五味子甲素·乙素及丙素对HaCat细胞氧化损伤的保护作用研究

[目的]探讨五味子甲素、乙素及丙素对人皮肤细胞衰老作用的影响,为开发北五味子抗皮肤衰老产品奠定基础。[方法]通过H2O2造成HaCat细胞氧化损伤衰老模型,采用噻唑蓝(MTT)法测定HaCat细胞增殖情况。[结果]浓度50μmol/L的H2O2对细胞无明显抑制作用,浓度100和200μmol/L组有明显抑制作用。H2O2组细胞的存活率为(71.667±0.862)%。浓度100和200μmol/L五味子甲素组细胞的存活率分别为(76.400±0.656)%和(82.367±0.666)%;浓度100和200μmol/L五味子乙素组细胞的存活率分别为(86.300±0.721)%和(88.900±0.985)%;浓度100和200μmol/L五味子丙素组细胞的存活率分别为(86.767±0.551)%和(88.067±0.873)%。[结论]五味子甲素、乙素及丙素对H2O2造成细胞的氧化损伤均具有一定的保护作用,以五味子乙素和丙素的效果较好。     

北五味子叶片木脂素类成分含量变化研究

研究北五味子叶片中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量的日变化,为今后人工合成木脂素类成分和开展优质高效栽培技术研究提供理论依据。超声提取五味子叶片的木质素类成分,并利用HPLC对五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙袭进行含量测定。3种木脂素类成分在叶片中的含量从6：00时至9：00时呈上升趋势（五味子醇甲和五味子乙素在9：00时达到1d中的最大值）;9：00时至15：00时呈递减趋势;15：00时至18：00时又呈上升趋势（五味子甲素在18：00时达到1d中的最大值）．同一节位叶片中木脂素类成分含量的高低顺序为五味子乙素〉五味子醇甲〉五味子甲素。     

北五味子不同部位3种木脂素含量的比较分析

回流提取北五味子不同部位（根、茎、叶、果实、种子）的五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素,并利用HPLC测定这3种木脂素的含量,并进行方法学考察,为使用新的药用部位打基础。在北五味子果实中,木脂素主要存在于种子中;在根、茎、叶、果实的含量中,五味子醇甲的含量由高到低为果实〉茎〉根〉叶;五味子甲素的含量由高到低为根〉果实〉茎〉叶;五味子乙素的含量由高到低为根〉果实〉茎〉叶。     

南五味子和北五味子藤茎中五味子素类化合物含量的HPLC法测定及差异比较分析

为了测定与比较我国南北地区五味子藤茎中的五味子素的含量和差异,探究五味子藤茎的可开发利用度。以五味子酯甲与五味子乙素含量作为考察五味子素类化合物的指标,采用超声-乙醇法提取五味子素类化合物,高效液相色谱法测定,测定条件：Kromasil-C18(4.6 mm×200 mm, 5 mm)色谱柱,柱温30℃,检测波长220 nm,流动相：甲醇-水(体积比75∶25),进样量5μL,流速0.8 mL/min。结果显示五味子乙素含量在0.026 4～0.132 mg/mL范围内线性关系良好,在南五味子藤茎中约0.028%,在北五味子藤茎中约0.147%,平均回收率为98.73%,RSD为1.33%。五味子酯甲含量在0.032 4～0.162 mg/mL范围内线性关系良好,在南五味子藤茎中约0.237%,在北五味子藤茎中约0.100%,平均回收率为103.64%,RSD为2.60%。表明了南五味子藤茎和北五味子藤茎中均含有丰富的五味子素类化合物,本研究中的两种五味子素类化合物在南北地区五味子藤茎中的分布差异具有统计学意义,五味子藤茎的开发利用具有广阔的前景。     

