猪传染性胸膜肺炎放线杆菌江西株的分离鉴定及PCR诊断

从江西南昌地区一些猪场的疑似猪传染性胸膜肺炎放线杆菌典型病例中,采集病猪的病变组织,经细菌分离得到3个分离菌株JXAV-AIII0611、JXAV-AVII0611、JXAV-AX0611,经涂片染色镜检、培养性状观察、生化鉴定以及药敏试验证实该致病菌为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)。同时利用APP的oml基因设计引物,通过PCR成功扩增出预期的基因片段,为快速诊断该病打下了基础。     

重叠片断PCR方法构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ C突变载体pBSCA(-)

通过PCR克隆得到了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型完整的apxⅡC基因和部分apxⅡA基因约2 000 bp,通过重叠片段PCR方法使apxⅡC基因缺失,并将该DNA片段克隆到PBS-T载体中构建了apxⅡC基因失活的转移载体pBSCA(-),为构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型apxⅡC缺失菌株打下基础。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病小鼠模型的建立

为了探究猪传染性胸膜肺炎的危害性,采用猪胸膜肺炎放线杆菌7型菌株(APP-7)通过不同的途径感染常用实验动物,筛选出易感实验动物和最佳感染条件,构建感染动物模型。结果表明:感染小鼠的半数致死量(LD_(50))为6.7×10~7 CFU,成功建立了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌小鼠动物模型;小鼠感染细菌后表现出一系列病理变化,如呼吸困难,食欲减退,精神沉郁等,与自然发病的典型病例相似。     

猪胸膜肺炎放线杆菌16SrDNA基因的克隆及序列分析

为了阐明猪胸膜肺炎放线杆菌16S rDNA基因的遗传变异情况,选择猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的16S rDNA基因设计引物,应用聚合酶链反应(PCR)扩增APP的16S rDNA基因的部分序列,将该产物克隆到pMDI8-T载体上,重组质粒通过菌落PCR鉴...     

四川猪传染性胸膜肺炎放线杆菌耐药基因流行规律与表型相关性研究

【目的】掌握四川省部分规模化养猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌耐药基因流行规律与耐药表型相关性。【方法】对疑似患有猪传染性胸膜肺炎的病猪肺脏组织进行细菌分离鉴定和生化试验,并对分离株进行系统进化分析、耐药表型和耐药基因的检测。【结果】从病变肺脏组织分离到11株疑似猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株,呈革兰氏阴性短杆状,生化试验和DNA分子生物学鉴定11株分离株为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。11株分离株呈多重耐药现象,对四环素和多西环素耐药率为90.90%;对盐酸林可霉素、复方新诺明和链霉素耐药率为54.55%;对盐酸克林霉素、庆大霉素、氯霉素和氟苯尼考耐药率为27.27%;对卡那霉素和红霉素耐药率分别为18.18%和9.10%。检测到sul3、tetB、tetC、ermB、floR、ant(6')-Ia、aph(2')-Id和aac(6')-Ie-aph(2')-Ia 8种耐药基因,携带率分别为100%、40.0%、100%、100%、100%、85.7%、14.3%和14.3%,与耐药表型相符。【结论】该地区规模化养猪场发生呼吸道感染死亡育肥猪细菌性病原是猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,表现为多重耐药;分离株携带较多的耐药基因且与表型一致,为该病的防控和临床用药提供了科学依据。     

猪传染性胸膜肺炎病原的分离鉴定及防治

胸膜肺炎放线杆菌是猪传染性胸膜肺炎的致病菌,该病是一种呼吸道疾病,影响着全球养猪业的发展.本研究采用多种培养基进行接种培养,从某猪场典型传染性胸膜肺炎症状猪的肺脏和扁桃体中分离到了革兰氏阴性杆菌.通过该病原菌的培养特性、生物学特性和生化鉴定结果显示,该细菌为猪胸膜肺炎放线杆菌.同时本研究也为今后对该病的预防控制与诊断治疗奠定了有效的基础.     

