.结果表明,建立的巢式PCR对1、2、10、X型鸭疫里默氏杆菌的16S rRNA都能扩增出特异性片段,而对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门菌、鸭源金黄色葡萄球菌的基因组不能扩增出特异性片段,DNA最小检测量为0.392 fg/μL,是常规PCR的1 000倍.该巢式PCR方法具有快速、敏感、特异、通用的优点,可用于鸭疫里默氏杆菌感染的检测、分子流行病学调查和分离菌株的快速鉴定.     

新兴地区鸭疫里默氏杆菌血清3型的分离鉴定

通过对广东省新兴地区某番鸭养殖场疑似鸭疫里默氏杆菌病的病死鸭进行病原分离、生化鉴定及血清学鉴定,确诊该次疫情为鸭疫里默氏杆菌血清3型所引起。     

鸭疫里默氏杆菌病防控技术研究进展

鸭疫里默氏杆菌病已成为养鸭业危害最严重的疾病之一,本文对鸭疫里默氏杆菌的病原学特性、血清型、临床症状和诊断技术、药物防治以及疫苗研究的进展作了详细综述。     

鸭疫里默氏杆菌二价灭活疫苗株筛选及免疫原性研究

通过对山东省鸭疫里默氏杆菌病流行病学调查,发现山东省主要流行鸭疫里默氏杆菌的血清型为Ⅰ、Ⅱ型.将临床分离鉴定的两种血清型致病菌株进行毒力测定和抗原性分析,筛选出适合制成鸭疫里默氏杆茵二价灭活苗的种子菌株,并对其免疫原性进行了研究.     

鸭疫里默氏杆菌病及其防治

鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎,是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer, RA)引起的鸭、火鸡和多种禽类的一种接触感染性疾病.     

一例鸭疫里默氏杆菌的鉴定及耐药性检测

为了检测海南省文昌市某鸭场病鸭致病原及其耐药情况,试验分别采用分离培养、形态观察、生化检测、PCR鉴定和测序等方法对病鸭致病原进行鉴定,并采用药敏试验检测其耐药情况。结果表明:通过分离培养和形态观察确定该菌为革兰氏阴性杆菌;经生化试验初步鉴定出20株疑似鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA),经PCR鉴定及测序其中17株为鸭疫里默氏杆菌;鸭疫里默氏杆菌对环丙沙星、阿莫西林、氟苯尼考、利福平、庆大霉素、头孢哌酮、克林霉素、头孢唑肟敏感,对新霉素和磷霉素耐药。     

鸭疫里默氏杆菌ELISA检测方法的研究及初步应用

鸭疫里默氏杆菌病又名鸭传染性浆膜炎,是由鸭疫里默氏杆菌(Rimerella anatipstifer,RA)引起的鸭、鹅及火鸡等多种禽类的一种接触性传染病.