五味子木脂素舒张大鼠离体气管平滑肌的功能研究

【目的】探讨五味子木脂素6种单体成分对大鼠离体气管平滑肌张力的影响及其舒张气管平滑肌的作用机制。【方法】采用离体气管灌流法,观测终浓度为10^-7~10^-3 mol/L的五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲和体积分数1‰二甲基亚砜（DMSO,对照）对静息状态及乙酰胆碱（ACh）预收缩状态下大鼠离体气管环张力的影响。用L型Ca²⁺通道阻滞剂维拉帕米（10^-5 mol/L）、β-肾上腺素受体阻断剂普萘洛尔（10^-5 mol/L）和体积分数1‰ DMSO（对照）预孵育大鼠离体气管环15 min,然后依次加入浓度为10^-5~10^-3 mol/L 的五味子醇甲,观测维拉帕米和普萘洛尔对五味子醇甲舒张气管作用的影响。【结果】与对照比较,不同浓度的6种五味子木脂素单体对静息状态下的气管环张力均无显著影响（P>0.05）。五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素对ACh预收缩的气管环张力相较对照具有显著抑制作用,且呈剂量依赖性（P<0.001）,最大抑制率分别为（92.12±3.28）%,（78.23±10.20）%,（62.95±12.93）%及（46.58±4.92）%;而五味子酯甲和五味子丙素对ACh 预收缩气管环张力无明显影响（P>0.05）。与DMSO对照组相比,五味子醇甲对大鼠离体气管环的舒张作用可被维拉帕米明显减弱（P<0.001）,最大抑制率降低了（26.24±8.42）%,但普萘洛尔对其作用无显著影响（P>0.05）。【结论】五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素可呈剂量依赖性地舒张大鼠离体气管平滑肌,其中五味子醇甲的作用机制可能与阻断L型Ca²⁺通道有关。     

五味子鲜叶化学成分研究

[目的]研究五味子鲜叶的化学成分。[方法]运用常规柱色谱方法进行化学成分的分离纯化,并根据理化性质和波谱学分析鉴定化合物的结构。[结果]从五味子鲜叶的石油醚和乙酸乙酯萃取部分共分离得到12个化合物,鉴定了8个化合物,分别为β-谷甾醇（1）、4-羟基苯甲酸甲酯（2）、schindilactone A（3）、五味子醇乙（4）、Wuweizilactone acid（5）、五味子乙素（6）、五味子甲素（7）、五味子醇甲（8）。[结论]首次系统分离并鉴定五味子鲜叶的化学成分,其中化合物2为首次从五味子中分离得到。     

北五味子药材指纹图谱研究

[目的]建立北五味子药材的HPLC指纹图谱,为北五味子药材的质量控制提供保证。[方法]采用RP-HPLC分析,利用中药指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对不同批次北五味子药材HPLC图谱进行分析比较。[结果]建立了北五味子药材的HPLC指纹图谱,以五味子醇甲、五味子甲素、五味子酚、五味子乙素为参照峰确立了北五味子药材指纹图谱中的35个共有峰。[结论]建立的指纹图谱重现性及稳定性均较好,可用于北五味子药材的质量管理规范。     

五味子油饼的化学成分研究

采用常规硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析等多种色谱分离手段,从五味子油饼中分离得到7个化合物,依据理化．性质、光谱学分析和化学方法,确定了它们的结构分别是：五味子丙素（Schisandrin C,1）、五味子乙素（Schizandrin B,2）、五味子甲素（Schisandrin A,3）、五味子酯甲（Schisantherin A,4）、Angeloylgomisin H（5）、五味子醇乙（Schisandrol B,6）、五味子醇甲（schisandrol A,7）。     

高效液相色谱法测定不同品种北五味子藤茎中五味子甲素与五味子乙素含量

采用HPLC法同时测定不同品种北五味子藤茎中五味子甲素和五味子乙素含量。色谱柱Waters C18柱（4．6mm×150mm,4μm）,流动相甲醇：水（70：30）,流速1．0mL／min,检测波长254nm。结果表明,五味子甲素在0．18-3．60μg（r=0．9999）、五味子乙素在0．20～4．0μg（r=0．9999）线性关系良好,平均同收率分别为99．72％、102．72％,RSD均小于6．5％。该方法简便、准确、专属性强,适合于五味子藤茎中五味子甲素和五味子乙素含量的测定,不同品种成分均存在一定的差别。     