二氧化氯泡腾片对猪两种重要细菌病病原的灭菌效果

为了解二氧化氯泡腾片对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌这两种猪的重要细菌病病原的灭菌效果,该试验分别选取猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌临床分离菌株作为试验对象,对二氧化氯泡腾片的杀菌效果进行定量研究,并进一步分析不同温度和pH值条件对该消毒剂杀灭两种病原菌效果的影响。结果显示,在室温条件下,二氧化氯泡腾片对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的最低有效杀菌浓度为0.938mg/L,最短杀菌时间为5min,对副猪嗜血杆菌的最低有效杀菌浓度则为3.75mg/L,最短杀菌时间为5min;而当二氧化氯浓度为7.5mg/L时,在温度分别为10、 20、 30℃和pH值分别为4、 6、 8条件下进行杀菌试验时,二氧化氯泡腾片对两种细菌病原的杀菌效果无差异。可见,二氧化氯泡腾片对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌均具有很好的杀灭效果,可作为养殖场猪舍及环境消毒的消毒剂,但使用时应注意最低有效浓度和最短杀菌时长。     

猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立

 根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87～ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和序列测定后 ,进一步将其插入pET 2 8a中构建了原核表达载体 ,SDS PAGE和Westernblotting分析表明 ,该基因在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中获得了表达 ,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为     

猪传染性胸膜肺炎的综合防治措施

<正>猪传染性胸膜肺炎(PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的以肺脏出血、坏死和纤维素性渗出为主要病变特征的高度接触性、致死性呼吸道传染病。该病发病急、病程短、死亡率高。近年来,APP已经成为危害养猪业的重要传染病之一,目前还没有很有效的措施控制本病。1病原PCP病原是胸膜肺炎放线杆菌,为革兰氏阴性小球杆菌,具有多形性,有荚膜,不形成芽孢。无运动性,为     

麻保沙星对实验性猪传染性胸膜肺炎的药效学研究

采用二倍稀释法测定了麻保沙星等对猪胸膜肺炎放线杆菌的体外抑菌作用,然后对人工感染胸膜肺炎放线杆菌的猪进行临床治疗试验。猪人工发病4 h后,分别以1.25、2.5、5 mg/kg体重的剂量肌注给药麻保沙星(每组10头),1 d 1次,连续4 d。结果表明:麻保沙星对胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度为0.01μg/mL;对猪传染性胸膜肺炎,麻保沙星(2.5、5 mg/kg)有显著疗效,治愈率分别为80%及90%。     

猪胸膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取及特性研究

【目的】从猪血清7型胸膜肺炎放线杆菌中提取纯化尿素酶,并对其生物特性和理化特性进行研究。【方法】超声破碎放线杆菌粗提尿素酶,再采用硫酸铵盐析和Sephadex G-200凝胶过滤层析对该酶进行纯化,分析其活性及理化特性。【结果】最适于猪胸膜肺炎放线杆菌尿素酶保持活性的pH为8.5,温度为45℃。在该条件下其比酶活约为96.253 U/mg;SDS-PAGE电泳显示,胸膜肺炎放线杆菌尿毒酶含分子质量为11,25和60 ku的亚单位。【结论】与传统方法相比,超声破壁和Sephadex G-200凝胶过滤层析纯化法简单快速,重复性好,测定尿素酶的特性稳定,能满足实验室检测的要求。     

13种中药体外抑制猪传染性胸膜肺炎放线杆菌试验

研究13种具有清热解毒功效的中药对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的体外抑菌效果,采用煎煮法制备药液,对部分临床分离的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌致病菌株进行单味及部分复方药的体外抑菌试验,测量各药液对胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,简称MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,简称MBC)。结果表明,单味中药水煎液具有显著体外抑菌活性的为五倍子,其抑菌圈直径为15 mm,MIC为7. 80 mg/m L,MBC为15. 60 mg/m L;五倍子与野拔子复方药液的抑菌效果优于五倍子单味药,其抑菌圈直径为18 mm,MIC为3. 90 mg/m L,MBC为7. 80 mg/m L。试验结果为进一步研发以五倍子与野拔子为主要成分的抑制猪传染性胸膜肺炎放线杆菌复方中药制剂奠定基础。     

