动物乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的研究进展

利用动物乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白产量高，工艺简单，在医药方面具有广泛的应用前景。本文就人乳铁蛋白的生物学功能，人乳铁蛋白基因的表达调控与载体的构建，生产人乳铁蛋白的方法、现状，存在的问题及其展望加以综述。     

克隆乳牛导入人乳蛋白转基因

通过转基因的方式把人母乳中乳铁蛋白转基因导入乳牛，使牛奶中含有人乳成分，即把牛奶人乳化。     

人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

为了研究人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及其对细胞凋亡、p53蛋白表达和Caspase-3活性的影响,试验采用MTT方法检测细胞的生长抑制率、DNA片段化试验检测细胞凋亡、流式细胞术测定细胞周期、Western-blot检测p53蛋白表达、Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3的活性.结果表明:人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的抑制呈现时间和剂量依赖性,有73%的Hela细胞停滞在G0～G1期;Western-blot检测结果显示人乳铁蛋白可以上调p53蛋白的表达; 人乳铁蛋白作用48 h后Caspase-3的活性是0小时时的5.5倍,二者差异极显著(P<0.01).结果说明人乳铁蛋白能显著抑制宫颈癌Hela细胞生长,其抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡、调控细胞周期、上调p53表达、活化Caspase-3有关.     

转基因羊乳中重组人乳铁蛋白的分离工艺研究

人乳铁蛋白(human lactoferrin,hLF)是一种隶属于铁结合蛋白家族的糖基化蛋白,具有多种生理功能.随着生物技术的发展,利用转基因技术在动物乳腺中生产重组人乳铁蛋白(recombinant human lactoferrin,rhLF)已成为可能,目前已在鼠、兔、羊、牛等动物乳汁中成功地表达了重组人乳铁蛋白.     

转人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞的研究

利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因的重组质粒，并导入到山羊乳腺上皮细胞，经G418及PCR筛选获得阳性细胞；转染细胞增殖后经激素诱导，培养液上清通过Western blot检测证明，转染细胞表达并分泌出人乳铁蛋白，其分子质量为58ku。     

转基因动物产品-人乳铁蛋白与测定方法

乳铁蛋白是一种分子量为76.386kDa的结合性糖蛋白，在其多肽链上有两条碳水化合物侧链，乳铁蛋白存在于人乳及牛乳中，乳腺为主要分泌器官，乳铁蛋白具有多种重要的生理功能，在多种免疫细胞表面存在乳铁蛋白受体，编码人乳铁蛋白的基因全长2.358kb，由其释译的最初乳铁蛋白为711个氨基酸残基，成熟乳铁蛋白为692个氨基酸残基，人乳铁蛋白的转基因研究已获成功，获得表达，并初步应用于临床治疗，乳铁蛋白的检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA），放射免疫（RIA），免疫卵迹(Western-Blot)及免疫组化方法，还可应用PCR和核酸探针技术对人乳铁蛋白转基因肉品进行检测。     

驴乳蛋白质组成及其与人乳和牛乳的比较

本文阐述了驴乳蛋白质的主要组分,并和牛乳及人乳的蛋白质组成特征进行了对比.驴乳中乳清蛋白比例明显高于牛乳,富含溶菌酶、乳铁蛋白和α-乳白蛋白,主要成分与人乳非常相似.驴乳是一种较理想的动物蛋白质资源.     