五味子根化学成分研究

采用常规硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、重结晶等多种色谱分离手段,首次从五味子根95％乙醇提取物中分离得到6个单体化合物。依据理化性质、光谱学分析鉴定它们的结构,它们分别是：五味子乙素（Schizandrin B,1）、五味子甲素（Schisandrin A,2）、五味子酯甲（Schisantherin A,3）、顺芷酰戈米辛H（Tigloylgomisin H,4）、五味子醇甲（Schisandrol A,5）、五味予醇乙（Schisandrol B,6）。     

黑老虎总木脂素含量测定

[目的]建立黑老虎药材中总木脂素的含量测定方法。[方法]采用紫外-可见分光光度法测定黑老虎中总木脂素含量。[结果]五味子酯甲在0.008 16~0.040 8 mg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.999 1）,平均回收率为100.37%,RSD值为0.98%。广西防城产黑老虎中总木脂素含量最高。[结论]紫外分光光度法简便易行、快速准确,适用于黑老虎中木脂素含量的测定。     

诺丽发酵果汁中总木脂素含量测定

[目的]建立诺丽发酵果汁中总木脂素的含量测定方法。[方法]以鬼臼毒素为对照品,采用紫外分光光度法建立总木脂素含量的分析测定方法。[结果]鬼臼毒素对照品在0~0.100 mg/m L线性关系良好;平均回收率为99.61%,RSD为1.85%。采用此方法对不同发酵时间的诺丽果汁中总木脂素成分进行含量测定,含量为0.401 9~0.582 7 mg/m L。[结论]该试验建立的含量检测方法简单、迅速、准确、重复性好,适用于液体样品中总木脂素成分含量的测定。随着发酵时间的增长,诺丽果汁中木脂素类成分的含量变化不大。     

思茅松松塔正己烷提取物的气相色谱-质谱分析

[目的]分析思茅松松塔正己烷提取物的化学成分与相对含量。[方法]运用气相色谱-质谱联用技术,结合计算机检索鉴定其化学成分,并用峰面积归一化法计算各组分的相对含量。[结果]从中鉴定出48个组分,占峰面积的81.51%。[结论]化合物类型主要为萜类、脂肪酸酯、甾体和木脂素。     

不同产地北五味子的质量评价

[目的]对不同产地北五味[Schisandrachinensis（Turcz．）Baill]的药材质量进行分析与综合评价。[方法]应用紫外分光光度计法测定并比较了不同产地北五味子中总木脂素含量;应用HPLC方法测定并比较了不同产地北五味子中甲素和乙素含量;应用高效液相指纹图谱技术对不同产地北五味子进行了指纹图谱比较与分析。[结果]4个产地北五味子在化合物组成方面具有明显相似性;苇河产北五味子与桃山产北五味子相似度较高;苇河产地北五味子的品质较好。[结论]该研究可为评价北五味子产地质量提供科学依据及方法学的保障。     

QuEChERS dSPE EMR-Lipid-LC-MS-MS测定鸡蛋中3种聚醚类抗球虫药物残留

[目的]利用Agilent Bond Elut增强型脂质去除EMR-Lipid技术,建立了以QuEChERS dSP EEMR-Lipid为前处理测定鸡蛋中3种聚醚类药物残留的液相色谱-质谱联用(LC-MS-MS)方法。[方法]鸡蛋经酸化乙腈提取,Bond Elut EMR-Lipid QuEChERS净化,采用HPLC-MS-MS上机检测。[结果]3种聚醚类药物残留在2.0~100.0μg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r0.999),回收率在84.6%~107.0%。[结论]该方法前处理方便快捷、定量结果准确、再现性好,适用于鸡蛋中3种聚醚类药物残留的测定。     