猪传染性胸膜肺炎临床诊断与防治

正猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(APP)所致的一种高度接触性、致死性呼吸道疾病,同时巴氏杆菌也是引起坏死性胸膜肺炎的病原,胸膜放线杆菌属革兰氏阴性小球杆菌,具有气囊,且多行性。1胸膜肺炎放线杆菌致病性猪是本菌高度专一性的宿主,寄生在扁桃体和呼吸道,具有高度宿主特异性,在最急性和急性感染期间,不仅发现有肺脏的损伤,而且鼻子也有大量的分泌物,本病的潜伏期     

猪传染性胸膜肺炎的诊治

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的猪呼吸系统接触性传染病,以急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性纤维素坏死性胸膜肺炎为特征。一、病原本病病原为胸膜肺炎放线杆菌。本菌抵抗力不强,易被常用消毒药杀灭。二、流行病学     

鸭源鸡杆菌外膜蛋白W基因扩增及序列分析

为了解不同鸭源鸡杆菌菌株外膜蛋白W基因(ompW)的差异性,对不同地域32株鸭源鸡杆菌ompW基因进行扩增、测序,并应用DNAstar/MegAlign和MEGA.5.05软件对其进行比对及遗传进化分析。结果表明:ompW基因存在于所有检测的鸭源鸡杆菌中。全长在630~711bp,编码209~236个氨基酸。与参考株UMN179的ompW核苷酸同源性为88.7%~100%,氨基酸同源性为86.7%~99.6%。不同来源的鸭源鸡杆菌的核苷酸同源率为84.1%~100%,氨基酸同源性为78.7%~99.6%。进化树分析表明,鸭源鸡杆菌ompW序列差异与分离地理位置,毒力无明显的相关性。     

猪胸膜肺炎放线杆菌Ⅱ型分泌蛋白结构与功能的研究

猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起猪传染性胸膜肺炎,是猪的最重要呼吸道传染病之一。通过筛选APP 3～8 kb随机基因组文库,获得1株阳性克隆。测序拯救质粒得到序列,通过BLAST分析确定此片段为APP Ⅱ型分泌蛋白基因,预计成熟蛋白分子量为45.716 KD。根据序列设计特异性引物PCR扩增该基因,分子克隆表达该Ⅱ型分泌蛋白。Western blot结果表明,该蛋白与APP康复期血清发生反应;研究还发现,纯化的Ⅱ型分泌蛋白能结合C3。     

猪传染性胸膜肺炎的诊断与防治

正猪传染性胸膜肺炎是猪胸膜肺炎放线杆菌引起的一种高度传染性呼吸道疾病,以急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征,急性病例病死率高,慢性病例常能耐过,随着集约化养殖业的发展,本病的发生有逐年增多的趋势。1病原病原体为胸膜肺炎放线菌(原名胸膜肺炎嗜血杆菌,亦称副溶血嗜血杆菌),为小到中等大小的球杆状到杆状,具有显著的多形性。菌体有荚膜,不运动,革兰氏阴性。猪胸膜肺炎放线杆菌为革兰氏染色阴性的     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌变异株的分离与鉴定

对江苏泰兴某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎病料进行实验室分离培养,成功分离到1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,并对其进行生化特性、双抗夹心ELISA鉴定。为进一步分析该分离株的血清型,针对ApxIVA和ApfA保守基因设计2对检测引物,PCR结果表明:该分离株未扩增出预期大小的片段,说明该分离株很有可能是1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌变异株,其血清型还有待进一步鉴定。     

浅论猪传染性胸膜肺炎的诊断和治疗

<正>猪传染性胸膜肺炎(PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的一种高度接触性、致死性呼吸道传染病,临床上以急性败血症、发热、咳嗽、高度呼吸困难为特征,是被国际公认的危害现代养猪业的重要疫病之一,给集约化养猪业带来了巨大的经济损失;特别是近年来本病的流行呈迅速上升且混合型感染趋势,危害日趋严重,务必引起高度重视。一、病原与流行病学猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种呼吸道传染病。目前,该病已广泛分布于世界多数国家,且     

猪传染性胸膜肺炎的综合防制技术

猪传染性胸膜肺炎,是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的一种高度接触传染性、致死性呼吸道传染病。本病病原为胸膜肺炎放线杆菌（APP）。