PCR技术及其在生产实践中运用的必要性

<正>聚合酶链式反应(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的 DNA得以迅速扩增。近年来,PCR技术迅速发展并与其他技术结合衍生出了荧光定量RT-PCR、多重PCR等一系列新技术,运用领域也不断拓宽,已被广泛地用于微生物学、医学、免疫学等领域。本文通过介绍PCR技术,使读者对PCR技术有初步的     

犬细小病毒检测方法研究进展

随着犬细小病毒变异亚型毒株的增多及所呈现的复杂的流行态势,提高犬细小病毒(CPV)检测方法的实用性、敏感性、特异性和简单快捷性迫在眉睫。通过对传统分子生物学和免疫学检测方法的优化改进,相继衍生出了MT-PCR、ii PCR、IC-LAMP、CPV-GIA、PCR-RFLP和RPA等新型方法,明显提高了检测的时效性及便捷性。就衍生出的多种新型检测方法优势特点进行了综述,以期为CPV的临床和实验室快速检测提供参考。     

提高畜牧兽医技术水平 促进畜牧兽医事业发展

我国的人口数量正不断的提升,对畜牧业的发展是非常在意的,畜牧业不仅提供了多元化的肉类食品供应,同时在各类衍生产品上表现出多元化的特点。畜牧兽医事业的发展过程中,应进一步的掌握好相关技术,在疫病的防控、治疗体系上不断的完善,为畜牧兽医事业的内涵更好的丰富。与此同时,技术水平的提升过程中,需加强技术的推广、应用,在不同的技术操作方法上更好的普及,降低疫病的发生概率。     

PCR技术在SPF级实验动物鼠检测中的应用

PCR作为一项新兴技术,越来越受到人们的重视。近几年来,PCR技术不断发展,它以准确、快速、便捷等优点广泛应用在科学研究的各个领域。PCR技术应用在实验动物领域中,可提高实验动物临床检测和监测水平。笔者主要介绍PCR技术在SPF级实验动物鼠病原微生物检测中的应用。     

家畜早期胚胎性别鉴定方法综述

家畜早期胚胎的性别鉴定在动物生产实际中具有重要意义。随着科学技术的不断进步,动物早期性别鉴定方法也在不断发展,目前已研究出了许多家畜早期胚胎性别鉴定方法。本文主要对家畜性别决定机理、早期胚胎性别鉴定常见的方法做一综述,特别对生产实用的PCR法及非电泳PCR法做一介绍,旨在为相关人员提供参考。     

几种布鲁氏菌病诊断方法的比较

布鲁氏菌病的诊断通常采用细菌学和免疫学方法,尽管细菌学方法是最直接的方法,但培养布鲁氏菌需要较长时间。随着免疫学技术的不断成熟和发展,出现了免疫电泳、补体结合试验、反向间接血凝、酶联免疫吸附试验及放射免疫分析方法等布病的诊断方法,使布鲁氏菌病能够早期诊断。但这些方法也存在假阳性和假阴性等问题。PCR技术提供了其他技术无法比拟的细菌检测手段,具有敏感、快速、准确的优点。PCR方法为布鲁氏菌病的早期诊断开辟了一条新途径。     

数字PCR技术及对动物疫病检测应用

数字PCR是近年发展起来的一种核酸绝对定量的检测技术,与传统的PCR和荧光PCR技术相比,数字PCR具有较好灵敏度、准确度和重复性,可实现绝对定量分析,为动物疫病的早期诊断和病原的定量检测提供了一个新平台。本文介绍了数字PCR的技术原理,并对该技术在动物疫病检测领域的中应用进行综述。随着数字PCR技术的发展,相关动物疫病配套检测试剂的研发,数字PCR技术将在动物疫病中得到广泛应用。     

