外泌体在动物病毒感染中作用研究进展

外泌体是最小的细胞外囊泡,作为一种重要的细胞间通讯载体,广泛存在于体液中。外泌体本身可以携带复杂的核酸和蛋白质,越来越多的研究表明其在病毒感染中起着重要作用。因此,病毒利用外泌体产生感染的作用机制受到了国内外学者的广泛关注。作者通过对近年来外泌体在病毒感染中相关作用的研究进行总结,以期为外泌体在抗病毒方面的研究提供参考。     

外泌体的生成及其在畜禽繁殖中的作用

细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是一种由细胞分泌的膜性囊泡结构。外泌体是最小的细胞外囊泡，通过激活细胞特异性受体和信号通路来控制其生物发生，由转运所需的内体分选复合物(endosomal sorting complexes required for transport, ESCRT)依赖性或非依赖性途径调节。外泌体在免疫、中枢神经系统的发育、组织再生、妊娠、精子发育成熟等过程中发挥重要作用。哺乳动物的精浆中大量存在外泌体，参与调节精子活力、抗氧化、精子获能、精卵结合等生理学过程。在妊娠过程中，外泌体促进胚胎着床、母胎双向交流、血管生成，提高妊娠成功率。家禽的繁殖过程也受到外泌体的调控。目前研究表明，鸡的精液中已被证实外泌体的存在，与维持精子活力相关。进入母鸡生殖道的精子储存在母鸡的贮精囊中，贮精囊细胞会分泌外泌体样细胞外囊泡，并作用于精子，增加贮精囊中精子的存活率，保证精子活力，促进精卵结合。文章主要阐述了外泌体的生成机制及其在哺乳动物和禽类繁殖过程中的作用，为进一步推动畜禽繁殖工作的发展提供参考。     

外泌体生物学功能及应用研究进展

外泌体是由细胞主动向外分泌的双层囊泡小体,可携带多种蛋白质、核酸和脂质等在体液中循环,具有物质"运输载体"的作用,能够将内含物质运输到周围细胞中进行细胞间的物质运输和信息交流,从而参与多种生理及病理学过程,如递呈抗原、促进肿瘤生长与迁移、修复损伤组织等。大量研究证实,外泌体对疾病治疗具有决定性帮助,特别是在疾病早期诊断和作为药物载体进行靶向治疗方面拥有广阔的应用前景。论文从外泌体的发生机制、主要成分和功能、外泌体与疾病发生以及外泌体的应用等方面进行综述。     

外泌体在寄生性原虫与宿主相互作用中的功能研究进展

外泌体(exosomes)是由多种细胞分泌的大小均一的囊泡样小体,可携带蛋白质、脂质、核酸等生物活性成分,在细胞间物质与信息的传递中发挥重要作用.寄生性原虫可以利用多种机制产生外泌体并广泛传递其自身分子;当宿主细胞受到虫体入侵时,也会产生外泌体应对寄生虫感染.另外,寄生性原虫感染过程中虫体和宿主细胞产生的外泌体也可以参...     

生物囊泡分离鉴定方法及其在兽医学中的应用

生物囊泡是细胞产生的一种膜性小泡,内含丰富的DNA、蛋白质、脂质等生物活性物质,是细胞间重要的信息传递媒介。近年来,生物囊泡在兽医学领域的研究主要集中于外泌体或微囊泡,为抗寄生虫药物研究和某些动物疾病诊断提供了新思路。然而,生物囊泡的分离、纯化及鉴定技术仍是该领域的技术瓶颈,制约了生物囊泡进一步的应用及研究。文章归纳整理国内外相关文献,综述了生物囊泡的类型、分离纯化方法、鉴定技术及其在兽医学中的应用等,以期为生物囊泡应用于兽医临床诊疗提供参考。     

外泌体对卵泡卵母细胞及胚胎发育影响的研究进展

外泌体是一种由多种细胞分泌的直径为40～100 nm的细胞外囊泡,参与细胞间的信息传递,在卵母细胞生长发育以及胚胎发育等方面起到非常重要的作用.本文介绍了外泌体组成、提取、鉴定和功能,并对外泌体在调控卵母细胞发育与胚胎发育中的作用进行阐述,以期为外泌体的进一步研究提供参考依据.     

