以直肠黏膜粪便检菌法诊断奶牛副结核病

为寻求检出率高、快速、准确、适于现地应用的奶牛副结核病的诊断方法 ,我们查阅了国内近期对奶牛副结核病现用诊断方法的评述资料。一般认为 :临诊症状不能确诊 ,变态反应类属反应率高 ,补体结合反应对发病牛检出率低 ,酶联免疫吸附试验一时难以普及到现地。故公认 :粪便检菌法是最准确的方法。陕西畜牧兽医研究所曾报道 ,以粪便检菌法对 336头患牛进行检查 ,一次检出率达 32 .70 % ,并认为是检出排菌牛快速、有效的方法。我们用掏净患畜直肠蓄粪 ,剖取少许深部直肠黏膜粪便 ,涂片 ,以萋─纳氏抗酸染色法染色、镜检的直肠黏膜粪便检菌法 (…     

牛副结核ELISA诊断方法研究

本文建立了牛副结核病ELISA诊断方法。采用亲和层析抗原。被检血清以高压粉碎草分枝杆菌吸收原进行吸收。该方法的敏感性76％,特异性97％,通过对2483头奶牛进行检测,检出率为6.1％,并与常规的补反和变态反应进行了比较。作者认为:牛副结核ELISA可以替代补反,做为检测牛副结核的一种有力手段。     

DNA探针、粪检菌和ELISA三种方法在诊断副结核病中的比较研究

本研究在已构建的副结核分枝杆菌Ｃ２株ＤＮＡ基因文库的基础上，应用正、反向杂交试验从基因文库中筛选出特异性片段ＰＴＰ３１，以光敏生物素标记制成ＤＮＡ探针。用此ＤＮＡ探针以及粪检菌和ＥＬＩＳＡ三种方法分别对３２份副结核菌素（ＰＰＤ）变态反应阳性牛粪便及相应血清样品进行检测，其检出率分别为４７％（１５／３２）、５６％（１８／３２）和３４％（１１／３２）。对随机采集的２７６份牛粪便及血清样品，３种方法的检出率分别为１０％（２７／２７６）、１３％（３６／２７６）和７％（７９／２７６）。本研究结果表明，ＤＮＡ探针与粪检菌呈现正相关性，ＤＮＡ探针比ＥＬＩＳＡ方法能够检出更多的阳性数。     

四种方法检测广西奶水牛结核病的比较

应用牛结核菌素对奶水牛进行牛结核病皮内变态反应的检测,然后对皮内变态反应阳性牛采样进行分离培养、γ-干扰素ELISA和聚合酶链反应检测,比较这四种检测方法的符合率。结果共对1850头奶水牛进行皮内变态反应检测,皮内变态反应阳性的奶水牛有78头,从78头反应阳性的奶水牛中分离鉴定为牛分枝杆菌的有2份,γ-干扰素ELISA方法检测为牛分枝杆菌阳性的有5份,PCR方法鉴定阳性的有4份;阳性检出率以变态反应为最高78/1850(4.21%),γ-干扰素ELISA方法为5/78(0.27%),PCR检测方法为4/78(0.21%),而分离培养为最低2/78(0.105%)。变态反应与分离鉴定的符合率最低,为0.105%;γ-干扰素ELISA方法、PCR方法与分离鉴定的符合率较接近,分别为40%和50%。γ-干扰素ELISA检测方法和PCR检测方法具有较好的特异性,可以作为变态反应检测的补充。     

DNA探针,粪检菌和ELISA三种方法在诊断副结核病中的比较研究

本研究已在构建的副结核分枝杆菌Ｃ２株ＤＮＡ基因文库的基础上升应用正，反向杂交试验从基因文库中筛出选出特异性片段ＰＴＰ３１，以光敏生物素标记制成ＤＮＡ探针。用此ＤＮＡ探针以及粪检菌和ＥＬＩＳＡ三种方法分别对３２份副结核菌素（ＰＰＤ）变态反应阳性牛粪便及相应血清样品进行检测，其检出率分别为４７％（１５／３２），５６％（１８／３２）和３４％（１１／３２），对随机采集的２７６份牛粪便及血清样品，３种方法的     

两种方法检测奶牛结核的比较

采用变态反应与ELISA同时对奶牛结核病进行检测．并以剖检进行验证。结果表明：变态反应和ELISA对奶牛结核的检出率分别为2．0％和0．33%,变态反应阳性并不能全包括ELISA阳性。变态反应与剖检的符合率为3．14％；而ELISA与剖检的符合率为75%.ELISA检测具有较好的特异性。     

