斜纹夜蛾核型多角体病毒少多角体遗传突变株的鉴定

【目的】研究病毒基因感染昆虫宿主的分子机制。【方法】从自然界分离和鉴定斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV）的遗传突变株,筛选到少多角体基因突变株-SpltMNPV B型株,克隆该株的少多角体基因（fp25K）。对不同株系SpltMNPV的fp25K进行序列分析、病毒感染的细胞培养和虫体感染试验。【结果】核苷酸序列分析表明,与中国株相比,A型和C型分别发生了4个和3个核苷酸改变,但编码的氨基酸不变;B型株3′端核苷酸发生了多处缺失和一处插入,导致FP25K蛋白C端21个氨基酸改变。病毒感染的细胞培养试验表明,fp25K基因突变导致多角体明显减少的表型。虫体试验表明,感染fp25K突变的SpltMNPV B型株的宿主液化减弱。【结论】SpltMNPV B型株是一株自然的少多角体遗传突变株,该突变株可用于更深入地解析少多角体表型成因、病毒感染后虫尸降解和液化作用的分子机制。     

豆天蛾核型多角体病毒泛素基因的序列分析

为了对CbNPV ubiquitin基因序列进行分析,并对目前已知全基因组序列的杆状病毒的泛素氨基酸序列进行比较。从豆天蛾幼虫尸体中分离纯化豆天蛾核型多角体病毒(CbNPV),提取基因组DNA,进行基因组测序。序列分析发现一个长度为252 bp的读码框序列与泛素基因同源性很高,该基因编码83个氨基酸。氨基酸序列同源性分析结果表明,CbNPV泛素的氨基酸序列与20种杆状病毒泛素的氨基酸序列的同源性在66.3%~82.1%,并且维持泛素功能所必需的氨基酸序列,在大部分杆状病毒中也都保守存在。     

家蚕核型多角体病毒ORF 75基因的生物信息学分析

通过对家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori,nucleopolyhedrovirus:BmNPV)ORF 75基因核苷酸序列进行生物信息学分析,BmNPVORF 75基因位于病毒基因组70 485 bp和71 264 bp之间,编码259个氨基酸残基的多肽,预测分子相对质量为30.8 kDa,等电点为7.67,分子式为C1409H2157N351O390S19;蛋白在大肠杆菌内的半衰期大于10 h;酸性氨基酸(Asp Glu)占10.5%,碱性氨基酸(Arg Lys)占10.8%;蛋白的不稳定指数为42.67,是不稳定蛋白.利用Prosite数据库扫描,查到4类9个蛋白修饰位点.通过Blast搜索氨基酸同源序列发现,BmNPVORF 75同源蛋白存在于所有测序的鳞翅目昆虫杆状病毒中,不存在于其他非鳞翅目昆虫杆状病毒中.同源序列比对结果,BmNPVORF75蛋白的氨基酸序列与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica MNPV)ORF92之间的同源性达到100%,应为相同基因.依照BmNPVORF75同源基因序列相似性,对13种昆虫杆状病毒进行进化树构建分析,其中,BmNPVORF75与薄荷灰夜蛾多粒包埋型核型多角体病毒(Rachiplusia ouMN-PV)ORF89基因进化距离很近,同源性较高.     

斜纹夜蛾核型多角体病毒多角体基因的克隆

在以５种限制性内切酶对ＳＩＮＰＶ基因组作酶解分析的基础上，以ＡｃＮＰＶ多角体基因的部分编码序列作探针，对其进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析，发现ＸｂａⅠ酶切的２．９ｋｂ片段含有全部或部分ＳＩＮＰＶ多角体基因，并将该片段克隆至ｐｕｃ１８载体上。     

