鸭免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5+Re-4)后抗体消长规律的研究

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)3批,以推荐的免疫程序和剂量分组免疫母源抗体消失的雏鸭。免疫后定期采血测定抗体效价。结果为:鸭加强免疫(首次免疫后第3周)后,抗体效价迅速升高。在加强免疫后第3周(首次免疫后第6周)达到最高值9.9～11.1log2。HI抗体效价在8周以后开始下降,首免20周以后抗体水平衰减到4log2以下。     

禽流感灭活油乳剂疫苗免疫监测的研究

通过HI试验,对雏鸡的禽流感灭活疫苗免疫效果进行监测,为更科学制定鸡免疫程序奠定基础。结果表明:(1)对照组鸡AI-H5与AI-H9两种母源抗体最高,达4log2,次日逐渐下降,于第10天降至较低水平。AI-H5、AI-H9两种母源抗体分别于22、32日龄降至为2log2以下。(2)试验组鸡于第5天进行首免,于第12天时,AI-H5、AI-H9的HI抗体水平开始上升,于32天AI-H5、AI-H9两种抗体水平呈缓慢下降趋势,但于第104天仍能检测到抗体,分     

雏鸭重组禽流感（H5+H7）三价灭活苗母源抗体消长规律

为探究雏鸭重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗母源抗体消长规律,确定最佳首免日龄,将试验分为A组(种鸭免疫H5N1 Re-11+Re-12株、H7N9 H7-Re-2株、H5N2疫苗)和B组(种鸭免疫H5N2 rSD57株+rFJ56株、H7N9 rGD76株疫苗);选其孵化后的雏鸭各300羽,分别于1、7、14、21、28日龄时采血,每组随机采集100份样品,通过血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验进行禽流感母源抗体检测。结果显示:两组各亚型母源抗体在1日龄时平均滴度均达最高水平( 7.27log2),且离散程度低( 0.22)。两组雏鸭的禽流感母源抗体阳性率均随日龄增长而逐渐下降,7日龄时,平均滴度在4.26log2以上,群体抗体阳性率在76%以上,其中B组阳性率略高于A组;14日龄时,平均滴度都下降到2.55log2以下,群体抗体阳性率下降到25%以下;21日龄时,平均滴度均在0.43log2以下,群体抗体阳性率下降至1%以下。结果表明,高抗体水平种鸭能够使后代雏鸭具有较高水平的禽流感母源抗体,但母源抗体保护时间较短,重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗的最佳首免时间为7～14日龄。本研究为鸭禽流感疫苗免疫策略制定提供了参考。     

商品肉鸭禽流感母源抗体消长规律及最佳首免日龄的确立

通过血凝抑制(HI)试验,对商品肉雏鸭不同时间首次接种禽流感油乳剂灭活疫苗后的免疫效果进行监测,以确立最佳首免日龄,并对AI母源抗体进行动态观察,为更科学制定鸭免疫程序奠定基础。监测结果表明,商品肉鸭禽流感(H5)母源抗体由1日龄的9.0log2下降到7～9日龄的临界点(4log2)以下,19日龄母源抗体为0.7log2,H5AI的HI抗体半衰期约为2.3天;结合免疫效果分析,8日龄为商品肉鸭禽流感的最佳首免日龄。     

商品肉鸭禽流感母源抗体消长规律研究及最佳首免日龄的确立

通过血凝抑制(HI)试验,对商品肉雏鸭不同时间首次接种禽流感油乳剂灭活疫苗后的免疫效果进行监测,以确立最佳首免日龄,并对AI母源抗体进行动态观察,为更科学制定鸭免疫程序奠定基础。结果表明,商品肉鸭禽流感(H5)母源抗体由1日龄的9.0log2下降到7～9日龄的临界点(4log2)以下,19日龄母源抗体为0.7log2,H5AI的HI抗体半衰期约为2.3天。经免疫效果分析表明,8日龄为商品肉鸭禽流感的最佳首免日龄。     