应用ELISA检测牛副结核病抗体

牛副结核病是牛的一种慢性传染病,目前主要依靠临床、检菌、变态反应和补体结合反应进行诊断,这些方法均有费时、费力和检出率不高等弊病,因此,需寻求一种比较敏感和特异的诊断方法。本试验以ELISA测定牛副结核病抗体,获得初步效果,现报告如下。     

皮试法与ELISA法在奶牛结核病检测中的对比试验

通过单纯颈部皮内变态反应(SICT)、比较变态反应(SICCT)检测方法、γ-干扰素ELISA和ELISA 4种方法,同时检测上海2个奶牛场的222头奶牛。结果发现:阳性检出率以颈部皮内变态反应为最高(67.6%)、ELISA(44.1%)和γ-干扰素ELISA居中(31.1%),比较变态反应最低(13.1%);单纯的颈部皮内变态反应与2种ELISA的符合率较差,而比较变态反应与2种ELISA具有较好的符合率;在变态反应阴性牛中,仍然检出了部分ELISA阳性牛。由此认为,先以变态反应检疫牛群,再随之实施抗体检测,会更有利于结核病牛场的净化与防制。     

Dot-ELISA检测牛副结核病抗体的研究

本文利用提纯的副结核分枝杆菌胞浆特异性抗原,建立了检测牛副结核抗体的Dot-ELISA方法。用该方法对粪便培养阳杜的32头份牛副结核病血清检测,检出27头,阳性检出率为84.4％,其敏感性与ELISA相似。与10头OT变态反应阳性牛血清检测,无交叉反应。M.phlci.M.fortuitum.M.kansasii人工高免血清经两次用M.phlci悬液吸收,用建立的Dot-ELISA方法也无交叉反应。表明设立的Dot-ELISA具良好的敏感性特异性。     

3种方法检测结核污染牛场的比较

应用牛结核变态反应、牛结核斑点免疫金银染色法(Dot—IGSS)和ELISA3种方法，同时检测结核污染牛场的498头份牛血清。结果发现，阳性检出率以变态反应为最高(28．3％)。Dot—IGSS居中(27．3％)，ELISA最低(17．2％)；变态反应与Dot—IGSS和ELISA的符合率较差，而ELISA和Dot—IGSS具有较好的符合率；在变态反应阴性牛中，仍然检出了部分Dot—IGSS和ELIsA阳性牛。由此认为，先以变态反应检疫牛群，再随之实施抗体检测，会更有利于结核污染牛场的净化与防制。     

两种方法检测云南奶水牛结核病的应用研究

将PPD皮内变态反应法和抗γ-干扰素ELISA法相结合,对云南奶水牛进行牛结核病检测。应用PPD皮内变态反应法检测304头奶水牛,检出32头阳性、25头疑似反应牛,检出阳性和可疑比例高达18．75％,阳性和可疑牛只的分布并无地域和场的趋向性。对PPD皮内变态反应法检出的阳性和疑似反应牛经采集抗凝全血样品54份,应用抗γ-干扰素ELISA法复检,未检检出阳性牛只。结合对受抗γ-干扰素ELISA法检测牛的临床观察,初步认为PPD皮内变态反应法检出阳性和可疑牛系非特异性反应所致。     

四川省部分地区牛结核病感染情况调查

为了解四川不同地貌、不同海拔地区牛结核病的感染情况,本研究应用PPD皮内变态反应、体外检测IFN-γ法分别对四川省5个地区15个牛场的413头牛进行牛结核病检测。结果发现：两种方法中,PPD皮内变态反应有较高的检出率,其阳性检出率为3.87%,体外检测IFN-γ法的阳性检出率为2.91%,两者的阳性符合率为78.57%;大型规模养殖场的阳性检出率略高于小型养殖场;奶牛的阳性检出率与牦牛相近,略高于肉牛。     

