玉米赤霉烯酮对后备母猪子宫和卵巢抗氧化和炎症指标及相关基因表达的影响

试验旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)对后备母猪子宫和卵巢抗氧化和炎症指标及相关基因表达的影响。选择胎次和体重((23.20±0.68) kg)相近的长×大二元后备母猪48头,随机分为4组,每组设12个重复,每个重复1头母猪。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组(T1、T2、T3组)饲喂在基础饲粮中分别添加200、800、1600μg·kg~(-1)ZEA的试验饲粮。预试期7 d,正试期40 d。结果如下:1)与CON组相比,T3组血清T-AOC和SOD活性显著降低(P0.05),MDA水平显著升高(P0.05)。2)与CON组相比,子宫组织中,T2和T3组T-AOC活性显著降低(P0.05),T3组SOD活性极显著降低(P0.01),卵巢组织中,T3组T-AOC活性、T2组GSH-Px和SOD活性显著降低(P0.05),T3组MDA水平显著升高(P0.05)。3)与CON组相比,T2组血清TNF-α和IL-4水平显著升高(P0.05),T1～T3组血清IL-10水平显著降低(P0.05)。4)与CON组相比,子宫组织中,T2组IL-1β水平显著升高(P0.05),T1和T3组IL-10水平显著降低(P0.05)。卵巢组织中,T2组TNF-α水平显著升高(P0.05),T1～T3组IL-4水平显著升高(P0.05)。5)子宫组织中,T3组Cu/Zn-SOD mRNA的相对表达显著低于CON组(P0.05),T2组IL-1βmRNA的相对表达显著高于CON组(P0.05)。6)卵巢组织中,T3组GSH-Px mRNA的相对表达显著低于CON组(P0.05),T2组IL-1βmRNA的相对表达显著高于CON组(P0.05)。综上所述,ZEA能通过抑制SOD和GSH-Px的表达与合成,降低后备母猪子宫和卵巢的抗氧化性能,并引起氧化应激。ZEA能通过促进TNF-α和IL-1β表达与合成引起子宫和卵巢的炎症反应,抑制IL-10的表达与合成从而抑制两组织的抗炎反应。     

白藜芦醇对玉米赤霉烯酮致小鼠肝脏氧化损伤及炎症的保护作用

为探究白藜芦醇（RSV）对玉米赤霉烯酮（ZEA）中毒小鼠肝脏损伤是否具有保护作用,试验将40只清洁级雄性BALB/c小鼠随机分为5组：对照组（生理盐水）、ZEA组（40 mg/kg）、不同浓度的RSV （50、100或200 mg/kg）与ZEA （40 mg/kg）共处理组,每组8只,各组均灌胃给药,试验期12 d。试验结束后采集小鼠肝脏样品,计算肝脏系数,采用苏木素-伊红（HE）染色和免疫组织化学染色法观察各组肝脏病理变化;检测肝脏NF-κB蛋白表达;比色法检测肝脏组织中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性及血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）活性,ELISA法检测血清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和IL-1β含量。结果显示,与对照组相比,ZEA组小鼠肝组织发生明显病理学变化;与ZEA组相比,不同浓度RSV与ZEA共处理组小鼠肝脏组织病理学变化都有所减轻。免疫组织化学结果显示,与对照组相比,ZEA组肝脏NF-κB蛋白表达增多;与ZEA组相比,不同浓度的RSV与ZEA共处理组肝脏NF-κB蛋白表达均有下降。与对照组相比,ZEA组肝脏系数和肝脏组织MDA含量极显著升高（P<0.01）,肝脏组织SOD和CAT活性显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）,血清中AST、ALT和LDH活性,IL-6、TNF-α和IL-1β含量均极显著升高（P<0.01）。与ZEA组相比,不同浓度RSV与ZEA共处理组肝脏组织CAT活性显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,血清中AST、ALT和LDH活性及IL-6和IL-1β含量显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）;50 mg/kg RSV与ZEA共处理组肝脏组织SOD活性和血清中TNF-α含量分别显著升高（P<0.05）和极显著降低（P<0.01）;100和200 mg/kg RSV与ZEA共处理组肝脏系数和肝脏组织MDA含量显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）。结果表明,ZEA对小鼠肝脏有严重的氧化及炎症损伤作用,RSV对ZEA中毒的肝损伤具有一定保护作用,尤其以100 mg/kg RSV保护效果最佳。     