禽流感灭活疫苗H5N2 D7株与H5N1 Re-6株对鸭的免疫效果研究

为评价禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)和重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)对鸭的免疫效果,根据兽医流行病学中利用比较率判断疫苗应用效果的样本量计算方法,得出所需的最小样本量;以田间试验的方式,常规养殖白鸭300只、番鸭240只,并对其进行随机分组;按程序免疫,从10日龄首免后2周开始,每周采集血清测定抗体效价,直至出栏(白鸭45日龄、番鸭66日龄)。结果显示,10日龄白鸭和番鸭的母源抗体分别为3.02 log2和0 log2,需进一步开展研究,以确定最佳首免时间。首免后2周,无论是白鸭还是番鸭,H5N2 D7株疫苗组抗体HI效价和抗体合格率均高于H5N1 Re-6株疫苗组;首免后3~5周,两种疫苗对白鸭和番鸭的HI效价均4 log2,抗体合格率均≥70%。二免后1周至出栏,两种疫苗对白鸭和番鸭均产生较好的免疫效果,HI效价均7 log2,抗体合格率均80%。是否采用对应亚型的血凝抑制抗原对抗体的检测结果有较大影响。研究表明:免疫两种疫苗后均能产生较好的免疫抗体,但相对而言,H5N2 D7株疫苗较H5N1Re-6株疫苗更适合于鸭的免疫;在鸭等水禽中推广使用该疫苗将能更有效地防控高致病性禽流感。     

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)免疫鸡抗体消长规律及免疫程序的初步研究

研究新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对种鸡和肉鸡的免疫原性,并对雏鸡母源抗体和免疫后的抗体进行动态观察,根据试验结果推荐该疫苗对鸡的免疫程序。用HI方法检测种鸡、肉鸡的母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄。结果表明种鸡的母源抗体约能维持10 d多;0.3 mL/羽首免后10 d HI抗体就可达到6.40 log2,3-5周达到高峰期,至免疫17周后(19周龄)HI抗体水平仍然维持在4.88 log2;19周龄时0.5 mL/羽进行二免,有效抗体能维持约20周;280日龄0.5 mL/羽三免后抗体水平均一,下降缓慢,至种鸡淘汰时(三免后29周)抗体水平仍能维持在5.32 log2。肉鸡母源抗体约能维持7d,10日龄时0.3 mL/羽免疫,有效抗体能维持到上市。新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对鸡的免疫原性确实。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗免疫效果评估

2017年7月,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为评价重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对家禽的安全性及免疫效果,2017年10—12月以田间试验方式,常规养殖肉鸡(江村黄鸡)、樱桃谷白鸭、黑棕鹅各120只。按程序免疫:肉鸡9日龄首免(剂量0.3 mL),30日龄二免(剂量0.5 mL);樱桃谷白鸭15日龄首免(剂量1 mL);黑棕鹅15日龄首免(剂量1 mL)、50日龄二免(剂量1.5 mL)。定期采集血清测定抗体效价直至出栏,并每日观察禽群临床表现。试验结果显示:鸡首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为4.2 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为7.5 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于8 log2,抗体合格率均大于70%。鸭首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为5.1 log2,抗体合格率均大于70%,H7亚型HI抗体效价为5.6 log2,抗体合格率均大于70%,出栏前(47日龄)H5和H7亚型HI抗体效价均大于6 log2,抗体合格率均大于70%。鹅首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为3.9 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为5.2 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于7 log2,抗体合格率均大于70%。通过临床观察,未发现该疫苗有严重免疫副反应。试验结果表明,该二价灭活疫苗安全有效,但对于生长周期超过70 d天的家禽,应免疫两次。     

免疫程序与母源抗体对H5禽流感疫苗免疫鸭和鹅HI抗体水平的影响

对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅，用H5亚型禽流感疫苗免疫后，其HI抗体消长情况进行了比较和观察，结果，初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗（H5亚型）产生良好的免疫应答；雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退；母源抗体对H5禽流感疫苗免疫后的HI抗体水平存在一定的干扰作用；加强免疫鸭和鹅所产生的H5 HI抗体水平及其维持时间与仅免疫一次的鸭和鹅所产生的抗体水平之间存在显著差异；鸭和鹅免疫H5禽流感疫苗后第25～30d H5 HI抗体水平达到高峰。     

禽流感疫苗对禽类免疫效果的检测与分析

禽流感大流行时，在非疫区对禽类用H5亚型和H5、H9二价禽流感油乳苗进行免疫接种试验，并对其结果进行比较和分析。得出不同日龄的蛋鸡免疫接种20d后其HI抗体效价不同，不同的饲养方式、不同种类的家禽及不同种类疫苗的免疫效果均不同。85日龄蛋鸡产生的HI抗体效价达到7log2，鸡、鸭、鹅混养HI抗体效价低于平养和笼养，H5亚型禽流感疫苗免疫鸡和鸽其HI抗体效价达到了5log2以上，而对鹌鹑和鸭为1log2和3．2log2；单价禽流感疫苗和二价苗对鸡群免疫的效果不同，二价苗的免疫效果不如单价苗。     