哺乳动物子宫腔胞外囊泡的组分及功能研究进展

胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是细胞间通讯的一种媒介,包含两个大亚类-微泡和外泌体。胞外囊泡能选择性地包裹着脂质、蛋白质、mRNAs、miRNAs以及DNA等物质,可以远距离的运输到靶细胞,通过调控靶细胞的转录、翻译等来影响细胞的功能。哺乳动物子宫腔液中含有丰富的胞外囊泡,它们对精子获能,胚胎与母体子宫间的相互识别以及胚胎附植都具有重要作用。本文主要对子宫腔液中胞外囊泡的组分及其在胚胎附植过程中的作用进行综述。     

寄生虫来源的外泌体研究进展

外泌体是体内多种细胞分泌的一种囊泡,包含蛋白质、脂质和核酸等物质,发挥信号传导、免疫调控、代谢物清除及凝血等功能。外泌体可能是细胞间信息传递的重要纽带,寄生虫与宿主间存在复杂的信息交流,寄生虫可以通过分泌外泌体将生物活性物质转移到宿主细胞中,调控宿主免疫,介导寄生虫的免疫逃逸。以外泌体作为药物载体,可以阻断寄生虫在宿主细胞内的转移或增强宿主的免疫能力,为寄生虫病的预防和治疗提供新的契机,进而打破目前化学合成药物在畜禽生产中滥用的现状,减少药物残留,提高畜产品质量安全。笔者综述了外泌体的形成、组分以及不同寄生虫来源外泌体的生物学作用,以期为畜禽养殖业中以外泌体作为研究切入点的寄生虫病的诊断和治疗奠定基础。     

外泌体在肿瘤及寄生虫病中的应用研究进展

外泌体(EVs)也称作胞外囊泡,是细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外基质中的磷脂双分子层小囊泡。1983年,研究人员在绵羊网织红细胞中首次发现外泌体,最初认为外泌体只是细胞代谢废物,但随着对其生物来源、物质构成、运输、细胞间信号传导及在体液中分布等方面深入研究,发现外泌体具有多种功能。近年来研究发现,外泌体在肿瘤早期诊断、肿瘤转移和扩散等方面都扮演重要角色,并且有可能成为新型药物载体应用在肿瘤治疗方面。随着外泌体功能和生物学特点的深入研究,这种新型药物载体技术也有可能应用到抗寄生虫病,为寄生虫病的治疗提供新思路。     

外泌体的生物学功能和调控机制研究进展

外泌体是直径30~100 nm的小囊泡,内含多种蛋白与核酸,分布与来源广泛。目前,对于外泌体的研究涉及间充质干细胞、骨细胞、癌细胞、心、肝、肺等几乎机体全部组织,外泌体在机体免疫应答、细胞迁移、细胞增殖分化、细胞凋亡、肿瘤侵袭等过程具有重要功能作用,为疾病诊治、组织修复治疗提供了新思路。外泌体主要通过内含的多种mRNA与miRNA发挥众多功能,不同来源、不同环境下其发挥作用不同。本文主要对外泌体的发生、分离纯化及功能调控机制进行综述,为选择合适的外泌体提取方法与更深入研究外泌体提供参考。     

外泌体对动物肠道健康的影响及其研究方法

在无抗养殖的大背景下, 动物的肠道健康问题愈加引起关注。肠道是机体消化吸收营养物质的主要器官, 也是防止肠道微生物侵袭的先天屏障, 肠道屏障功能的完整性对机体的正常生长发育起着至关重要的作用。外泌体是一种内源性调节物质, 可作为解决肠道健康问题的切入点。外泌体是由多种类型细胞分泌的纳米级细胞外囊泡, 其广泛分布于各种体液中, 可携带蛋白质、核酸、脂质等生物活性物质, 它们参与细胞之间的传递、细胞的迁移和增殖等进程, 在机体的生理和病理过程中发挥作用。近期研究表明, 外泌体可通过调节肠道菌群的组成、诱导小肠干细胞的增殖, 修复动物的肠道屏障功能。作者梳理了近年来外泌体对畜禽肠道健康影响及外泌体的研究方法, 为后续相关研究提供参考。     

外泌体的生物学功能及其在动物遗传育种中的应用

外泌体是一种广泛存在于多种细胞间质中的囊泡,多种细胞在正常情况下或在细胞外刺激等应激条件下都能产生外泌体,来自不同细胞类型的外泌体作用机制及功能有很大区别。外泌体可通过膜蛋白与靶细胞膜蛋白结合、膜蛋白碎片与细胞膜上受体结合、膜与靶细胞膜直接融合等方式传递生物活性分子,从而参与机体免疫、细胞分化等过程。由于外泌体具有来源天然、穿越屏障能力好、生物相容性强等特点,在许多研究领域均受到广泛的关注。作者介绍了外泌体的形态特点、形成过程、作用机制、分离纯化、生物学特性、功能及应用;总结了近年来外泌体在畜禽研究中的应用。外泌体不仅可应用于动物遗传育种中,还可作为工具或载体来研究动物体内各种生化途径。该综述可为外泌体的相关研究及应用提供参考。     