植物精油和柠檬酸复合物对肉鸡肠道屏障功能及炎症反应的影响

本试验通过研究饲粮中添加不同水平植物精油和柠檬酸复合物对肉鸡肠道屏障功能、血清细胞因子含量和关键免疫蛋白基因表达的影响,旨在探索植物精油和柠檬酸复合物在肉鸡生产上的适宜添加剂量。选用1日龄健康科宝肉鸡1 344只,随机分为4组（每组12个重复,每个重复28只鸡）,对照组饲喂基础饲粮,3个试验组（T1、T2、T3）分别饲喂添加0.8、1.0和1.5 kg/t的包被植物精油和柠檬酸复合物试验饲粮,试验期为42 d。试验结束当天,每个重复选取6只接近平均体重的肉鸡翅静脉采血,然后屠宰并取空肠、脾脏、肠系膜淋巴结（MLNs）。分别测定血清中D-乳酸（D-LA）、细胞因子的含量及二胺氧化酶（DAO）活性;并对空肠黏膜紧密连接蛋白以及脾脏和MLNs中Toll样受体（TLRs）的mRNA表达量进行测定。结果表明：与对照组相比,T2组肉鸡血清中D-LA含量和DAO活性均极显著降低（P<0.01）;T3组肉鸡血清中D-LA含量和DAO活性均显著降低（P<0.05）。T2和T3组肉鸡空肠封闭蛋白1（Claudin-1）的mRNA相对表达量均显著升高（P<0.05）,T2组闭合小环蛋白1（ZO-1）的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）。T1组血清中IL-1β含量显著降低（P<0.05）,MLNs中TLR4 mRNA表达量显著降低（P<0.05）;T2组血清中IL-1β含量极显著降低（P<0.01）,IL-2含量显著提高（P<0.05）,脾脏和MLNs中TLR4 mRNA相对表达量极显著或显著降低（P<0.01;P<0.05）;T3组血清中IL-1β含量极显著降低（P<0.01）,TNF-α含量显著降低（P<0.05）,IL-2含量显著升高（P<0.05）,脾脏和MLNs中TLR4 mRNA相对表达量极显著降低（P<0.01）。与T1组相比,T2组血清中D-LA含量和DAO活性均显著降低（P<0.05）,TNF-α含量显著降低（P<0.05）;T3组血清中IL-1β含量显著降低（P<0.05）。综上所述,饲粮中添加植物精油和柠檬酸复合物能够提高肉鸡肠道紧密连接蛋白的表达,降低肠道通透性,下调促炎细胞因子的表达,进而增强肠道屏障功能,缓解机体炎症。根据本试验结果,推荐科宝肉鸡饲粮植物精油和柠檬酸复合物适宜添加量为1.0 kg/t。     

日粮添加不同水平芦丁对热应激小鼠睾丸组织的影响

本试验旨在探讨日粮添加不同水平芦丁对缓解热应激小鼠睾丸组织损伤的影响。将30只5周龄体重相近（20～22 g）的ICR系雄性小鼠随机分为5组,各组小鼠分别饲喂基础日粮添加0（CON组）、0（HS组）、250（HS+R250）、500（HS+R500）和1 000（HS+R1000） mg·kg^-1芦丁的日粮,饲养10 d后,除对照组（CON）外,所有小鼠在每天10：00至14：00之间置于42℃恒温箱中连续处理8 d后屠宰取样分析。结果显示：1）与CON组相比,HS组小鼠睾丸指数无显著变化（P>0.05）,而日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著提高热应激小鼠睾丸指数（P<0.05）;小鼠睾丸组织切片结果显示,与CON组相比,HS组小鼠生精小管直径和横截面积显著降低（P<0.05）,生精细胞脱落比率显著增加（P<0.05）;与HS组相比,HS+R250组小鼠生精小管横截面积显著增加（P<0.05）,生精细胞脱落比率显著降低（P<0.05）,HS+R500组生精细胞脱落比率也显著降低（P<0.05）,HS+R1000组小鼠生精小管直径显著增加（P<0.05）;小鼠睾丸指数、生精小管直径及生精小管脱落比率在芦丁处理组与CON组之间无显著差异（P>0.05）,但HS+R250组小鼠睾丸生精小管横截面积显著高于CON组（P<0.05）。2）与CON组相比,HS组小鼠睾丸组织丙二醛（MDA）含量显著升高（P<0.05）,总抗氧化能力（T-AOC）与还原型谷胱甘肽（GSH）含量以及血红素酶-1（HO-1） mRNA的表达量均显著降低（P<0.05）;日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著降低热应激小鼠睾丸组织中MDA含量（P<0.05）,提高T-AOC与GSH含量（P<0.05）,并增强核因子E2相关因子2（Nrf2）、HO-1和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px） mRNA的表达量（P<0.05）,而添加500和1 000 mg·kg^-1芦丁也显著提高了GSH含量（P<0.05）;与CON组相比,除HS+R250组Nrf2 mRNA表达量显著高于CON组（P<0.05）外,芦丁组热应激小鼠睾丸组织抗氧化相应基因与酶活指标均无显著性变化（P>0.05）。3）热应激小鼠睾丸中核因子-κB （NF-κB）、TOLL样受体4（TLR-4）和Bax的mRNA表达量显著增加（P<0.05）,而Bcl-2表达量显著降低（P<0.05）;日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著降低NF-κB、TLR-4、髓样分化因子88（MyD88）、白细胞介素-Iβ（IL-1β）和Bax mRNA表达量（P<0.05）,增强Bcl-2的表达水平（P<0.05）;添加500 mg·kg^-1芦丁显著降低NF-κB和TLR-4表达量（P<0.05）,而1 000 mg·kg^-1芦丁能够显著增加Bcl-2的表达（P<0.05）;小鼠睾丸组织中免疫和增值凋亡相关基因的表达量在添加芦丁组及CON组之间无显著性差异（P>0.05）。结果提示,日粮添加适宜剂量芦丁具有改善热应激小鼠睾丸组织形态及功能的效果,其机制可能与芦丁通过Nrf2信号通路缓解氧化应激,通过TLR-4/NF-κB信号通路抑制炎症反应及调控Bax/Bcl-2 mRNA的表达密切相关。本试验条件下日粮添加250 mg·kg^-1芦丁的效果较好。     

