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1.
Peste des petits ruminants virus (PPRV) and goat pox virus (GTPV) are the causative agents of two kinds of goats’ diseases-peste des petits ruminants and goat pox which can cause disaster economic losses. In order to detect the two viruses simultaneously and quickly, two sets of primers and relative probes were designed based on the nucleoprotein (N) gene of PPRV and the inverted terminal repeat (ITR) segment of GTPV, respectively. In order to work together in the same reaction, the probes were labeled with different fluorescent materials 5′FAM-TAMRA3′and 5′JOE-Eclipse3′,respectively. Results showed that the duplex Real-time RT-PCR assay was identified to be specific for PPRV and GTPV only and specific fluorescent signal could be detected, but the related viruses including fowl pox virus(FPV)and canine distemper virus (CDV) had no specific fluorescent signal. Positive recombinant plasmids (PPRV pMD18-T-N and GTPV pMD18-T-ITR) were built and used for positive quantitative templates to establish duplex standard curves. The developed assay based on the probe N-ITR was found to be highly specific and sensitive with a detection limit of 102 copies/μL cDNA and 103 copies/μL DNA for PPRV and GTPV, respectively. Finally, the duplex Real-time RT-PCR assay for simultaneous detection of PPRV and GTPV was established preliminarily in the study.  相似文献   
2.
构建了小反刍兽疫病毒(PPRV)辅助质粒和微型复制子(minireplicon)并进行功能学研究。RT-PCR克隆PPRV疫苗株N75/1N、P和L基因,亚克隆至有T7启动子的原核表达载体pGEM3Z构建完成3个辅助质粒,分别命名为pGEM3Z-N、pGEM3Z-P和pGEM3Z-L,并通过全基因合成构建含PPRV病毒5′端启动子序列(AGP)、3′端启动子序列(GP)、T7转录终止信号、丁型肝炎病毒核酶序列HamRZ及氯霉素乙酰转移酶(CAT),获得PPRV微型复制子重组质粒pGEM3Z-CAT。构建完成的微型复制子及辅助质粒在表达T7RNA多聚酶(T7RNP)感染痘病毒VTF7-3后,通过脂质体法优化4种质粒配比,并将其转染至Vero细胞,通过间接免疫荧光分析CAT的表达情况,荧光显微镜观察到荧光的表达,并通过免疫印迹分析CAT蛋白的表达,表明构建的PPRV微型复制子具有转录和复制功能,这将有助于进一步开展以PPRV反向遗传操作为基础的免疫学及蛋白功能研究。  相似文献   
3.
为了解乳畜与高危职业人群布氏杆菌病感染现状,探索人间和畜间布氏杆菌病综合防治措施,应用国家标准试管凝集法,对云南省某县126份奶牛、奶山羊饲养人员、村人医、兽医和屠户等高危职业人员血清样品进行检测,对85份混合牛奶、羊奶样品进行ELISA方法检测.结果表明:人血清布氏杆菌病血清学阳性率3.97%,混合奶样品布氏杆菌病血清学阳性率7.06%,通过布氏杆菌病发生的相关因素分析,提出布氏杆菌病综合防治措施.  相似文献   
4.
寄生虫感染奶牛,消耗饲料营养,降低奶牛生产性能,还有可能引起人兽共患寄生虫病。用药不当,导致耐药性产生,还有引起牛奶及奶制品驱虫药物残留的安全隐患。寄生虫多呈隐性感染,由于奶牛对其的耐受力较其它动物强,饲喂营养较好,危害不易被人察觉和重视。  相似文献   
5.