浅议在线旅游企业商业模式创新

随着互联网技术的不断发展,我国旅游业已经进入到线上线下融合发展的阶段。伴随移动互联网的兴起,在线旅游以优质的服务、优惠的价格、灵活的旅游线路等优势日渐走强,越来越多的消费者选择购买在线旅游服务,传统旅游企业面临巨大的冲击,也衍生出更加丰富的在线旅游商业模式。越来越多的在线旅游企业也在寻求建立差异化的创新商业模式,获取更多的客户群及利润空间。     

动物疫病PCR检测实验室的污染与对策

PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)技术是美国Cetus公司人类遗传研究室的科学家Mullis于1985年发明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,又称为基因的体外扩增法。这种技术操作简单,容易掌握,有极高的灵敏度,结果可靠。近几年,随着PCR相关技术的发展,复合PCR、定量PCR、荧光PCR等PCR技术在动物疫病的快速检测方面得到了广泛应用,为动物疫病的诊断及检验检疫提供了良好的依据。但该方法较强的扩增能力也带来了令人头痛的问题?易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。1引起PCR污染的因素1.1 PCR试剂的…     

病毒检测方法研究进展

随着病毒的不断变异和传播,病毒检测方法的研究也在不断发展和深化,在病毒性疾病暴发时,及时、准确地检测病毒变得尤为重要。传统的病毒检测方法包括病毒分离鉴定、PCR和ELISA等,但这些方法都存在操作繁琐、检测时间长、灵敏度低等问题。近年来,一些新兴技术和优化的方法被应用于各类病毒的检测,带来了更加准确和高效的病毒检测,如基于微滴式数字PCR的病毒检测,其灵敏度可高出实时荧光定量PCR约16倍;基于基因测序技术的病毒检测方法越来越受到关注,其不仅可以检出病毒种类、数量,还能直接准确地获取病毒基因序列,甚至能够发现新病毒。此外,基于CRISPR/Cas、生物传感器、流式细胞术等检测技术在病毒检测领域也受到了广泛应用。虽然这些新技术在特异性和灵敏度等方面存在显著优势,但仍然面对一些考验,如检测成本较高、需要实验室环境等,这些问题限制了病毒检测技术的普及和推广。因此,未来的研究重点将聚焦于提高检测的准确性、实用性并降低成本,研发出更加完善的病毒检测技术。作者将优化后及新兴的检测技术与传统检测技术相对比,并总结其优缺点,以期为病毒检测、病毒性疾病防控提供参考依据。     

牛结核病诊断方法的研究进展

牛结核病是牛分枝杆菌等引起的一类慢性消耗性疾病,该病对畜牧业造成严重经济损失,也是公共卫生安全的难题。随着生命科学相关领域的快速发展,实验室诊断技术不断改良,牛结核病诊断方法和技术也有所发展。文章主要针对实验室诊断中的PCR、PPD皮内变态反应、IFN-γ检测法、ELISA等生物学方法进行探讨,对其优缺点作了概述,以期为牛结核病的诊治与防控提供依据,对牛结核病的防疫提供技术支撑。     

我国特色农业发展现状及未来趋势

随着国家对"三农"问题的重视,农业的发展受到了社会各界的关注,并衍生出许多围绕农业的新名词,特色农业就是其中一个。本文对现阶段我国发展特色农业中涉及到的相关内容,包括界定、背景、现状、趋势、应该注意的问题等进行了探讨,并对与畜牧业相关的特产业发展进行了分析。     

基因芯片检测技术在禽类病原检测方面的研究进展

基因芯片是继PCR后发展起来的一项快速、特异性好、敏感性强及高通量等优点的自动化基因检测技术,被广泛地应用于药物筛选、基因研究和疾病诊断检测等方面。随着病原不断发生基因重组,变异等现象,禽类病毒不断逃避免疫保护导致了强毒株的出现。传统的芯片检测方法虽然能够实现病毒的检测,然而昂贵的仪器设备和较长的检测时间严重阻碍了芯片技术在实际生产中的应用。一种低成本、时间短、快速有效的新的基因芯片技术的开发和应用是解决当前禽业产业发展的必要手段。基因芯片检测技术方法的改良及应用已成为目前疾病诊断的研究热点。本研究主要综述了基因芯片检测技术在禽类疾病检测方面的发展现状,并对今后该技术的发展方向和重点作了展望。     