通过转基因改善家畜奶的品质

通过大量的研究报道，综述了转基因技术在改善家畜奶品质方面的研究概况，如提高奶中κ-、αs1-、αs2-和β－酪蛋白含量，增加溶菌酶含量，生产人乳铁蛋白和乳白蛋白，降低乳糖含量，使其品质更接近人奶。     

乳铁蛋白及其在家畜生产中的应用

乳铁蛋白 (Lactoferrin ,LF)是一种天然的、具有免疫功能的糖蛋白 ,由转铁蛋白演变而来 ,具有多种生物活性 ,如促进铁吸收、抑菌抗病毒、促进细胞增殖、调节骨髓细胞生成、调节补体系统、刺激溶菌酶再生、防止脂质过氧化等功能。它广泛存在于人与哺乳家畜的分泌物中 ,如人乳、牛乳(Lonnerdal,1 994)。乳铁蛋白在母乳中蛋白质含量仅次于酪蛋白 ,占普通母乳蛋白质的 1 0 % ,人乳中含量为 2～ 4mg/mL ,牛乳中含量为 0 0 2～0 35mg/mL ,商品乳铁蛋白一般是从牛乳中提取的。除乳汁外 ,其他消化、呼吸和生殖系统的外分泌液中也含有一定量的乳…     

乳腺生物反应器主要产品研究现状

文章就乳腺生物反应器主要产品加以综述,着重介绍人乳铁蛋白、人组织型溶纤酶原激活因子、人源化单克隆抗体、新生血管生长抑制因子、人血白蛋白、人促红细胞生成素研究进展和现状。     

白科学家培育出可产生乳铁蛋白的转基因山羊

据俄罗斯《科学信息》杂志报道，由俄罗斯和白俄罗斯科学家联合培育的两只转基因山羊最近在白俄罗斯顺利降生，小山羊成年后所产的奶中将含有人乳的乳铁蛋白。     

乳铁蛋白的生物学功能及在仔猪生产上的应用

乳铁蛋白（1actoferrin，LF）是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，主要是由乳腺上皮细胞表达和分泌。它是由Groves最先从牛乳中分离获得，之后Blance等从人乳中分离获得此蛋白正式将其命名为乳铁蛋白。LF分布在哺乳动物的乳汁和其他多种组织及泪液、精液、胆汁等分泌液中。     

乳铁蛋白及其活性多肽研究进展

从动植物的天然产品中寻找耐热活性因子 ,是饲料科学一个新兴的研究方向。家畜乳中含有多种具抗菌作用的蛋白质分子 ,对母畜的自身免疫及维持初生仔畜的胃肠道健康起重要作用。乳铁蛋白 (Lactoferrin ,简写为LF)是Groves于 1 960年首先从牛乳中分离获得 ,由于乳铁蛋白与铁结合形成红色的复合物 ,故始称红蛋白。 1 961年Blanc和Isliker将他们从人乳中分离出来的此种蛋白命名为乳铁蛋白。另有学者根据乳铁蛋白转运铁的功能将其称为乳转铁蛋白 (Lactotransfer rin)。LfcinB是牛乳铁蛋白在消化道正常生理条件下释放出的一种含 2 5个氨基酸残…     

人乳铁蛋白转基因小鼠杂交选育的研究

根据孟德尔遗传原理,对表达人乳铁蛋白转基因小鼠进行近交和远交,获得了纯合子小鼠(P品系1♀、Q品系1♀1♂)和双重杂合子小鼠(PQ杂合3♀3♂).催乳获得小鼠乳汁,ELISA检测乳汁中人乳铁蛋白的含量.通过比较发现,纯合子小鼠和单纯杂合子小鼠在表达量上没有明显差异,而双重杂合子小鼠的表达量则较前两者有明显提高.     

乳铁蛋白及其活性多肽的研究进展

从动植物的天然产品中寻找耐热活性因子,是饲料科学的一个新的研究方向。家畜乳中含有多种具抗菌作用的蛋白质分子,对母畜的自身免疫及维持初生仔畜的胃肠道的健康起重要作用。乳铁蛋白(1actoferrin,简写为LF)是Groves于1960首先从牛乳中分离获得,由于LF与铁结合形成红色的复合物,故始称为红蛋白。1961年Blanc和Isliker将他们从人乳中分离出来的此种蛋白正式命名为乳铁蛋白。另有学者据乳铁蛋白转运铁的功能将其称     