禽流感疫苗对禽类免疫效果的分析与评估

目的 分析与评估禽流感疫苗对禽类的免疫效果.方法 采用疫苗接种、抗体试验和分组试验法,在非疫区对禽类用H5亚型和H5、H9二价禽流感油乳苗进行免疫接种试验,并对结果分析比较.结果 不同日龄蛋鸡免疫接种20天后HI抗体效价不同、饲养方式不同、家禽种类不同疫苗效果不同.85日龄蛋鸡产生的HI抗体效价达到7log2,鸡、鸭、鹅混养HI抗体效价低于平养和笼养,H5亚型禽流感疫苗免疫鸡和鸽其HI抗体效价达到了5log2以上,而对鹌鹑和鸭为1log2和3.2log2.结论 单价禽流感疫苗和二价疫苗对鸡群免疫的效果不同,2价疫苗的免疫效果较单价疫苗差.     

四种雉鸡新城疫疫苗免疫抗体消长规律的研究

用新城疫活疫苗(La Sota株)和新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗免疫动物园圈养的孔雀、七彩山鸡、原鸡和白冠长尾雉4种雉鸡,于免疫前及免疫后14、21、35、90、150、210、280d分别采血检测血清中新城疫血凝抑制(HI)抗体。结果表明,孔雀免疫接种新城疫疫苗后14d就能产生较高效价HI抗体,35d抗体效价达高峰;七彩山鸡、原鸡、白冠长尾雉免疫接种新城疫疫苗后14d也能产生较高效价抗体,21d抗体水平达高峰,至免疫接种后90d抗体效价逐渐降低。整个试验过程中,孔雀产生的HI抗体效价最高,并且整齐度好,维持时间最长,至免疫接种后280d抗体效价仍能维持在7.5log2;白冠长尾雉产生HI抗体效价次之,到免疫接种后280d仍维持在6.67log2;七彩山鸡和原鸡抗体下降较快,到免疫接种后280d分别下降到5.67log和4.71log2。     

融水香鸭禽流感母源抗体的消长变化研究

为确定融水香鸭禽流感疫苗的首免日龄,本试验对融水香鸭雏鸭进行母源抗体的检测,对其母源抗体的消长变化进行研究。结果显示,融水香鸭雏鸭母源抗体水平较高,抗体持续期较长,在1日龄即达最高值,随着日龄的增加而下降,至13日龄时效价降低到3.9 log2,其母源抗体达标率为70%,至17日龄时仍维持在3.9 log2,抗体保护合格率下降到了60%,至21日龄时降低到3.5log2,抗体合格率下降到了40%。根据融水香鸭禽流感母源抗体的消长规律,建议雏鸭的首免接种时间为13~17日龄,最佳的首免日龄为13日龄。     

禽流感灭活疫苗（H5N2亚型，D7株）与同类产品对鸭和鸡免疫后血清学比较试验

为评价禽流感灭活疫苗（H5N2亚型,D7株）与同类产品对不同日龄鸭及SPF鸡的免疫效果,将该疫苗与国内两家禽流感生产企业的2批重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）分别免疫鸭和SPF鸡,免疫后14、21、28、42 d采血测定各免疫组的HI抗体效价。禽流感灭活疫苗（D7株）以0.25 mL剂量免疫鸭后14 d,所有免疫组鸭的HI抗体几何平均滴度（GMT）即能达到6㏒2以上,28 d HI抗体GMT达到峰值9.1㏒2,而两批重组禽流感灭活疫苗以0.5 mL剂量免疫鸭21 d后HI抗体GMT均没有达到6㏒2;两种疫苗分别免疫21日龄SPF鸡21 d后各免疫组的HI抗体GMT基本相似。试验结果表明,禽流感灭活疫苗（D7株）对鸭的免疫效果要明显优于重组禽流感灭活疫苗(Re-5株),而对鸡的免疫效果相似。     

