Dot-PPA-ELISA对猪丹毒的免疫监测及抗体保护效价的测定

用猪瘟、猪肺疫、猪丹毒三联疫苗和猪丹毒1a、2型氢氧化铝吸附甲醛灭活疫苗分别免疫断奶仔猪，采用Dot-PPA-ELISA监测免疫猪血清抗体变化。结果，弱毒疫苗免疫后第7d猪丹毒血清抗体效价开始升高，第2～3周达最高值；灭活疫苗免疫后第3～4周抗体效价达最高值，且灭活疫苗免疫猪的抗体水平明显高于三联疫苗免疫猪。免疫6周后，用C43004(1a型)、C43179(1b型)和C43-12(2型)3株不同血清型的猪丹毒混合强毒同时对不同抗体效价的免疫猪和对照猪进行了皮肤内接种攻毒，并根据其皮肤和体温反应确定1：32为猪能抵抗混合强毒攻击的抗体保护效价。经对44头50～60日龄未免疫的断奶仔猪血清检测，其抗体效价在1：32以下的猪占88．36％，278头免疫猪血清的抗体效价在1：32或以上的猪占92．81％。表明Dot-PPA-ELISA适用于猪群猪丹毒的免疫监测和免疫力测定。     

猪瘟不同顺序零天免疫的免疫效果比较

以猪瘟免化弱毒细胞苗分别免疫5组初生仔猪，每头1．5头剂。第1组20头先免疫，1小时后吸初乳。第2组15头，吸初乳后1小时免疫。第5组15头，吸初乳后半小时免疫。75日龄，以猪瘟弱毒单抗酶联方法测定1组动物的平均抗体（OD值）分别为0．25、0．25及0．21。80日龄，每组各随机抽出4头猪，连同非免疫对照猪6头以猪瘟石门系强毒攻击后，对照猪全死，第1组100％保护，第2组75％保护，第5组50％保护。第1组的免疫效果明显优于其他两组。     

猪瘟不同顺序零天免疫的免疫效果比较

以猪瘟兔化弱毒细胞苗分别免疫3组初生仔猪，每头1．5头剂。第1组20头先免疫，1小时后吸初乳。第2组15头，吸初乳后1小时免疫。每3组13头，吸初乳后半小时免疫。75日龄，以猪瘟弱毒单抗酶联方法测定3组动物的平均抗体（OD值）分别为0．25、0．23及0．21。80日龄，每组各随机抽出4头猪，连同非免疫对照猪6头以猪瘟石门系强毒攻击后，对照猪全死，第1组100％保护，第2组75％保护，第3组50％保护。第1组的免疫效果明显优于其他两组。     

猪瘟不同顺序零天免疫的免疫效果比较

以猪瘟兔化弱毒细胞苗分别免疫3组初生仔猪，每头1.5头剂。第1组20头先免疫，1小时后吸初乳。第2组15头，吸初乳后1小时免疫。第3组13头，吸初乳后半小时免疫。75日龄，以猪瘟弱毒单抗酶联方法测定3组动物的平均抗体(OD值)分别为0．25、0．23及0．21。80日龄，每组各随机抽出4头猪，连同非免疫对照猪6头以猪瘟石门系强毒攻击后，对照猪全死，第1组100％保护，第2组75％保护，第3组50％保护。第1组的免疫效果明显优于其它两组。     

猪肺炎支原体与猪支气管败血波氏杆菌在猪体液免疫和生长性能上的协同作用

试验选用10日龄成华×大约克杂交猪36头,随机分成四组(1、2、3、4),每组9头.其中1、2组用猪肺炎支原体全菌抗原免疫后再分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒,3、4组注射生理盐水作为对照,并与前两组同时分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒.采用间接ELISA、组织切片等方法对猪血清中的抗体水平、肺脏的病理变化及生长性能进行测定.试验表明:用猪肺炎支原体全菌抗原接种猪后,在血清中能检测到较高的抗体水平(25).猪肺炎支原体攻毒后2周,免疫猪和对照猪血清中猪肺炎支原体抗体的滴度分别为23.8与22.4(P＜0.05),且免疫猪的生长性能比对照猪好.在猪支气管败血波氏杆菌攻毒组,攻毒2周和4周后免疫猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体水平与对照猪相比分别提高了26.67%和30.00%(P＞0.05),6周后免疫猪和对照猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体分别为21.7和20.3(P＜0.05),且在攻毒后4～6周,免疫猪的生长性能有了显著的改善.组织切片显示,无论是用猪肺炎支原体攻毒还是用猪支气管败血波氏杆菌攻毒,免疫猪的肺脏病变程度都较对照猪轻.     