母猪妊娠期不同能量水平对后代公猪生长性能、睾丸发育与免疫的影响

试验旨在研究母猪妊娠期能量水平对后代睾丸发育与免疫的影响及其作用机理。选取30头体重、背膘相近的7~9胎长白×约克夏（LY）经产母猪,按照体重和胎次随机分为2组,每组15个重复,每个重复1头母猪,从妊娠当天分别饲喂正常能量（CON）和低能量饲粮（LE,12.55 MJ/kg）,直到分娩,所有母猪哺乳期均饲喂同一饲粮。分娩后,分别从CON和LE组中挑选体重为平均体重±0.05 kg的后代公猪各15头,断奶后所有公猪按阶段饲喂相同饲粮,于仔猪120日龄时结束试验。记录公猪每个月的体重并计算阶段平均日增重和平均日采食量;采集28和120 d的血液进行血清生化指标和免疫相关细胞因子检测,采集28和120 d的睾丸进行睾丸细胞计数和睾丸免疫相关基因检测。结果表明,与对照组相比,LE组0~59 d平均日增重极显著降低（P<0.01）,28~89 d平均日采食量和0 d睾丸重显著降低（P<0.05）,28 d睾丸指数显著增加（P<0.05）;LE组0和120 d睾丸组织内间质细胞数目、120 d生殖细胞数目、28和120 d支持细胞数目均显著降低（P<0.05）;LE组血清中28 d甘油三酯（TG）和120 d睾酮（T）含量均极显著升高（P<0.01）、雌二醇（E₂）含量极显著降低（P<0.01）,TG、T和E₂含量均存在时间和能量的交互作用（P<0.01）;LE组血液中胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的含量120 d时极显著降低（P<0.01）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、TC、HDL-C三者均无时间和能量的交互作用（P>0.05）。随着公猪日龄增加,血液中白细胞介素-1α（IL-1α）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、免疫球蛋白（IgG）浓度均极显著增加（P<0.01）,其中TNF-α和IL-1β有能量和时间的交互作用。与对照组相比,LE组28 d时TNF-α含量显著降低（P<0.05）,120 d时IL-1β水平显著升高（P<0.05）。LE组28 d紧密连接蛋白1（ZO1）及0和28 d闭合蛋白（Occludin）基因相对表达量均显著降低（P<0.05）,28和120 d时连接黏附分子1（JAM1）基因相对表达量显著增加（P<0.05）。LE组0 d时CCL4基因和28 d时IL-1α基因相对表达量均显著降低（P<0.05）,0和120 d时趋化因子2（CCL2）基因及28 d时细胞间黏附分子1（ICAM1）和酪氨酸激酶2（JAK2）基因相对表达量均显著增加（P<0.05）。与对照组相比,28 d时Toll样受体1（TLR1）基因、0 d时肿瘤坏死因子受体超家族成员Ⅰ型（TNFRSF1A）基因相对表达量均显著降低（P<0.05）,0 d时B细胞κ轻肽基因增强子核因子抑制因子（NFKBIA）、IL-1β和干扰素（IFNG）基因相对表达量均显著增加（P<0.05）。综上所述,母猪妊娠期摄入12.55 MJ/kg能量水平饲粮可降低后代公猪日增重、平均日采食量和睾丸重;降低后代公猪睾丸内生殖细胞数量及免疫相关细胞因子和睾丸免疫相关基因的表达,从而对后代成年后的免疫能力和繁殖性能产生深远影响。     