白鸭禽流感H5亚型疫苗免疫促进剂的筛选

选用禽源干扰素、黄芪多糖、人参皂苷、禽用抗菌肽、蜂灵散和植物血细胞凝集素分别按常用剂量单一及两两组合在接种疫苗前后3d连续喂服3次,对14d首免(0.3mL/只)、21d二免(0.6mL/只)禽流感H5亚型疫苗的白鸭进行免疫促进试验。结果显示,各免疫组雏鸭H5AI HI抗体于第6周龄达到峰值,单独作用组分别为8.0log2、7.3log2、7.73log2、9.0log2、9.18log2、9.0log2,免疫对照组为7.75log2。两两组合作用组抗体在6～7周龄达到峰值的7.3log2～9.6log2,其中干扰素+蜂灵散组、干扰素+黄芪多糖组、人参皂苷+抗菌肽组抗体峰值比单用组高1log2～2log2,高于免疫对照组峰值近2个滴度(9.64∶7.75)。试验结果表明,单一促免试验,以蜂灵散、抗菌肽、血凝素三种免疫促进效果最好,高于免疫对照组1个滴度以上。组合免促,以干扰素+蜂灵散效果最好,植物血凝素、蜂灵散单一免促组与之相近。试验初步筛选出了效果较为明显的雏鸭禽流感疫苗免疫促进剂,为以后的进一步研究及应用奠定了基础。     

H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫鸵鸟后抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨鸵鸟对H5亚型禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好鸵鸟禽流感的防控工作,采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型禽流感疫苗,不同剂量免疫鸵鸟,用HI方法检测母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄.结果表明,雏鸵鸟母源抗体能维持约3周～8周;8周龄时分组首免,C1组产生的免疫反应优于C2组,抗体峰值能达到7.50 log2,维持时间为9周左右;17周龄时C1组以3.0 mL/羽进行二免,2周后抗体达到7.40log2,3周～7周抗体维持在高峰值,最高达8.80log2,以后逐渐下降,有效抗体水平能维持至接种后25周左右.二免后25周进行三免,以5 mL/羽三免后2周抗体可达到9.80log2,2周～4周抗体维持在最高峰,以后缓慢下降,期间抗体时有起伏,但有效抗体水平约可维持1年时间.三免后45周内抗体水平合格率均在70%以上.根据抗体消长规律,初步推荐了鸵鸟的免疫程序.     

鸽禽流感与新城疫疫苗免疫母鸽抗体消长规律及其相互关系的探讨

为了探讨免疫产鸽对AI和PA/PMV-I疫苗的免疫反应,比较AI疫苗和PA/PMV-I疫苗单独免疫及联合免疫的效果,以AI-H5和AI-H9两种亚型的灭活疫苗和PA/PMV-I灭活疫苗单独及两两联合和三种疫苗联合分别免疫青年产鸽,定期检测其血清抗体。结果表明,应用AI-H5、AI-H9、PA/PMV-I疫苗单独或两两疫苗联合或三种疫苗联合免疫产鸽后,7天产生抗体,21!45天抗体较高,分别为(6.5!7.7)log2、(8.6!9.1)log2、(10.3!10.9)log2;加强免疫后7天抗体滴度均有不同程度的下降,下降值为(0.9!1.9)log2,14天后抗体滴度迅速回升,可激发机体产生更高抗体滴度;三免后150天抗体滴度仍可维持高水平,分别在7.1log2、7.3log2、7.5log2以上。应用AI-H5、AI-H9和PA/PMV-I疫苗两两联合及三种联合免疫组与单独免疫组比较,及三种联合与两两联合免疫组比较,其产生的相应血清HI抗体平均滴度,从总体上看差异不显著,说明三种抗原成分免疫后无明显干扰。生产中可采用联合免疫或制成联苗使用。     

禽流感灭活疫苗(H5N2,N28株)和重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫鸡和鸭后抗体消长规律的比较研究

