猪RUVBL2真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

RUVBL2(RuvB-like 2)蛋白是进化上高度保守AAA+(ATPases Associated With Diverse Cellular Activities,AAA)家族成员之一,CHO(Chinese Hamster Ovary)细胞被广泛地用于表达重组DNA蛋白。为探究猪睾丸组织的RUVBL2基因是否能够在CHO细胞中表达,本实验以猪睾丸组织的cDNA为模板,PCR扩增RUVBL2目的基因,并将其克隆至pIRES2-EGFP(Mammalian Expression Vectors pIRES2-EGFP)载体上,进一步转化到DH5α中,再进行PCR、酶切及测序鉴定;将重组质粒转染到CHO细胞中,再进行荧光、RT-PCR、Western blot检测。结果显示:PCR、酶切及测序都证实了RUVBL2基因正确地插入到了载体质粒pIRES2-EGFP的多克隆位点;荧光、RT-PCR、Western blot也证实了RUVBL2基因在CHO细胞中的成功表达。本实验成功构建了猪的pIRES2-EGFP-RUVBL2真核表达载体,并证实了猪睾丸组织中的RUVBL2基因能够在CHO细胞中表达。     

品种、进群和配种季节、首配日龄对后备母猪繁殖性能的影响

为探究品种、进群和配种季节、首配日龄对后备母猪繁殖性能的影响,本研究观察并记录了1 656头后备母猪的繁殖情况,分别按照品种、进群季节、配种季节、首配日龄将其分组,并进行组间统计分析。结果表明：①长白后备母猪的配种利用率（89.73%）极显著（P<0.01）高于大白后备母猪（75.00%）和长大二元杂后备母猪（80.57%）;长大二元杂后备母猪的窝均总仔数（11.36）极显著（P<0.01）高于大白后备母猪（10.35）,显著（P<0.05）高于长白后备母猪（10.74）;②春季和冬季进群的长大二元杂后备母猪配种利用率（100.00%、100.00%）极显著（P<0.01）高于夏季（71.89%）和秋季（51.47%）,同时夏季也极显著（P<0.01）高于秋季;秋季配种的长大二元杂后备母猪受胎分娩率（86.21%）分别显著（P<0.05）和极显著（P<0.01）低于春季（94.07%）和冬季（97.42%）;③长大二元杂后备母猪首配日龄在211~230 d组的窝均活仔数（9.30）显著（P<0.05）低于231~250 d（10.15）和251~270 d（10.36）组,并且极显著（P<0.01）低于271~290 d（10.48）组;211~230 d组的窝均合格仔数（8.96）显著（P<0.05）低于231~250 d（9.82）组,极显著（P<0.01）低于251~270 d（10.04）和271~290 d（10.21）组。综合试验结果,长白后备母猪的配种利用率较好,长大二元杂后备母猪的产仔性能较好。长大二元杂后备母猪在春、冬季节进群时配种利用率较好,在秋季配种时受胎分娩率较差;且其首配日龄在211~230 d时产仔性能较低,在211~290 d时产仔性能较高。