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猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立
引用本文:刘建杰,何启盖,陈焕春,吴斌,徐晓娟,刘军发,唐先春,贝为成.猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立[J].中国农业科学,2004,37(1):148-151.
作者姓名:刘建杰  何启盖  陈焕春  吴斌  徐晓娟  刘军发  唐先春  贝为成
作者单位:华中农业大学动物医学院动物病毒室 武汉430070 (刘建杰,何启盖,陈焕春,吴斌,徐晓娟,刘军发,唐先春),华中农业大学动物医学院动物病毒室 武汉430070(贝为成)
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 2 0 0 0 11),湖北省重点科技攻关资助项目 ( 2 0 0 1AA2 0 1B0 2 )
摘    要: 根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87~ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和序列测定后 ,进一步将其插入pET 2 8a中构建了原核表达载体 ,SDS PAGE和Westernblotting分析表明 ,该基因在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中获得了表达 ,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为

关 键 词:猪胸膜肺炎放线杆菌  apxICA基因  克隆  原核表达  ELISA
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