柞蚕核型多角体病毒研究进展

柞蚕核型多角体病毒(Antheraea pernyi Nuclear Polyhedrosis Virus，简称ApNPV)，属杆状病毒科包含体杆状病毒亚科核型多角体病毒属，是柞蚕核型多角体病的病原。该成熟病毒包含体的断面分三层结构：最外层是致密层，次外层是多角体蛋白层，内部是病毒束。柞蚕核型多角体病毒的核酸为DNA，经限制性内切酶PstI，HindⅢ，BamH，XhoI，SalI，EcoR I和EcoR I BamH I酶解后，电泳分别形成31,25，6，15，24，5，7条谱带。柞蚕核型多角体病毒主要通过食下和体壁创伤途径感染柞蚕幼虫，不同病毒株对柞蚕的致病性存在着差异。柞蚕幼虫消化液对柞蚕核型多角体病毒有溶解、灭活作用；柞蚕幼虫中肠围食膜对柞蚕核型多角体病毒有灭活作用。柞蚕核型多角体病毒多角体在自然条件下有自然裂解现象，游离的病毒粒子在自然条件下很快失活。目前已建立柞蚕核型多角体病毒载体表达系统，并在分别在体内、体外表达了报告基因．     

什么是核型多角体病毒?

<正> 昆虫病毒分为包涵体和非包涵体病霉两大类,包涵体病毒又分为多角体病毒和颗粒病毒。在宿主细胞核内形成多角体的称为核型多角体病毒。这种病毒杆状,大小为200—400×20—50毫微米,多角体的形状和大小随宿主的种类而不同,有4面、8面或12面体,有的呈不规则形。据1975年国外报导,     

利用核多角体病毒防治棉铃虫

1974年我们用荆州地区微生物站筛选的 VHA273核多角体病毒,对棉铃虫进行了室内外防治试验和核多角体病毒的繁殖生产。现将试验结果整理如后。一、棉铃虫核多角体病毒的接种.感染,繁殖及其致病力人工感染是繁殖核多角体的必要手段,但在自然界中不能找到量大而集中的棉铃虫核多角体病毒,必需用人工繁殖饲养棉铃虫并进行感染的方法,以获得大量核角体。棉铃虫是一种杂食性害虫,可从自然界中获得大量的天然饲料。据在饲养中试验观察,     

棉铃虫核型多角体病毒试验小结

应用病毒来抑制害虫种群的发展,在国内、外都有成功的事例.去年,我们在复旦大学生物系的指导下,搞了核型多角体病毒的感染、采收、积累和防治棉铃虫的试验,取得了初步成果.一、棉铃虫核型多角体病毒的采收和积累棉铃虫核型多角体病毒,是一种专化性病毒.它只能在棉铃虫幼虫体内不断增殖面致死棉铃虫,对其它害虫及益虫没有作用.在600倍显微镜下,可以看到游离的棉铃虫核型多角体病毒的包涵体.由于它是多边形     

棉铃虫多核衣壳型多角体病毒fp25K基因的克隆及分析

[目的]克隆棉铃虫多核衣壳型多角体病毒(HearMNPV) fp25 K基因,为深入研究杆状病毒的进化机制提供依据。[方法]通过半补齐法建立HearMNPV的质粒基因组文库,对插入片段进行鉴定和序列分析获取HearMNPV fp25 K基因。[结果]HearMNPV fp25 K基因的读码框由588个核苷酸组成,编码195个氨基酸;该基因上游具有晚期调控保守序列ATAAG,是一个晚期表达基因;HearMNPV fp25 K存在5个α-螺旋,8个β-折叠;HearMNPV与蓓带夜蛾核型多角体一致性最高,达97.0%,与舞毒蛾多核衣壳型多角体的FP’同源性最低,仅为19.3%。HearMNPV与GroupⅠNPVs、GroupⅡNPVs及GVs的fp25K同源基因间氨基酸平均相似性分别为55.6%、69.4%和29.3%,推测其与Ⅱ类NPVs的亲缘关系较近。[结论]该研究为杆状病毒分子进化、生物防治奠定了基础。     

斜纹夜蛾核多角体病毒研究进展

斜纹夜蛾核多角体病毒杀虫剂是一种新型的生物农药,从分子生物学、病毒流行学、对非靶标生物的毒性、工厂化生产及田间药效等方面阐述了斜纹夜蛾核多角体病毒的研究进展.     