咖啡酸对玉米赤霉烯酮诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用

卵巢颗粒细胞通过与卵母细胞相互作用及其自身分泌作用为卵泡的形成和发育成熟提供特殊的微环境。多种有害刺激可引起颗粒细胞凋亡和代谢失调从而降低卵母细胞质量,对胚胎的形成产生负面影响。玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEA）是畜禽养殖业中常见的造成卵巢颗粒细胞损伤的霉菌毒素,且缺少有效治疗药物。因此,本试验用ZEA造成小鼠卵巢颗粒细胞损伤,探究咖啡酸对ZEA诱导的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用。通过机械法分离小鼠卵巢颗粒细胞;运用间接免疫荧光法对分离出的细胞进行鉴定;使用MTT法测定咖啡酸对正常小鼠卵巢颗粒细胞活性的影响;选取200、100和50 μg·mL^-1咖啡酸分别与ZEA共处理颗粒细胞,同时设置细胞对照组和ZEA模型组,24 h后显微镜观察细胞形态及贴壁情况,MTT法检测细胞活力;qRT-PCR技术检测caspase-3 mRNA的表达;Western blot检测cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平。结果发现,FSHR阳性染色大量出现在试验组细胞胞浆中,提示分离到的细胞是小鼠卵巢颗粒细胞;咖啡酸对卵巢颗粒细胞没有毒性作用且细胞活力均在90%以上;与空白对照组细胞相比,ZEA组细胞体积较小,贴壁较差,细胞间隙增大,细胞活力显著降低（P<0.001）,caspase-3 mRNA相对表达量以及cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白表达水平显著升高（P<0.001）,而给予咖啡酸处理后细胞间隙减小,贴壁紧密,细胞活力显著升高（P<0.001）,显著降低ZEA诱导的caspase-3 mRNA含量增加（P<0.001）,显著降低凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表达（P<0.001）。本研究发现,咖啡酸可通过抑制ZEA诱导的细胞凋亡,恢复颗粒细胞活性。     

加味葛根芩连汤对湿热泄泻仔猪肠道炎症和损伤修复的作用

通过用加味葛根芩连汤治疗仔猪的湿热泄泻,探讨其对湿热泄泻仔猪肠道的修复作用。选取8~15日龄未断奶仔猪（大白×长白）30头,其中健康仔猪6头,为对照组;有粪色黄褐而臭、小便短赤、舌质红等症状的泄泻仔猪24头,分为湿热泄泻组、加味葛根芩连汤低剂量组、加味葛根芩连汤中剂量组和加味葛根芩连汤高剂量组,每组6头。对照组和湿热泄泻组仔猪灌服生理盐水,药物组仔猪灌服加味葛根芩连汤（按生药量,低、中、高剂量组药物添加量分别为2.5、5.0和10.0 g·d^-1）,连续5 d。在服药的第0、3、5天记录各组仔猪的粪便评分。取对照组、湿热泄泻组、加味葛根芩连汤中剂量组仔猪十二指肠、空肠、回肠和结肠进行组织切片和H.E.染色,取十二指肠进行增殖性细胞核抗原（PCNA）免疫组化染色;用荧光定量PCR检测对照组、湿热泄泻组、加味葛根芩连汤中剂量组仔猪空肠TLR4、TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达量变化。湿热泄泻严重破坏了仔猪的十二指肠、空肠、回肠和结肠结构,尤其是十二指肠和空肠,十二指肠隐窝处PCNA表达量显著升高（P<0.05）。与对照组相比,湿热泄泻组仔猪空肠TLR4（P<0.05）、TNF-α（P<0.01）、IL-1β（P<0.01）和IL-6（P<0.05）mRNA表达量显著升高。相比于湿热泄泻组,加味葛根芩连汤显著降低了仔猪的粪便评分（P<0.05）。中剂量加味葛根芩连汤组仔猪的小肠和结肠的组织结构得到显著改善,十二指肠的肠腔中有不断脱落的绒毛团,绒毛中的PCNA表达量极显著升高（P<0.01）。与湿热泄泻组相比,加味葛根芩连汤中剂量组空肠TLR4（P<0.05）、TNF-α（P<0.01）、IL-1β（P<0.01）和IL-6（P<0.05）mRNA表达量显著降低。综上表明,加味葛根芩连汤可通过促进隐窝干细胞的增殖和降低炎症反应对湿热泄泻造成的仔猪肠道损伤进行修复。     