荧光定量PCR技术的研究进展及应用

聚合酶链反应(PCR)技术白问世以来,在生物学研究领域内取得了巨大的发展并不断地完善,不仅被广泛应用在基础研究领域内。在疾病诊断等方面也有广泛、深入的研究和应用。在PCR对扩增产物定性鉴别的基础上又发展起来的对模板DNA片段进行     

分子生物学技术在布鲁菌种型鉴定上的应用

由于布鲁菌种型较多、宿主广泛、传播途径多样,因此有必要对布鲁菌进行准确的种型鉴别,以利于该病的快速诊断、流行病学分析,并采取科学有效的防控措施。分子生物学技术的不断发展为布鲁菌种型鉴定提供了愈来愈丰富的手段,并逐渐成为布鲁菌遗传溯源研究的重要工具。MLVA和real-time PCR技术因具有重复性好、分辨率高等优势,成为布鲁菌种型鉴定研究关注的热点。多重PCR、RFLP、RAPD和REP等技术也在布鲁菌种型鉴定中得到广泛应用。为了解分子生物学技术在布鲁菌种型鉴定上的应用现状,对相关研究进行了综述。     

多重PCR技术在动物疫病诊断中的应用探讨

<正>一般的PCR技术只能运用于一对引物当中,且在该技术干预下只能扩增出一个核酸片段,一般PCR技术只能对单一致病因子进行鉴定。随着现代医疗技术的发展,一般PCR技术逐渐发展出多重PCR技术。多重PCR技术,又称为多重引物PCR,它的技术反应特点是在同一个PCR反应体系里面,通过添加两对或两对以上的引物,该技术能同时实现多个核算片段的扩增,多重PCR技术反应原理、反应使用的试剂以及具体操作过程均与一般PCR技术相同。临床上主要采用多重PCR技     

核酸检测技术在水产动物病毒感染诊断中的应用

目前,应用于水产动物病毒感染诊断中的核酸检测技术主要包括核酸杂交、聚合酶链反应、聚舍酶链反应与分子杂交联用、聚合酶链反应与免疫学联用、限制性酶切技术、环介导的等温扩增、基因芯片及测序等技术。这些技术发展迅速,并在原有基础上根据实际的需求产生出很多相应的衍生技术。它们已被广泛应用在水产动物病毒感染诊断中并发挥着巨大的作用。核酸检测技术以其无法比拟的优点得到了快速的推广和应用,有着广阔的发展空间。     

实时荧光定量PCR技术原理与应用

实时荧光定量PCR(real-ti me fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术,它具有特异性强、PCR污染少、自动化程度高等特点。作者就实时荧光定量PCR技术的主要原理及目前在分子生物学领域,病原体和肿瘤等方面的检测和诊断应用进行了概述。     

数字PCR技术及其在动物生产中的应用

数字PCR(digital PCR,dPCR)技术是近几年迅速发展起来的第三代PCR技术,通过把反应体系均分到大量反应室中独立扩增单分子核酸,采集产生的荧光信号后根据泊松分布和阳性比例计算得到检测结果。dPCR技术能实现对样本中低水平目标核酸的绝对定量,具有高灵敏度、高准确度、重现性好、无需标准曲线等优点。本文综述了dPCR的基本原理、主要优势、技术平台发展及其在动物病原体检测、生长繁殖相关基因检测、畜禽饲料成分检测和畜禽产品质量分析等方面的应用。     

畜禽及环境中沙门氏菌的PCR快速检测与控制

本文运用PCR技术检测家畜及环境中的沙门氏菌,25种沙门氏菌均获得特异性扩增,3种非沙门氏菌检测结果为阴性。表明PCR技术具有快速简便、敏感高和特异性强等优点,值得在沙门氏菌的快速检测中推广应用。并简要介绍了沙门氏菌的相关控制措施。