江黄颡鱼肌肉氨基酸组成及营养分析

采用氨基酸自动分析仪测定江黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)肌肉中的氨基酸组成,并进行相关营养分析。结果表明,江黄颡鱼肌肉中共检测到17种氨基酸,其中7种人体必需氨基酸含量为6.35%(占鲜样的比例,下同),占氨基酸总量的40.04%;4种鲜味氨基酸含量为6.43%,占氨基酸总量的40.58%;人体半必需氨基酸含量为1.37%,占氨基酸总量的8.64%;必需氨基酸中除了亮氨酸、蛋氨酸+胱氨酸、缬氨酸外,其他氨基酸的含量均高于FAO/WHO评分模式;赖氨酸含量高于鸡蛋蛋白标准模式;必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为0.67;7种人体必需氨基酸中,苏氨酸、蛋氨酸和赖氨酸占氨基酸总量的比例较其他食物高。江黄颡鱼氨基酸含量丰富、味道鲜美,具有较高的食用和营养价值。     

雪山草鸡氨基酸组成与营养价值研究

[目的]评价雪山草鸡的营养价值。[方法]以雪山草鸡为材料,对各种氨基酸的含量及组成进行分析,并评价其营养价值。[结果]雪山草鸡肌肉中氨基酸含量占蛋白质含量的95.34%,且种类齐全,8种人体必需氨基酸的含量达1.096 g/kg。鲜味氨基酸、甜味氨基酸和芳香族类氨基酸占总氨基酸的质量分数分别为24.97%、17.86%和7.07%,各种人体必需氨基酸种类齐全且比例均衡,比值系数分(SRC)为76.91。在各种人体必需氨基酸中,第一限制氨基酸为甲硫氨酸+半胱氨酸。[结论]该研究可为雪山草鸡进一步开发利用提供科学依据。     

中华倒刺鲃和光倒刺鲃肌肉营养品质的比较

对中华倒刺鲃Spinibarbus sinensis和光倒刺鲃Spinibarbus hollandi的肌肉营养成分与营养品质进行了比较。结果表明：中华倒刺鲃和光倒刺鲃肌肉（鲜样）中蛋白质和脂肪含量相对较高；这两种鱼肌肉中均含有17种氨基酸，总量分别为73．61％、68．27％（质量分数，下同，干重），其中7种人体必需氨基酸（不包括色氨酸）分别为氨基酸总量的43．83％、44．09％，必需氨基酸指数（EAAI）分别为71．34％、66．34％，其构成比例基本符合FAO／WHO的标准，4种鲜味氨基酸总量分别为24．22％、22．59％（干重），两种鱼的限制性氨基酸为蛋氨酸＋胱氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸＋酪氨酸；脂肪酸中EPA与DHA含量均较高，矿物元素比值合理。上述分析表明，中华倒刺鲃和光倒刺鲃肌肉均为优质的动物蛋白食品，但中华倒刺鲃的营养品质优于光倒刺鲃。     

新引种褐色毛木耳的营养成分分析与评价

为进一步丰富福建省毛木耳栽培品种,提高福建毛木耳生产品质,比较分析新引自台湾的褐色毛木耳与福建毛木耳主栽品种(漳耳43-28)的营养成分差异。结果表明:褐木耳的蛋白质、还原糖、维生素B1和维生素B2含量显著或极显著高于漳耳43-28,E/P值、Fe含量显著低于漳耳43-28(P0.05)。两种木耳的脂肪、灰分、膳食纤维、能量无显著性差异(P0.05);两种木耳均至少含18种氨基酸,褐木耳的单一氨基酸含量(除胱氨酸外)、必需氨基酸、非必需氨基酸、儿童必需氨基酸、氨基酸总量、甜味类氨基酸、酸味类氨基酸、苦味类氨基酸、呈味氨基酸、含硫氨基酸、支链氨基酸和芳香族氨基酸均显著高于漳耳43-28(P0.05);褐木耳的AAS、CS和SRCAA营养价值评价均高于漳耳43-28。说明漳耳43-28和褐木耳的营养特征存在明显的差异,褐木耳营养价值优于漳耳43-28。     

异源多角体蛋白包装对重组家蚕核型多角体病毒感染性的影响

 将 Ac MNPV的 polh基因克隆到缺失 polh基因的 Bm NPV(API4)基因组中 ,得到被 Ac MNPV多角体蛋白包埋并可表达慈菇蛋白酶抑制剂的重组病毒 Bm NPV(OAc- API4)。发现它的芽生型病毒能感染家蚕细胞和经皮下注射感染家蚕幼虫 ,但包埋型病毒不能经口感染家蚕幼虫。     