乳铁多肽及其生物学活性的研究进展

乳铁多肽(乳铁素)是乳铁蛋白在酸性环境下经胃蛋白酶水解,产生的具有特殊生理功能的活性多肽。乳铁素不仅保持乳铁蛋白的活性,而且活性要比乳铁蛋白更强。乳铁素具有抑菌、杀菌、抗癌、抗病毒、免疫调节等多种乳铁蛋白所具有的活性。乳铁素的抗菌活性很强,但其抗病毒活性相对较弱。文章讨论了乳铁素成员中活性较强的牛乳铁素和人乳铁素,内容涵盖了目前乳铁素研究的重点领域,讨论了乳铁素的作用范围及其作用机制,探讨了乳铁素结构与活性之间的联系。     

转基因牛多重PCR检测方法的建立

为建立一种快速检测转基因牛的多重PCR方法,针对牛线粒体16 S rRNA基因(BOS mtD-NA16 S rRNA,BOS)、转基因动物常用标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPT Ⅱ)、人乳铁蛋白编码基因(human laetoferrin gene,hLF)、人-α-乳清蛋白编码基因(human α-lactalb...     

人乳铁蛋白cDNA的克隆及在家蚕细胞中的表达

从人的乳腺组织中克隆了人乳铁蛋白(hLF)cDNA,其DNA序列与GenBank中另外4个hLF cDNA序列具有高度的同源性(同源性达到99%)。将人乳铁蛋白cDNA克隆在质粒pBacPAK8的BamHⅠ位点和XhoⅠ位点,构建成重组转移质粒pBacPAK-hLF。该质粒DNA与已线性化BacPAK6DNA共转染家蚕细胞BmN,在培养的贴壁细胞中挑出空斑,经过3轮纯化,获得重组病毒BmNPV-hLF。蛋白质免疫印迹法检测到在重组病毒感染的家蚕细胞中存在人乳铁蛋白基因的表达产物,分子量约78kD,ELISA法测定结果表明家蚕细胞中重组人乳铁蛋白(rhLF)相对表达量在表达120h达到最高值,约为13.5mg/L。体外生物活性试验表明重组hLF对大肠杆菌JM109具有抑菌活性。     

人乳中乳铁蛋白ELISA检测方法的研究

建立了一种ELISA检测人乳铁蛋白的方法.主要摸索了ELISA的工作条件,采用方阵滴定法确定抗原包被浓度和一抗稀释浓度,进而确定了二抗工作浓度,一抗以200 000倍稀释,二抗以100 000倍稀释,工作条件限制范围为1.56～100 ng/mL,用指数曲线拟合计算,所得回归方程为=1.2770×(1.0415-e-0.0388x)(R2=0.9992).通过重复性试验和交叉性试验验证了该法的重现性和特异性.本研究为研制人乳铁蛋白检测试剂盒奠定了基础.     

绵羊乳与其他乳种营养成分及乳清蛋白组分差异性分析

为研究绵羊乳与其他乳种之间营养成分及乳清蛋白组分的差异性,以山羊乳、牛乳、人乳为对照,分析不同泌乳阶段的湖羊乳、东佛里生羊乳及其杂交一代羊乳的乳清蛋白组成差异,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)和非变性-PAGE(Native-PAGE)分析标志性差异蛋白。结果表明:不同品种、不同泌乳阶段绵羊乳之间以及不同乳种之间的蛋白质、脂肪、乳糖等宏量营养素含量存在显著差异(P0.05),含量变化呈现趋势性;SDS-PAGE分析表明,绵羊乳和人乳的标志性差异蛋白为β-乳球蛋白和乳铁蛋白,绵羊乳和山羊乳的标志性差异蛋白为α-乳白蛋白,绵羊乳和牛乳的标志性差异蛋白为免疫球蛋白G重链;Native-PAGE分析表明,绵羊乳与山羊乳乳清蛋白之间存在1条差异性条带,绵羊乳与人乳、牛乳乳清蛋白之间存在3条差异性条带。