玉米赤霉烯酮对青年母猪子宫发育、生长激素分泌及其受体分布与表达的影响

本试验旨在研究玉米赤霉烯酮(ZEA)对青年母猪子宫发育、生长激素(GH)分泌及其受体(GHR)分布与表达的影响。选择胎次和体重[(23.20±0.68)kg]相近的长×大二元青年母猪48头,将其随机分为4组,每组12个重复,每个重复1头。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组(T1、T2、T3组)饲喂在基础饲粮中分别添加200、800、1600μg/kg ZEA的试验饲粮。预试期7 d,正试期40 d。结果表明:1)各组间血清及子宫组织中GH含量均无显著差异(P>0.05)。2)各组间子宫组织中ZEA含量均无显著差异(P>0.05)。3)各组间始重、末重、平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及料重比(F/G)均无显著差异(P>0.05);但与CON组相比,T2组子宫指数显著升高(P<0.05),T3组极显著升高(P<0.01)。4)与CON组相比,试验组子宫肌层和内膜增厚,子宫腺数量增多,毛细血管增多,T2和T3组还出现炎性反应及上皮细胞坏死。5)与CON组相比,T2组GHR和Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)mRNA相对表达量及T3组GHR mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),信号转导与转录激活因子3(STAT3)mRNA相对表达量各组间无显著差异(P>0.05)。6)ZEA对GHR在青年母猪子宫中的分布与定位无明显影响,但与CON组相比,试验组GHR免疫阳性物质分布增多,免疫阳性强度增大。7)各组间子宫GHR蛋白表达量没有显著差异(P>0.05);但与CON组相比,T2组灰度值有升高的趋势(P=0.09)。综上所述,ZEA对青年母猪的生长性能以及血液和子宫中GH和ZEA的含量均无显著影响,但可通过升高GHR、JAK2和STAT3的mRNA相对表达量、增强GHR免疫阳性及升高蛋白表达量来增强GH的生物效应,使子宫发育异常,导致子宫指数出现极显著升高,子宫肌层和内膜增厚,子宫腺和毛细血管数量增多。     

葛根素对饲喂氧化大豆油肉鸡小肠黏膜屏障功能及抗氧化能力的影响

本试验旨在研究葛根素对饲喂氧化大豆油饲粮黄羽肉鸡小肠黏膜形态结构、紧密连接蛋白基因表达及抗氧化能力的影响。试验采用2×2因子设计,因子包括油脂质量（新鲜大豆油和氧化大豆油）和葛根素添加水平（0、750 mg·kg^-1）。选取健康1日龄雌性黄羽肉鸡360只,随机分成4个处理组,分别为新鲜大豆油饲粮组、新鲜大豆油+葛根素（750 mg·kg^-1）饲粮组、氧化大豆油饲粮组和氧化大豆油+葛根素（750 mg·kg^-1）饲粮组,每组6个重复,每个重复15羽。在28和56日龄时,每个重复随机选取1只鸡,取十二指肠、空肠、回肠检测小肠形态结构和测定小肠黏膜紧密连接蛋白基因表达及抗氧化指标。结果表明：1）饲喂氧化大豆油显著降低28日龄肉鸡十二指肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度（V/C）、回肠V/C和claudin-1 mRNA表达量以及56日龄肉鸡3个肠段的绒毛高度及V/C （P<0.05）,显著升高56日龄3个肠段的隐窝深度（P<0.05）。饲粮中添加葛根素显著提高28日龄肉鸡空肠绒毛高度和V/C、回肠闭合小环蛋白1（ZO-1） mRNA表达量和56日龄肉鸡十二指肠V/C、空肠和回肠的绒毛高度及V/C （P<0.05）,显著降低3个肠段的隐窝深度（P<0.05）。2）饲喂氧化大豆油显著升高28日龄十二指肠还原型谷胱甘肽（GSH）含量和空肠还原型谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性（P<0.05）,并显著降低28日龄回肠GSH含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力和总抗氧化能力（T-AOC）（P<0.05）。饲粮中添加葛根素显著提高28日龄肉鸡十二指肠GSH-Px活性（P<0.05）。饲喂氧化大豆油显著降低56日龄回肠SOD活性和T-AOC （P<0.05）,饲粮中添加葛根素显著提高56日龄肉鸡十二指肠SOD和回肠SOD、GSH-Px活性（P<0.05）,显著降低56日龄肉鸡空肠GSH含量、SOD活性、T-AOC和回肠T-AOC （P<0.05）。综上所述,饲喂氧化大豆油破坏肠道黏膜形态结构、降低紧密连接蛋白基因的表达量和抗氧化能力,添加葛根素可提高肉鸡小肠黏膜紧密连接蛋白基因的表达量,改善氧化损伤条件下肠道黏膜形态结构,提高抗氧化酶的活性而提高其抗氧化能力。     