3种微藻在特定波长下的光密度与其单位干重·细胞浓度间的关系研究

[目的]测定3种微藻的生物量,实现3种微藻的光密度、单位干重和细胞浓度间的相互换算。[方法]测定蛋白核小球藻、杜氏盐藻和钝顶螺旋藻在680、630和560nm下的OD值及其单位干重和细胞浓度,并进行线性拟合。[结果]3种微藻的OD值与其单位干重、细胞浓度（钝顶螺旋藻除外）均呈较好的线性关系,相应的回归方程为：小球藻细胞浓度（万个/ml）=1557 OD680-34.716,小球藻单位干重（mg/ml培养液）=0.2074 OD680＋0.0022;杜氏盐藻的细胞浓度（万个/ml）=901.98 OD630＋5.1408,杜氏盐藻单位干重（mg/ml培养液）=0.7516 OD630＋0.015;钝顶螺旋藻单位干重（mg/ml培养液）=0.2394 OD560-0.0001。[结论]在一定范围内,可以通过相应的线性方程,快速、方便地测定3种微藻的生物量,并实现相应微藻3种生物量指标间的相互换算,从而为相应微藻生物量的测定比较提供依据。     

动态液相微萃取一气相色谱法检测蔬菜中有机磷农药的研究

[目的]应用动态液相微萃取与气相色谱联用技术建立蔬菜中3种有机磷农药（敌敌畏、甲基对硫磷和对硫磷）的分析方法。[方法]蔬菜样品经搅拌打碎取滤汁后,用优化后的动态液相微萃取提取,采用气相色谱法进行测定。[结果]通过优化,3种有机磷农药的线性范围均为0．50～5．00μg／ml,回收率为85．2％～104．4％,相对标准偏差（n=7）为1．0％～6．5％,检出限（3SIN）为0．095～0．160μg／g。[结论]该方法适合用于蔬菜中有机磷农药的快速检测。     

固相萃取-高效液相色谱法测定蜜源生物液中3种四环素族抗生素的残留

[目的]建立固相萃取-高效液相色谱法同时测定蜜源生物液中土霉素(OTC)、四环素(TC)、金霉素(CTC)残留量的方法。[方法]采用0.1 mol/L Na2EDTA-Mcllvaine溶液提取样品,Oasis HLB固相萃取柱净化,以0.01 mol/L草酸-乙腈-甲醇对待测成分进行梯度洗脱。[结果]OTC、TC在0.2～20.0μg/ml范围内线性关系良好,相关系数在0.999 6～0.999 8;CTC在0.5～20.0μg/ml范围内线性关系良好,相关系数为0.999 8;各组分在0.05～0.20 mg/kg添加浓度范围内,平均回收率在98.4%～104.9%,相对标准偏差为1.9%～5.0%。[结论]该方法简单、可靠、灵敏度高,适用于蜜源生物液中四环素族抗生素残留的检测。     

固相萃取－气相色谱法测定小麦粉中六六六和滴滴涕残留量

[目的]建立小麦粉中六六六和滴滴涕农药残留量的固相萃取-气相色谱分析方法。[方法]以乙腈为提取剂,超声提取,采用Carbon NH2固相萃取柱净化,用乙腈-甲苯(3+1,V/V)作为洗脱液,经HP-1毛细管色谱柱分离后使用电子捕获检测器(ECD)测定。[结果]六六六和滴滴涕农药的质量浓度为0.005~0.400μg/m L时线性良好,相关系数为0.998 6~0.999 5。在0.05、0.10、0.20 mg/kg3个添加水平下,六六六和滴滴涕的加标回收率在80.21%~113.41%,相对标准偏差在1.30%~4.33%(n=6),检出限为0.10~1.51μg/kg。[结论]该方法具有样品前处理操作简单、灵敏度高、试剂用量少、重现性好等优点,适用于小麦粉中六六六、滴滴涕的定性定量分析。     

RP-HPLC法测定秦艽不同器官中獐牙菜苦苷含量的研究

［目的］建立秦艽不同器官中獐牙菜苦苷含量测定的RP HPLC方法。［方法］定量分析秦艽不同器官中獐牙菜苦苷含量。［结果］獐牙菜苦苷 在0.20～1.8 μg范围内成良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为98.6%（RSD=1.32%）。麻花秦艽叶中獐牙菜苦苷的含量最高,茎中含量最低。［结论］该研究可为秦艽药材的合理开发利用提供依据。