外泌体的功能及其在临床应用中的研究进展

外泌体（exosome）是通过细胞内多泡体与细胞膜融合产生的纳米级细胞外膜泡,广泛分布在血清、尿液、唾液和其他生物液体中。外泌体作为细胞间通信和遗传物质的重要转移载体,可通过受体介导的相互作用或通过各种生物活性分子（如细胞膜受体、蛋白质、mRNA和miRNA）的转移直接刺激靶细胞,从而发挥其生物学功能。文章主要综述了外泌体内含蛋白质和miRNA的功能及外泌体在临床中的应用。外泌体内蛋白质和miRNA的功能包括生理状态下诱导机体免疫、递呈抗原、参与细胞间信号传导;病理状态下改变肿瘤微环境、促进癌细胞增殖、侵袭、加快血管生成、促进癌症发展;以及某些病毒可将其组分包装、整合到外泌体中来实现细胞间传播,或劫持外泌体,实现免疫逃避。作者主要介绍了其作为肺癌、乳腺癌、胰腺癌及结直肠癌等多种癌症早期诊断的生物性标志物,以及作为稳定性高、转运效率高、靶向性强的药物载体在临床中的应用。     

Enrichment of prion protein in exosomes derived from ovine cerebral spinal fluid

Prion diseases are transmissible neurodegenerative disorders affecting humans and a wide variety of animal species including sheep and cattle. The transmissible agent, the prion, is an abnormally folded form (PrP(Sc)) of the host encoded cellular prion protein (PrP(C)). Distribution of the prion protein in the fluids of species susceptible to these diseases is of importance to human health and the iatrogenic spread of prion disease. Aside from blood which is confirmed to be a source of prion infectivity, it is currently unclear which other body fluids harbor a significant transmission risk. In the current study we examined two ovine fluids; pseudo-afferent lymph and cerebral spinal fluid (CSF), for the presence of exosomes and concurrent enrichment of the normal, cellular form of the prion protein (PrP(C)). Here we demonstrate the existence of exosomes in both pseudo-afferent lymph and CSF isolated from sheep. In the CSF derived exosomes we were able to show an enrichment of PrP(C) over unfractionated CSF. This experimental approach suggests that CSF derived exosomes could be used as a novel means of detecting abnormal forms of the prion protein and provide an in vivo link between these vesicles and prion disease pathogenesis.     

鸽毛滴虫外泌体的分离鉴定及蛋白质谱分析

旨在研究鸽毛滴虫是否分泌外泌体及虫源外泌体的蛋白组成和功能,为探索外泌体在鸽毛滴虫寄生过程中的作用奠定基础。采集鸽毛滴虫感染个体口腔及咽部病灶处样本,进行分离培养及纯化,使用显微镜鉴定虫体形态,提取DNA并比对其序列,确定培养物是否为鸽毛滴虫虫株;通过对培养液上清进行超速离心,透射电子显微镜、Western blot技术和纳米颗粒追踪分析（nanoparticle tracking analysis,NTA）鉴定培养液上清中是否含有虫源外泌体;最后通过Label-free技术分析虫源外泌体的蛋白质谱表达。结果显示,虫体具有明显的毛滴虫形态及特征,与鸽毛滴虫ITS1/5.8S/ITS2基因比对率达98%。从虫体培养液中提取的囊泡经透射电子显微镜观察具有明显的茶托样结构;NTA结果显示,粒径集中于125.1 nm,峰值粒径为132.3 nm,占比99.3%;CD63和TSG101等外泌体标记蛋白的条带明显,表明提取物为外泌体。质谱结果显示,烯醇酶、3-磷酸甘油醛-脱氢酶、磷酸甘油酸变位酶和延伸因子为表达量较高的蛋白质。GO功能注释显示外泌体蛋白富集到细胞内和胞浆等细胞组分,发挥GTP连接和GTP酶活性功能,参与小GTPase介导的信号转导与糖酵解等过程。KEGG通路富集表明,虫源外泌体蛋白主要富集于代谢途径、糖酵解/糖异生、抗生素的生物合成和次级代谢产物的生物合成等通路。本研究发现鸽毛滴虫可以分泌外泌体,并对虫源外泌体进行蛋白质谱分析,提示虫源外泌体中的蛋白质在寄生虫的能量代谢、信号转导及生物合成等过程中发挥重要作用。     