防制猪痢疾的新疫苗

通过两批试验猪检测的猪痢疾（ＳＤ）原型疫苗可产生抗猪痢疾密螺旋体（Ｔｈ）的高效价循环抗体。试验１在口服攻毒前免疫２次。攻毒后２周内，５／６的未免疫猪发生痢疾，而免疫猪只１／６发病。但攻毒后１个月。存活的那头未免疫猪和２头免疫猪却死于痢疾。试验２，将８头免疫３次的猪同感染猪混养后只有２头（２５％）发生严重痢疾，而未免疫猪却有７／８发病。表明ＳＤ原型苗能提供保护，并已实用于澳大利亚的猪痢疾防制? ?     

猪细小病毒N株弱毒苗的田间试验

用猪细小病毒N株弱毒苗对广西11个猪场的后备母猪,在配种前进行了田间免疫试验,共免疫1713头猪,并于免疫前后检测了247头猪的细小病毒血凝抑制抗体,结果显示免疫后有95.6％的猪HI抗体上升。效检与田间试验的结果相一致。观察了121头免疫猪产仔成绩,免疫猪比对照猪平均每窝多产活仔2.9头,少产死胎、木乃伊、弱仔3.6头。近年来我们的研究证明,广西猪群普遍存在并广泛流行猪细小病毒病。为了更有效的防制本病,我们研究出一自然弱毒苗,并对其安全性和免疫原性进行了研究。现将猪细小病毒N株弱毒苗的田间试验结果报告如下。     

3ABC-ELISA检测口蹄疫野毒抗体时效性研究

为了验证3ABC-ELISA检测口蹄疫野毒感染抗体的时效性,用口蹄疫OZK/93、O/(XJ/10-11/MYA/98)病毒分别对3ABC-ELISA检测阴性的60头临床健康免疫猪和4头未免疫临床健康对照猪经肌肉注射接种.接种病毒第6天,对照猪全部发病,实验猪6头发病,其中对照猪3ABC-ELISA抗体全部为阴性,实验发病猪3ABC-ELISA抗体阳性1头,54头未发病猪3ABC-ELISA抗体阳性14头.试验结果表明,3ABC-ELISA检测口蹄疫野毒抗体具有时效性,建议在口蹄疫疑似病例确诊中优先采用病原学检测方法进行确诊,3ABC-ELISA检测方法可以用作野毒感染的追溯性调查.     

浙江省规模化猪场猪瘟免疫状况监测

应用正向间接血凝试验分别检测了46个规模化猪场1075头母猪、9个规模化猪场198头育肥猪、规模化猪场72头断奶前仔猪和13个规模化猪场296头断奶后仔猪血清的猪瘟抗体效价。结果，母猪、育肥猪、断奶前仔猪和断奶后仔猪分别为149、65、3和110份血清抗体效价≤1∶8，低于临界保护线；分别有926、133、69和186份血清抗体效价≥1∶16，视为免疫合格，免疫合格率分别为86．17％、67．17％、85．83％，检测结果表明，断奶后仔猪和育肥猪免疫效果不理想。     

猪附红细胞体对仔猪猪瘟免疫效果的影响

为探讨猪附红细胞体对仔猪猪瘟免疫效果的影响，本试验利用猪瘟抗体检测ELISA试剂盒，对已注射猪瘟疫苗的69头感染猪附红细胞体的仔猪和31头无猪附红细胞体感染的健康仔猪进行了猪瘟抗体检测．结果表明，感染猪附红细胞体仔猪的猪瘟抗体水平低下，其猪瘟疫苗整体免疫合格率（49．2％）明显低于健康仔猪（93．5％），且显性感染仔猪的免疫合格率（41．6％）明显低于隐性感染仔猪（53．5％）、说明，猪附红细胞体严重干扰了猪瘟疫苗的免疫效果，且干扰程度随着猪附红细胞体感染程度的加深而更为明显。     

猪细小病毒AEI灭活疫苗中间试产总结报告

1984～86年间我们制成17批灭活疫苗经检验合格后在上海郊区和江浙部分地区19个养猪场共免疫HI 阴性和有母源抗体的后备母猪2000头,孕龄3天到2个月的怀孕母猪28头,并随意留820头同窝出生猪作不免疫对照。免疫猪抽样40头,对照猪抽样32头进行攻毒效检.1988年经上海市农业局沪农(88)字第238号文批准我所进行猪细小病毒灭活疫苗中间试产后即进行疫苗的中试生产和扩大区域试     