禽流感灭活疫苗（H5N2，N28株）和重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re-1株）各3批，以重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re．1株）推荐的免疫程序和剂量分组免疫5周龄SPF鸡和5周龄非免疫鸭。免疫后定期采集血样，测定血清HI抗体效价，分别计算各免疫组鸡和鸭HI抗体效价的几何平均数，绘制各批疫苗免疫鸡和鸭后HI效价消长曲线，并分别对两种疫苗免疫鸡和鸭后各时期的HI抗体效价进行t检验。结果为：①免疫后1周，各免疫组均未测到HI抗体；②鸡免疫后4～5周，HI抗体效价达到峰值1：2^6.0～1：2^7.0，随后2周下降相对较快，平均每周下降0．3—0．7个滴度，之后HI抗体效价缓慢下降，直到试验结束，平均每周下降0．04～0．17个滴度；③鸭首次免疫后第3周各免疫组HI抗体效价达到1：2^4.0～1：2^5.3，加强免疫（首次免疫后第3周）后，HI抗体效价迅速升高。加强免疫后第3周（首次免疫后第6周）HI抗体效价达到最高值1：2^10.6-1：2^11.7，且在峰值水平维持3周，之后1周下降相对较快，平均下降1．2～2．7个滴度，然后缓慢下降，到首免后24周平均每周下降0．28～0．39个滴度，24周除049H5N2批疫苗免疫组外，其他各批免疫鸡HI抗体效价均小于1：2^4.0；④免疫后3周内，两种疫苗刺激鸡产生的HI抗体效价均高于相应批次疫苗免疫鸭产生的HI抗体效价，免疫后第2周相差1．9—2．3个滴度，免疫后第3周相差1．6～2．0个滴度；⑤两种疫苗免疫鸡和鸭后，各时期HI抗体效价t检验差异均不显著（P〉0．05）。以上结果表明，两种疫苗免疫SPF鸡和非免疫鸭后，HI抗体效价消长规律一致，两种疫苗免疫后各个时期的HI抗体效价在统计学上差异均不显著（P〉0．05）。     

H9亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护研究

为评价H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护效果,将禽流感病毒HF株灭活疫苗和商品化鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗分别以0.3 mL/只接种21日龄SPF鸡,3周后采血测定HI抗体效价,并用2018年-2019年分离的4株H9亚型禽流感病毒分别进行攻毒。结果显示,免疫后21 d, HF株灭活疫苗免疫组HI抗体效价达到9.1 log2以上,商品化疫苗HI抗体效价几何平均值则为6.3 log2以内。4株H9亚型禽流感病毒流行毒株以10~(7.0)EID_(50)的剂量静脉攻毒后,HF株灭活疫苗免疫组可抵抗流行毒株的攻击,保护率为100%;而商品化疫苗对流行毒株的攻毒保护率仅为40%～60%。说明H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗具有较强的免疫原性,能使免疫鸡抵抗流行毒株的攻击。     

首免日龄、免疫间隔与疫苗组合对幼鸽新城疫血凝抑制抗体效价的影响

为了研究免疫方法对幼鸽新城疫血凝抑制(NDHI)抗体效价的影响,试验应用鸡新城疫活疫苗和鸡新城疫灭活疫苗对幼鸽首免日龄、免疫间隔和疫苗组合进行了研究。选择14,21,28日龄白羽王鸽健康幼鸽各32只随机分为试验Ⅰ～Ⅲ组,分别检测母源抗体效价后用鸡新城疫灭活疫苗进行首次免疫,间隔14 d后再次用鸡新城疫灭活疫苗进行第2次免疫,在首免后14天和二免后14天分别检测NDHI效价。选择21日龄白羽王鸽健康幼鸽192只分为试验1,2组,试验1组再均分为A_1组、B_1组、C_1组,试验2组再均分为A_2组、B_2组、C_2组,检测母源抗体效价后进行首次免疫。A_1组、B_1组、C_1组分别接种鸡新城疫活疫苗、鸡新城疫活疫苗+鸡新城疫灭活疫苗、鸡新城疫灭活疫苗,间隔7 d后用鸡新城疫灭活疫苗进行第2次免疫;A_2组、B_2组、C_2组分别接种鸡新城疫活疫苗、鸡新城疫活疫苗+鸡新城疫灭活疫苗、鸡新城疫灭活疫苗,间隔14 d后用鸡新城疫灭活疫苗进行第2次免疫。试验1,2组的各小组幼鸽在35日龄和49日龄时分别检测NDHI效价。结果表明:在首免日龄试验中,试验Ⅱ组、Ⅲ组幼鸽二免后14天NDHI抗体效价极显著高于试验Ⅰ组(P0.01)。在免疫间隔和疫苗组合试验中,试验1组、2组幼鸽49日龄NDHI抗体效价平均值为3.57 lb和7.25 lb,其中A_1组、B_1组、C_1组幼鸽49日龄抗体效价分别为4.88,2.92,2.92 lb,A_2组、B_2组、C_2组幼鸽49日龄抗体效价为4.50,8.53,8.72 lb。说明21日龄幼鸽首免鸡新城疫灭活疫苗、间隔14 d二免再次接种鸡新城疫灭活疫苗,可使49日龄幼鸽NDHI抗体效价达到8.72 lb。