光棘球海胆性腺氨基酸组成的研究

于2006年5、6、8月测定了光棘球海胆Strongylocentrotus nudus雌、雄个体性腺中氨基酸含量及组成。结果表明：光棘球海胆氨基酸含量为30．75％～48．52％（质量分数,下同）,其中鲜味氨基酸含量为15．33％～21．84％,必需氨基酸含量占氨基酸总量的42．67％-52．50％,鲜味氨基酸含量占总氨基酸含量的43％以上。光棘球海胆中甘氨酸含量最高（3．76％～5．02％）,谷氨酸含量（2．99％～4．79％）次之;雌、雄个体以及排放精、卵时其氨基酸组成变化较大;过熟及迟熟的海胆无论是氨基酸总量,还是必需氨基酸、鲜味氨基酸含量都低于早期成熟海胆;雄性海胆性腺鲜味氨基酸含量高于雌性,因此雄性更美味。研究表明,生产中采集海胆最好在海胆早期成熟阶段,在海胆成熟后期自然排放之前采收完毕。     

仙湖鸭肌肉的氨基酸分析

以49日龄的仙湖鸭为对象,对其肌肉的常规生化成分及氨基酸进行分析,结果表明:仙湖鸭的必需氨基酸含量为(34.32±0.81)%,其中精氨酸含量最高,苏氨酸含量最低;非必需氨基酸含量为(25.96±0.65)%,其中谷氨酸含量最高,胱氨酸含量最低;总氨基酸含量为(60.28±1.18)%;鲜味氨基酸总含量为(20.14±1.49)%,其中谷氨酸含量最高;氨基酸评分和化学评分表明,限制性氨基酸分别为苏氨酸、缬氨酸和组氨酸,必需氨基酸指数为41.46。     

日本金线鱼肌肉营养成分分析

对日本金线鱼(Nemipterus japonicus)的含肉率和肌肉营养成分进行测定并分析。结果表明,日本金线鱼含肉率为74.96(±1.99)%,粗蛋白含量为19.48(±0.21)%,粗脂肪含量为2.66(±0.02)%,水分含量为76.37(±0.34)%,粗灰分含量为1.35(±0.02)%。肌肉蛋白中17种氨基酸占鲜样的13.71%,其中人体必需氨基酸占鲜样的6.26%,占氨基酸总量的45.66%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比例为89%,符合FAO/WHO的标准。第一、第二限制性氨基酸均为含硫氨酸(蛋氨酸+胱氨酸)和苏氨酸,必需氨基酸指数为65.30,4种鲜味氨基酸含量为5.39%,占氨基酸总量的39.31%。     

紫花苜蓿品种氨基酸含量的特征性研究

本文对西北地区的１０种紫花苜蓿品种的氨基酸进行了分析．结果表明，礼县苜蓿、临洮苜蓿、永宁苜蓿的总氨基酸和必需氨基酸含量均较高；陇东苜蓿、会宁苜蓿、酒泉苜蓿的总氨基酸和必需氨基酸含量均较低；１０种紫花苜蓿品种的总氨基酸和必需氨基酸平均含量分别为１７．７５％和８．５１％：总氨基酸含量和必需氨基酸含量存在着极显著的正相关关系。所测试的苜蓿品种氨基酸含量具有特征性。     

反相液相色谱法测定乌桕叶中氨基酸含量

以邻苯二甲醛(OPA)与9-芴基羰酰氯(FMOC-CI)作衍生剂,正缬氨酸为内标,利用二极管阵列(DAD)可变波长检测程序,采用柱前衍生RP-HPLC法测定了乌桕叶中氨基酸含量。结果表明:各种氨基酸的保留时间(Rt)、相对峰面积(Ax/AI)的RSD均较满意,回收率为93.21%~114.24%;乌桕叶中含有大量的氨基酸,总得含量在1.3000mg/mL左右,含量较高的是异亮氨酸(Ile)、谷氨酸(G lu)、天冬氨酸(Asp)、亮氨酸(Leu)和精氨酸(Arg),合计含量占总含量的60%以上。18种氨基酸中含有的人体必需氨基酸有7种,其总含量为0.5984mg/mL,占总氨基酸含量的46.03%。