仔猪猪瘟免疫程序的研究

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对不同日龄仔猪的猪曾母源抗体进行检测,结果表明,仔猪在１５,２５,３５和４５日龄母源抗体阳性率分别为９８．１５％,７８．５０％,７０．４１％和２２．２２％,根据母源抗体检测结果,对各日龄仔猪免疫不同头剂猪瘟疫苗,免疫持续至１５０和２１０日龄时,对其免疫抗体进行检测,结果显示：仔猪在４５日龄接种猪瘟疫苗４头剂,３５和２５日龄接种疫苗４或６头剂,新生仔猪乳前注苗２头剂,７０日龄注     

猪圆环病毒2型自然感染条件下的猪口蹄疫免疫效果调查

本研究对猪圆环病毒2型自然感染风险条件下的10窝98头仔猪随机分成口蹄疫常规和倍量2个免疫剂量组,另选5头成年母猪作为圆环感染阴性对照,仔猪于35日龄和65日龄进行猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫,并于首免前的28日龄、首免后21 d和二免后的29 d采血,5头成年母猪同期进行采血,分别进行PCV-2核酸、抗体和猪口蹄疫O型ELISA抗体检测。结果显示,成年母猪PCV-2核酸均为阴性,口蹄疫免疫抗体水平均达到≥1:128;2组仔猪首免后21 d和二免后29 d检测存在不同比率的PCV-2核酸阳性和抗体阳性,猪口蹄疫抗体合格率分别为69%、97.5%和13.8%、25%,提示断奶仔猪可能因感染PCV-2而影响了猪口蹄疫免疫效果。     

使用猪三联苗的防疫效果观察及对猪瘟免疫期抗体效价测定

猪三联苗免疫51—60日龄断奶前仔猪对猪瘟免疫期试验,是用人工接种猪瘟强毒致病的猪与试验猪、对照猪一起同圈感染,其结果免疫51日龄仔猪经7.5个月100%保护;免疫60日龄仔猪经6个月75%保护;另一组免疫60日龄仔猪经9个月,感染观察22天均健活,用猪瘟毒1毫升肌注后,对照猪于15天死亡,免疫猪100%保护。免疫猪与对照猪在攻毒前采取血清,用中和反应测定猪瘟免疫抗体及其效价的结果,共测14头中有5头猪血清中无中和抗体,家兔体温呈现热反应(其中对照猪3头均死亡,另2头免疫猪死亡一头,感染发病耐过1头),另9头免疫猪血清有中和抗体,试验兔无体温反应,攻猪瘟毒后均健活。被检血清中和效价一般在4—32倍之间。免疫7.5个月组的猪中和效价个别达到128倍,免疫9个月组的猪也有达到64倍的。田间试验免疫15,225头,其中发生反应17头,占11/千,死亡3头,占2/万,留养观察6236头,发病率9.64%,死亡率1.59%,没有猪瘟、猪丹毒病的发生。     

猪瘟超前免疫试验

对某养猪场１６窝１５７头初生仔猪，分成哺乳前９０分钟免疫，哺乳前４５分钟免疫，哺乳后３０分钟免疫及非免疫（母源抗体被动免疫）对照四个组。２０日龄时随机抽取试验仔猪１１窝６７头前腔静脉采血，采用间接血凝试验（ＩＨＡ）和猪瘟兔化弱毒单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验（ＨＬＬＶ－ＭＡＢ－ＥＬＩＳＡ）两种方法检测仔猪血清猪瘟免疫抗体水平。ＩＨＡ法各组ＩＨＡ平均效价为１９．６、２１．１、９．７、１１，保护率为７０．６％、８０％、３５．７％、４６．２％；ＨＣＬＶ──ＭＡ６──ＥＬＥＳＡ法各组ＯＤ值平均为０．２２、０．３２、０．１１、０．０８，阳性率为５８．８％、７５％、０％、０％。试验结果表明：超前免疫其免疫效果显著优于哺乳后免疫及母源抗体被动免疫，且哺乳前４５分钟免疫优于哺乳前９０分钟免疫。     