原花青素对玉米赤霉烯酮诱导牦牛颗粒细胞氧化损伤的保护作用研究

旨在探究原花青素（procyanidins,PC）在玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEA）诱导牦牛颗粒细胞产生氧化损伤后,对颗粒细胞生长增殖、抗氧化性以及激素分泌的影响。本试验选取3～5岁的健康牦牛（n=3）,完成卵巢颗粒细胞的分离培养,并通过免疫荧光染色鉴定颗粒细胞纯度。通过CCK-8法分别比较不同浓度ZEA （0（对照组）、5、10、20、40、60、80和100 μmol·mL^-1）、不同浓度PC （0（对照组）、0.05、0.5、2.5、5、10、50和100 μg·mL^-1）以及50 μmol·mL^-1 ZEA+5 μg·mL^-1 PC联合处理对牦牛颗粒细胞活性的影响。通过ELISA法检测对照组（未添加ZEA及PC）、50 μmol·mL^-1 ZEA组和50 μmol·mL^-1ZEA+5 μg·mL^-1PC联合处理组牦牛颗粒细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）以及雌二醇（E₂）水平。采用实时荧光定量PCR法检测不同组颗粒细胞中部分增殖生长、凋亡、抗氧化及E₂合成相关基因的表达水平。结果显示,本研究所分离培养得到的细胞表达颗粒细胞标志蛋白FSHR,具有较高的纯度,可以满足后续试验要求。添加不同浓度ZEA后,颗粒细胞活力随着ZEA浓度的升高而显著降低（P<0.05）。在一定浓度范围内（0~5 μg·mL^-1）,随着浓度的上升,PC对颗粒细胞的活力有显著提高作用（P<0.05）,且在浓度为5 μg·mL^-1时对细胞活力的提高作用最明显。与ZEA处理组相比,ZEA与PC联合处理后颗粒细胞的数量增加且细胞活力极显著提高（P<0.05）,颗粒细胞增殖生长相关基因PCNA和IGF-Ⅱ 以及抗凋亡相关基因XIAP和BCL-2的表达显著上调（P<0.05）。相反,促凋亡相关基因BAX和CASP3的表达显著下调（P<0.05）。同时,ZEA+PC联合处理后能显著降低牦牛颗粒细胞活性氧水平并促进颗粒细胞分泌E₂（P<0.05）,颗粒细胞中的抗氧化相关基因SOD2、GPX1及CAT和E₂合成相关基因STAR、CYP11A1及HSD3B的表达量显著上调（P<0.05）。上述结果表明,PC可提高经ZEA处理后颗粒细胞的生长增殖能力,上调颗粒细胞的活力,提高抗氧化能力,降低ROS水平以及提高E₂的分泌水平。综上所述,PC对ZEA诱导的牦牛颗粒细胞氧化损伤有一定保护作用。本研究为ZEA毒性的防治和畜牧业生产中PC的应用提供了一定的研究数据和理论支持。     

薯蓣皂苷元对顺铂诱导大鼠肾损伤的缓解作用

【目的】 探究薯蓣皂苷元（diosgenin,Dio）对顺铂（cisplatin,CP）诱导大鼠肾损伤的缓解作用。【方法】 选取24只健康的雄性Wistar大鼠,随机分为对照组（C）、Dio组（Dio）、模型组（CP）和Dio干预组（Dio+CP）。C和CP组每天灌胃6 mL 0.5% CMC-Na,Dio和Dio+CP组每天灌胃Dio （60 mg/kg）,连续灌胃10 d。在试验第7天,CP和Dio+CP组大鼠经尾静脉注射CP （6 mg/kg）,然后每天继续灌胃Dio,CP给药72 h后处死各组大鼠,无菌分离肾脏组织,用HE染色观察肾脏病理变化;用试剂盒检测总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量;用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测肾脏肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子κB p65（NFκB p65）、环氧合酶-2（COX-2）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-10 mRNA和蛋白的表达;用免疫化学法检测肾脏受体相互作用蛋白激酶-1（RIPK1）和RIPK3蛋白的表达。【结果】 HE染色结果显示,对照组和Dio组肾脏结构正常;CP组大鼠肾小管上皮细胞发生脱落以及空泡变性,肾脏结构被破坏,Dio+CP组肾小管的损伤明显减轻。与对照组相比,CP和Dio+CP组肾脏中MDA含量极显著升高（P<0.01）,T-AOC和CAT活性均极显著降低（P<0.01）;与CP组相比,Dio+CP组肾脏中MDA含量极显著降低（P<0.01）,T-AOC和CAT活性均极显著增加（P<0.01）。实时荧光定量PCR和Western blotting结果表明,与对照组相比,CP组大鼠肾脏中TNF-α、COX-2、NFκB p65和IL-1β mRNA和蛋白的表达量均极显著升高（P<0.01）,IL-10 mRNA和蛋白的表达量均极显著降低（P<0.01）;与CP组相比,Dio+CP组TNF-α、COX-2、NFκB p65和IL-1β mRNA和蛋白的表达量均显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）,IL-10 mRNA和蛋白的表达量均极显著升高（P<0.01）。免疫组化结果表明,与对照组相比,CP组大鼠肾脏中RIPK1和RIPK3蛋白的表达量均极显著升高（P<0.01）;与CP组相比,Dio+CP组大鼠肾脏中RIPK1和RIPK3蛋白的表达量分别极显著（P<0.01）和显著（P<0.05）降低。【结论】 Dio通过抑制肾脏氧化应激、炎症反应和细胞程序性坏死缓解CP诱导的大鼠肾损伤。     

Effects of Attapulgite Nano Zinc Oxide on Antioxidant Function and Immune Function in Spleen of Weaned Pigs