重庆三峡库区肉牛结核病布鲁菌病的调查

采用牛提纯结核菌素皮内变态反应结合γ-干扰素试验、虎红平板凝集试验、试管凝结试验及ELISA法分别对重庆三峡库区肉牛结核病、布鲁菌病进行了抽样检测。结果显示,该区域肉牛结核病阳性检出率为1.2%,布鲁菌病阳性检出率为1.04%。其中,库区东北部区县肉牛结核病、布鲁菌病的阳性检出率均为最高,分别为1.83%、1.14%;3种肉牛养殖规模条件下,个体散养农户牛群结核病、布鲁菌病的阳性检出率均为最高,分别为2.21%、2.94%;所调查的3个年龄段牛群中,19月龄以上牛群结核病、布鲁菌病的阳性检出率最高,分别为2.91%、4.85%。     

用分离法检测牛粪便中副结核分枝杆菌及其与高倍显微镜检查染色涂片的比较

作者比较了用分离法检测牛粪便中的副结核分枝杆菌和用镜检Ziehl-Ne-elsen染色粪便涂片中抗酸性副结核分枝杆菌菌块。粪便采自自然或人工感染副结核分枝杆菌的牛,以及未感染牛。结果表明,镜检粪便染色涂片法不是检测副结核分枝杆菌的可靠方法。因为在177份培养分离阳性粪便标本中,镜检涂片只检出99份(55.9%)为阳性。此外,在18份非副结核病牛粪标本涂片中有3份为阳性,37份培养分离为阴性的副结核病牛粪标本涂片中有18份为阳性。抗酸性菌块不能与副结核分枝杆菌区分。将副结核分枝杆菌加到未感染牛粪中时,需在每克粪便中加入15个以上的副结核分枝杆菌,分离即为阳性。     

皮试法与γ-干扰素ELISA法在奶牛结核病检疫中的对比试验

为制定奶牛结核病净化方案提供参考,通过颈部皮内变态反应(SICT)检测上海某奶牛场的483头奶牛,然后用γ-干扰素ELISA方法检测皮试法阳性牛及与阳性牛密切接触牛共50头。结果发现:颈部皮内变态反应与γ-干扰素ELISA的阳性符合率100%;在变态反应阴性牛中,仍然检出了部分ELISA阳性牛。我们考虑在高风险牛场增加皮内变态反应试验频率,再随之实施抗体检测,会更有利于结核牛场的净化与防制。     

规模化牛场奶牛衣原体和布鲁菌病相关抗体的检测分析

为检测并分析银川地区规模化牛场牛衣原体和布鲁菌病的相关抗体,采用鹦鹉热衣原体McAb-ELISA方法和布鲁菌虎红平板凝集试验(RBPT)方法进行特异性检测,应用McAb-ELISA方法与传统的IHA试验方法分别对同样50份待检牛血清进行衣原体抗体的比较检测。结果表明,银川地区的16个牛场1 161份牛血清衣原体总的阳性率为9.22%。布鲁菌的血清阳性率为13.26%。对50份牛血清采用2种试验方法同时进行衣原体抗体检测,ELISA阳性检出率为32%,IHA为24%。McAb-ELISA比IHA的特异性强。     

民和县“出户入园”奶牛“两病”检测研究

本文采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和结核菌素皮内变态反应、牛结核r-干扰素ELISA试验分别对奶牛布病和结核病进行了检测,结果为:奶牛布病阳性率为3.26%;奶牛结核病阳性率为0.72%;结核菌素变态反应与牛结核r-干扰素ELISA试验阳性符合率为100%。     

内蒙古羊副结核病检测方法的比较研究

对选自内蒙古4个旗(县)的213只羊采用通过琼脂扩散试验(AGID)、皮内变态反应(DTH)、补体结合反应(CF)和酶联免疫吸附试验(ELISA)4种检测方法进行3次羊副结核病检测,以比较4种检测方法的检出率。结果表明,琼脂扩散试验、皮内变态反应、补体结合反应和酶联免疫吸附试验的检出率分别为3.8%、4.7%、5.2%和11.3%。其中以酶联免疫吸附试验的检出率最高,并且该方法简便、灵敏,具有实际应用和推广价值,对内蒙古地区羊副结核病检测方法的选择有一定的指导意义。     

间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。     

河北省奶牛牛病毒性腹泻-黏膜病流行病学调查

从河北省部分奶牛场采集直肠粪便样品1030份,用改进的双抗体夹心ELISA试验法检测牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(Bovine viral diarrhea-Mucosald isease virus,BVD-MDV)抗原。结果:不同年龄的奶牛均可感染BVD-MDV,抗原最低阳性检出率为10.0%,最高阳性检出率为81.4%,平均检出率为40.9%。证实本省奶牛群中存在有BVD-MDV感染。