猪旋毛虫病疫苗的区域试验

在河南省某县一个猪旋毛虫病高发流行区进行了旋毛虫成虫可溶性抗原疫苗及灭活新生细虫疫苗的区域试验。免疫前用镜检法抽检某自然村商品猪２１头，查出有虫猪４头，感染率达１９．０５％。成虫可溶性抗原疫苗每头腹腔注射免疫０．５ｍｇ，间隔１０天作２次免疫；新生幼虫疫苗每头猪腹腔注射１０万条，同样间隔１０天作２次免疫。两种疫苗分别免疫猪８６及４４头。免疫后４－７个月内剖杀抽检免疫效果。共抽检未免疫自然感染对照猪４     

猪细小病毒病弱毒疫苗免疫效力评价及临床免疫试验

为制定猪细小病毒病弱毒疫苗效力检验的标准,用3批猪细小病毒病弱毒疫苗进行接种猪与接种豚鼠的平行试验;同时进行临床免疫试验。3批疫苗接种豚鼠和猪后定期进行PPVHI抗体检测;猪于免疫后攻毒,并进行病毒分离。免疫母猪在怀孕早期进行强毒攻击,40d扑杀进行病毒分离。用3批疫苗免疫后备母猪统计产仔成绩。结果显示,豚鼠接种后21d、猪接种后7d全部产生抗体反应。免疫攻毒的猪均未从血浆和内脏中分离到病毒,而从对照猪分离到病毒;怀孕母猪强毒攻击后扑杀,胎儿病毒分离均为阴性,而对照猪胎儿病毒分离为阳性;统计数据表明免疫猪的产仔成绩比未免疫猪高,平均每窝多产活仔1.85头,少产死胎木乃伊胎0.65头。结果表明,当免疫豚鼠PPV HI≥64时,免疫猪能抵抗PPV强毒攻击,两者呈正相关;免疫母猪的攻毒试验表明免疫母猪能抵抗PPV经胎盘感染;临床免疫试验证明疫苗具有良好的免疫原性和安全性。     

3种非猪瘟病毒单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响

将 2 0头 9月龄左右猪瘟、伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征抗原、抗体阴性猪分成 6组 ,分别利用猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒 (PRV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 (PRRSV)单独或混合感染。 7d后连同对照猪 4头 ,免疫接种猪瘟兔化弱毒疫苗 (HCL V) ,13d后连同 4头阴性对照猪一起攻击猪瘟石门强毒。整个试验期间分别每天测温 ,观察临床症状 ,每周采集扁桃体和血样做各种病毒抗原及抗体检测。结果表明 ,非猪瘟病毒感染 7d后 ,所有各组猪均从体内检测到了相应感染的病原 ,表明 3种非猪瘟病毒感染成功。在攻击猪瘟石门强毒后 2周 ,感染了非猪瘟病毒后接种 HCL V疫苗的 4个免疫组 12头猪除 1头外 ,11头全为猪瘟病毒 (HCV)抗原检测阳性 ,且多呈强阳性 ;而单一 HCL V疫苗免疫组在猪瘟强毒攻击后检测不到 HCV;所有 HCL V疫苗免疫猪均存活 ,而非免疫对照组 4头猪全部在攻毒 16 d内死亡。     

一起因免疫而导致猪瘟暴发的调查

国内曾多次报道因防疫注射而导致猪瘟暴发的事件，但我省很少报道。现将我市一起因猪瘟防疫注射导致猪瘟暴发的调查情况报道如下。１发病情况我市湾坞乡牧医站两名兽医员到梅洋行政村的何厝里、前房、茶亭等三个自然村进行猪瘟防疫注射，共免疫生猪１１７头，其中母猪４１头，菜猪７０头，仔猪６头。免疫２天后这批猪开始发病，共发病６７头，发病率为５７．２６％，其中母猪１５头，发病率３６．５９％；菜猪４６头，发病率为６５．７１％；仔猪６头，发病率为１００％；另外未经免疫的２头母猪和３１头仔猪也感染发病。抗生素治疗无效。２…     

猪瘟等三种疫病的免疫试验

为了研究猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)及猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗免疫猪群前后的抗体水平及免疫干扰现象,试验取20日龄仔猪50头,分组后于不同日龄应用以上3种疫苗进行免疫,并检测猪群免疫前后的抗体水平;同时另取18头仔猪,以高致病性猪蓝耳病灭活疫苗免疫,作对照试验。结果表明:仔猪免疫CSF活疫苗的日龄有待进一步探讨,CSF抗体ELISA检测方法比IHA方法可靠;仔猪于20,304,0日龄时免疫PR gE基因缺失活疫苗,均不会对母源抗体造成干扰;PRRS灭活疫苗及高致病性猪蓝耳病灭活疫苗如何使用尚需探讨。