The experiment was conducted to explore the effects of attapulgite nano zinc oxide (ANZ) on antioxidant and immune functions in spleen of weaned piglets.210 weaned piglets of similar weight were randomly divided into 7 groups with 6 replicates in each group and 5 piglets per repeat.The treatments were control group (CON group,basal diet),antibiotic group (ANT group,basal diet+antibiotic),zinc oxide group (ZO group,basal diet+3 000 mg/kg zinc oxide),nano-zinc oxide group (NZO group,basal diet+800 mg/kg nano-zinc oxide),low,middle and high dose attapulgite nano zinc oxide groups (LANZ group,basal diet+700 mg/kg attapulgite nano zinc oxide;MANZ group,basal diet+1 000 mg/kg attapulgite nano zinc oxide;HANZ group,basal diet+1 300 mg/kg attapulgite nano zinc oxide).The results showed that:Compared with CON group,spleen index in ZO,MANZ and HANZ groups increased significantly (P<0.05).Compared with CON and ANT groups,the area of spleen cells in NZO,LANZ,MANZ and HANZ groups increased significantly (P<0.05).Compared with other treatment groups,the size of spleen cells in MANZ group increased significantly (P<0.05).Compared with CON,ANT,NZO and HANZ groups,superoxide dismutase (SOD) activity in MANZ group increased significantly (P<0.05).Compared with ZO and NZO groups,catalase (CAT) activity in LANZ,MANZ and HANZ groups increased significantly (P<0.05).Compared with ZO group,the content of malondialdehyde (MDA) in NZO,LANZ,MANZ and HANZ groups decreased significantly (P<0.05).Compared with CON group,the content of interferon-γ (IFN-γ) in ANT,MANZ and HANZ groups decreased significantly (P<0.05).Compared with CON,ANT,ZO and NZO groups,the content of tumor necrosis factor-α (TNF-α) in MANZ and HANZ groups decreased significantly (P<0.05).Compared with ANT group,the content of interleukin-1 β (IL-1 β) in MANZ group decreased significantly (P<0.05).Compared with ANZ、ZO and NZO groups,the content of interleukin-10 (IL-10) in MANZ and HANZ groups increased significantly (P<0.05).Compared with CON,ANT and ZO groups,the content of interleukin-12 (IL-12) in LANZ and MANZ groups increased significantly (P<0.05).In conclusion,attapulgite nano zinc oxide could increase organ index and cell size of spleen,improved the antioxidant enzymes activity in spleen,decreased the content of proinflammatory factors,increased the content of anti-inflammatory factors,and enhanced the antioxidant and immune functions of weaned piglets.The optimum addition level of attapulgite nano zinc oxide was 1 000 mg/kg in this experiment.     

凹土纳米氧化锌对断奶仔猪脾脏抗氧化及免疫功能的影响

试验旨在探索凹土纳米氧化锌（attapulgite nano zinc oxide,ANZ）对于断奶仔猪脾脏抗氧化以及免疫功能的影响。选取体重相近的21日龄杜长大断奶仔猪210头,随机分成7组,每组6个重复,每个重复5头仔猪。分别饲喂基础日粮（CON组）、基础日粮+抗生素（ANT组）、基础日粮+3 000 mg/kg氧化锌（ZO组）、基础日粮+800 mg/kg纳米氧化锌（NZO组）和基础日粮+700、1 000、1 300 mg/kg凹土纳米氧化锌（LANZ、MANZ和HANZ组）。结果表明：与CON组相比,ZO、MANZ和HANZ组的脾脏指数显著提高（P<0.05）。与CON和ANT组相比,NZO、LANZ、MANZ和HANZ组的脾脏细胞面积显著增大（P<0.05）。与其他各组相比,MANZ组的脾脏细胞粒径显著增大（P<0.05）。与CON、ANT、NZO和HANZ组相比,MANZ组脾脏中超氧化物歧化酶（SOD）活性显著提高（P<0.05）。与NZO和ZO组相比,LANZ、MANZ和HANZ组的过氧化氢酶（CAT）活性均显著提高（P<0.05）。与ZO组相比,NZO、LANZ、MANZ和HANZ组的丙二醛（MDA）含量显著降低（P<0.05）。与CON组相比,ANT、MANZ和HANZ组的干扰素-γ（INF-γ）含量显著下降（P<0.05）。与CON、ANT、ZO和NZO组相比,MANZ和HANZ组的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量显著降低（P<0.05）。与ANT组相比,MANZ组的白细胞介素-1β（IL-1β）含量显著降低（P<0.05）。与ANZ、ZO和NZO组相比,MANZ和HANZ组的IL-10含量显著增加（P<0.05）。与CON、ANT和ZO组相比,LANZ和MANZ组的IL-12的含量显著降低（P<0.05）。综上,凹土纳米氧化锌可以提高断奶仔猪脾脏的器官指数及细胞粒径、提高抗氧化功能酶的活性、减少促炎因子含量、增加抗炎因子含量,进而增强断奶仔猪的免疫以及抗氧化功能。在本试验条件下,当凹土纳米氧化锌添加量为1 000 mg/kg时效果最佳。     