动物卫生对社会的一个重要影响是人类健康,这种影响已远超过传统的人兽共患病如狂犬病、炭疽和布氏杆菌病的范畴。据估算,约75%人类新生疫病是动物源性的,这种人类和动物新生疫病所造成的危险需要人类健康和动物健康机构更有效地联合起来,建立合作研究、跨学科中心、联合监测体系、以及应激体系等发展战略。英国政府展望项目一传染病的预防与控制:防患于未然,其目的是评估在未来的10年~25年内,疫病威胁将如何发展,科学将如何帮助我们应对这种威胁,以及疫病发现、识别和监测系统的作用。“文化和管理因素对动物传染病发现、识别和监测的影响”作为总项目的一个重要组成部分,对从宏观上认识动物疫病发生的根源、传播模式的改变、国际大流行的形成,以及疫病控制和根除将具有一定的指导作用。本文作者为原文作者之一,参与了多项国际合作项目的研究,在与各级兽医管理人员和同行专家交流过程中,意识到本项目研究的意义,对原文作了编译,以供我国广大兽医管理人员和研究工作者参考。  相似文献   
6.
小反刍兽疫血清学监测研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
本文报告对我国西藏自治区阿里发生小反刍兽疫情血清学监测研究结果,从小反刍兽疫确诊病例采集羊血清24份、接触牦牛血清9份和疑似病例羊血清25份,经应用国际标准化c-ELISA方法检测,小反刍兽疫感染羊血清学阳性率达阳性率91.67%,接触牦牛血清学阳性率11.11%,表明本病群感染的倾向性以及接触牦牛可能呈隐性感染。流行病学调查表明,本次疫情系输入性的,通过寄养、共享草地和水源、活畜作为礼品赠送、或者活畜非法贸易等方式传入。国内受威胁地区需要加强监测,实施有效的防疫措施,防范本病的再次入侵。  相似文献   
7.
自20世纪80年代以来,新生动物疫病的发生日益受到全世界广大的动物卫生和公共卫生人员的关注,随着人类生存和生活方式的改变,动物产业的高度集约化,新生动物疫病不断出现,已经严重制约了动物产业的发展,并危害到公共卫生安全和人类健康。文章总结了近20年来造成或促进新生动物疫病发生的主要原因(动物及其产品的流动或运输、病原的重组和变异、饲养方式的改变、生态环境的改变和破坏、病原的实验室泄漏和生物恐怖主义威胁等)以及在历史上所造成的新生动物疫病,以利于广大从事动物卫生和公共卫生人员对新生动物疫病的认识和了解。  相似文献   
8.
小反刍兽疫病毒属副粘病毒科麻疹病毒属,为一不分节段的负链RNA病毒。本研究以灭活的检测用抗原为材料,抽提基因组RNA作为模板,根据GenBank下栽的序列及载体的需要设计其主要的抗原基因H基因的编码序列的RT—PCIL扩增引物;然后将扩增基因片段与T载体连接克隆测序,再与原核表达载体pET100/D—TOPO连接、诱导表达。结果显示所设计引物对模极有预期扩增,序列测定表明为正确片段;片段经纯化与表达载体连接,已挑到阳性克隆。H基因的表达菌经IPTG诱导,SDS—PAGE电泳。结果显示:H基因有预期分子量大小的蛋白表达;用Anti—His抗体已检测到相应融合蛋白的表达,其原核表达的相应蛋白抗原性状况正在试验研究中,表达产物具有潜在的诊断抗原和免疫原价值。  相似文献   
9.
猪PLTP基因的PCR扩增及多态性检测   总被引:1,自引:1,他引:0  
磷酸脂转运蛋白(PLTP)是脂代谢中重要的转运蛋白之一,在机体脂类代谢中主要介导高密度脂蛋白(HDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)间的磷酸脂转移,具有调控动脉粥样硬化(AS)、降低血浆HDL水平等作用.对云南大河猪85个血样进行了DNA的提取及检测,PCR扩增PLTP基因并进行PCR-RFLP分析(HaeⅢ).结果表明,PLTP基因具有丰富的多态性,为今后研究该基因的生物学功能提供了依据.  相似文献   
10.
在鸡的养殖中,土杂鸡球虫病是日常防制工作中处理最多的疾病,其危害性很大。总结云南省土杂鸡的发病特点,同时根据多年来实践中取得的经验提出一些土杂鸡球虫病的防制对策和方法。  相似文献   
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