Comparative analysis of miRNAs in exosomes released by sheeppox virus-infected ovine testicular cells

Exosomes, secreted by various cells, are nanometer-scale vesicles with the functions in intercellular communication. To understand a role of exosomal miRNAs in the sheeppox virus infection, exosomes were isolated from sheeppox virus-infected sheep testicular cells 0 h, 24 h and 72 h post infection. The results of transmission electron microscopy and size distribution showed that all three exosome samples were spherical particles with negatively-stained membrane, ranging from 39 nm to 127 nm in diameter. A total of 106 known and 279 novel miRNAs were identified, and 78 known and 54 novel miRNAs were commonly detected in three exosome samples. Compared with the exosomes by the uninfected controls, a total of 34 known miRNAs were aberrantly expressed in the exosomes from infected cells. In agreement with the sequencing data, the expression of oar-miR-21 and oar-miR-10b was shown to be the highest in exosomes at 24 h after SPPV-infected, and the expression of oar-let-7f was the highest in exosomes at 72 h. Conversely, the expression of oar-let-7b and oar-miR-221 was significantly decreased 24 h and 72 h post infection compared with 0 h. The analysis results also revealed that differentially expressed miRNAs were mostly involved in an immune system process and stimulus response. These results provide rich data to further investigate a role of exosomal miRNAs in SPPV-host interactions.     

鸡胚外泌体miRNAs功能分析

旨在基于鸡胚外泌体及所含有的miRNAs解析其产生生理功效的活性物质基础及作用机制。本研究收集13胚龄惠阳胡须鸡胚蛋18枚（3组,每组6枚）,采用酶消化、蔗糖密度梯度和差速超速离心等方法分离鸡胚组织来源的外泌体,经透射电镜、纳米流式和标志蛋白流式检测等方法鉴定其特征。利用高通量测序方法研究外泌体样本中miRNAs表达谱,对各样本top 10且共表达的miRNAs进行靶基因预测与功能分析。结果表明,分别获得了3个浮力密度范围（S1：1.13 g·mL^-1、S2：1.21 g·mL^-1和S3：1.32 g·mL^-1）具有外泌体典型特征的胞外囊泡;与miRBase V21进行比对发现,S1、S2和S3样品中分别含有675、661和845个已知的miRNAs,这些miRNAs中有488个（52.6%）三者共有,包括了广泛参与细胞增殖、分化和免疫应答等过程的功能性miRNAs。TargetScan 7.2和miRDB预测得到3个样本中top 10且共表达的56个miRNAs的靶基因,获得的3 650个靶基因经DAVID分析,显著富集了24个与机体生长、发育、免疫等有关的生物学通路（P<0.05）,包括MAPK信号通路、mTOR信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路和GnRH信号通路等。本研究建立了鸡胚组织中有效分离外泌体的方法,发现鸡胚组织来源的外泌体miRNAs会影响机体生长发育和免疫调节有关的生物学通路。     

乳中生物活性肽对人体健康影响的研究进展

随着现代分离纯化、功能组学技术的快速发展,近年来国内外对乳中生物活性肽（bioactive peptides,BAP）及其生物学功能的研究取得了重要进展,越来越多的乳中BAP及其对人体健康的功效被认识和理解,BAP被认为是下一代乳品功能食品的潜在添加成分。随着未来乳品加工向着精细化、功能化方向发展,乳中BAP必将成为乳品新产品研发的宠儿。本文对近年来研究中的乳中BAP及其免疫调节、降血压、降血脂、抗氧化和抗菌等功效进行综述,旨在为进一步深入研究和开发乳中BAP产品和工艺提供参考。     

细胞外囊泡调控哺乳动物胚胎附植研究进展

细胞外囊泡（extracellular vesicles,EVs）作为一种细胞交流媒介,能够通过其携带的miRNA、蛋白质等分子作用于靶细胞/靶组织,影响靶细胞/靶组织的功能和表型。最近研究表明,来自于胚胎、子宫内膜与子宫微环境等的细胞外囊泡参与了哺乳动物胚胎附植过程,通过影响子宫内膜的容受性和滋养层细胞的黏附能力,进而保证了胚胎成功附植和胎儿生长发育。本文主要阐述了细胞外囊泡的发生、生物学功能及其在哺乳动物胚胎附植过程中的作用。