品种、进群和配种季节、首配日龄对后备母猪繁殖性能的影响

为探究品种、进群和配种季节、首配日龄对后备母猪繁殖性能的影响,本研究观察并记录了1 656头后备母猪的繁殖情况,分别按照品种、进群季节、配种季节、首配日龄将其分组,并进行组间统计分析。结果表明：①长白后备母猪的配种利用率（89.73%）极显著（P<0.01）高于大白后备母猪（75.00%）和长大二元杂后备母猪（80.57%）;长大二元杂后备母猪的窝均总仔数（11.36）极显著（P<0.01）高于大白后备母猪（10.35）,显著（P<0.05）高于长白后备母猪（10.74）;②春季和冬季进群的长大二元杂后备母猪配种利用率（100.00%、100.00%）极显著（P<0.01）高于夏季（71.89%）和秋季（51.47%）,同时夏季也极显著（P<0.01）高于秋季;秋季配种的长大二元杂后备母猪受胎分娩率（86.21%）分别显著（P<0.05）和极显著（P<0.01）低于春季（94.07%）和冬季（97.42%）;③长大二元杂后备母猪首配日龄在211~230 d组的窝均活仔数（9.30）显著（P<0.05）低于231~250 d（10.15）和251~270 d（10.36）组,并且极显著（P<0.01）低于271~290 d（10.48）组;211~230 d组的窝均合格仔数（8.96）显著（P<0.05）低于231~250 d（9.82）组,极显著（P<0.01）低于251~270 d（10.04）和271~290 d（10.21）组。综合试验结果,长白后备母猪的配种利用率较好,长大二元杂后备母猪的产仔性能较好。长大二元杂后备母猪在春、冬季节进群时配种利用率较好,在秋季配种时受胎分娩率较差;且其首配日龄在211~230 d时产仔性能较低,在211~290 d时产仔性能较高。     

运输对伊犁马肌肉损伤和氧化应激的影响

试验旨在研究运输对伊犁马肌肉损伤和氧化应激的影响。选取体重相近的5匹24月龄的伊犁母马,环境适应7 d后开展运输试验,其运输过程中禁食禁水,运输总路程约为400 km,运输时间为8 h。分别于运输0（T1）、4（T2）、8（T3）和卸车后12 h （T4）采集马颈静脉血,分离血清,进行相关生理生化指标的测定。结果显示,与T1相比,肌肉损伤生化标志物肌红蛋白（MYO）和肌钙蛋白（cTnT）在T2时刻显著上升（P<0.05）,T3和T4时刻极显著上升（P<0.01）;乳酸脱氢酶（LDH）在T3时刻显著上升（P<0.05）;炎症反应生化标志物C反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）在T2、T3和T4时刻极显著上升（P<0.01）;皮质醇（COR）在T2和T3时刻极显著上升（P<0.01）,在T4时刻显著上升（P<0.05）;总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）在T2、T3和T4时刻极显著下降（P<0.01）;过氧化氢酶（CAT）在T3和T4时刻显著下降（P<0.05）;活性氧（ROS）在T2和T4时刻显著上升（P<0.05）,在T3时刻极显著上升（P<0.01）;丙二醛（MDA）在T3和T4时刻极显著上升（P<0.01）。因此,运输8 h导致了伊犁马肌肉损伤和氧化应激反应的发生,其不良影响在卸车后12 h内不能消除。     

原花青素对玉米赤霉烯酮致小鼠肝脏、肾脏氧化损伤的保护作用

试验旨在研究原花青素(PC)是否对玉米赤霉烯酮(ZEA)中毒的小鼠肝脏及肾脏具有保护作用.选取40只日龄为8~9周、体重约为45 g的健康清洁级雄性昆明系小鼠,随机分为4组,对照组灌喂生理盐水,PC组灌喂100 mg/kg PC,ZEA组灌喂40 mg/kg ZEA,PC＋ZEA组灌喂100 mg/kg PC+40 mg/kg ZEA,眼球采血,颈椎处死后采取肝脏样本.测定肝脏组织中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量及血清中尿酸(UA)、尿素氮(BUN)含量.结果显示,与对照组相比,PC组各项指标差异均不显著(P>0.05),提示肝脏及肾脏没有明显的氧化损伤;与对照组相比,ZEA组的小鼠组织中谷草转氨酶、谷丙转氨酶及丙二醛含量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),超氧化物歧化酶含量极显著降低(P<0.01),血清中尿酸、尿素氮含量极显著升高(P<0.01),提示肝脏及肾脏有严重的氧化损伤;PC+ZEA组的小鼠各项指标(除超氧化物歧化酶外)均显著或极显著低于ZEA组(P<0.05;P<0.01),提示其肝脏及肾脏氧化损伤程度低于ZEA组,PC对ZEA中毒小鼠的肝脏及肾脏氧化损伤有一定的保护作用.