免疫佐剂的作用机制及其应用

从抗原微粒化佐剂（如不溶性铝盐胶体、免疫刺激复合物、脂质体）、缓慢释放抗原佐剂（如油乳佐剂、抗原的微型包囊）、微生物佐剂（如细菌毒素、短小棒状杆菌菌苗、分枝杆菌及其成分、肽聚糖）、分子佐剂（如细胞因子、C3d分子、共刺激分子、超抗原、热休克蛋白、CpG序列）和其他佐剂（如维生素E、硒、抗生素类、拟胸腺素药物、蜂胶、中药多糖）等几方面阐述了免疫佐剂的性质、作用机制及应用的研究现状，为免疫佐剂的临床应用和进一步研制提供了参考资料。     

大肠埃希菌不耐热肠毒素作为黏膜免疫佐剂的研究进展

免疫佐剂是一类通过刺激机体免疫系统而非特异性地增强机体对抗原免疫应答的活性物质,也是近年来研究的热点.免疫佐剂种类众多,利用细菌及其代谢产物作为黏膜免疫佐剂具有很好的发展前景,研究较多的是霍乱毒素(CT)和大肠埃希菌不耐热肠毒素(LT),从研究效果看,LT比CT更为理想.但是LT和CT一样本身具有毒性,这是其作为黏膜佐剂的主要缺点.目前,国内外研究工作者对其突变体做了大量研究,以期找到具有黏膜佐剂活性但低毒或无毒的大肠埃希菌不耐热肠毒素突变体.文章对大肠埃希菌不耐热肠毒素分子及其突变体的研究做一综述.     

Induction of interferon production in mice by delipidated whole cells and fractions of the aerobic corynebacterium, Corynebacterium catarrhalis

The i.v. or i.p. injection of delipidated whole cells of an aerobic Corynebacterium, designated as C. catarrahalis, resulted in the production of a low titre of interferon in mice. Two fractions, a particulate fraction, designated as CBA p40, and a soluble fraction, designated as CBA LS, could be isolated from the delipidated whole cells and were found to lead to the formation of more or less high interferon levels according to the route of administration. Furthermore, the CBA p40 fraction, when injected i.p., elicited the production of a maximum titre of interferon at the 24th hour (viral-like interferon).     

免疫佐剂研究进展及前景展望

本文从免疫佐剂的发现、作用机理、发展进行论述,综述了传统免疫佐剂、细胞因子佐剂、天然来源佐剂及新型免疫佐剂的类别与免疫机理,并就免疫佐剂的发展前景进行了展望。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

为筛选猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂,将5种佐剂(聚合物佐剂、矿物油佐剂ISA 201 VG、蜂胶佐剂、弗氏佐剂、铝胶佐剂)分别与3株猪丹毒丝菌株(AEr21、AEr31和AEr32)制备成15种灭活疫苗,经物理性状检验、无菌检验、安全检验合格后分别免疫小鼠,应用ELISA方法检测小鼠血清中IgG抗体水平和细胞因子含量(IL-4、IL-10、TNF-β、IFN-γ、MCP-1)。通过腹腔注射和灌胃2种方式对免疫后小鼠进行攻毒,计算免疫保护率。结果显示,5种佐剂与3株猪丹毒丝菌株制备的灭活疫苗均可刺激小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫,矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组诱导小鼠产生的IgG抗体水平和细胞因子含量最高,与铝胶佐剂、弗氏佐剂疫苗免疫组差异显著(P<0.05),与聚合物佐剂、蜂胶佐剂疫苗免疫组差异不显著(P>0.05);矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组在攻毒后的免疫保护率最高,对腹腔注射和灌胃攻毒小鼠的免疫保护率分别为80%、80%、60%和100%、100%、80%。试验结果表明,矿物油佐剂ISA 201 VG可作为猪丹毒丝菌灭活疫苗制备的候选免疫佐剂。     

余甘子多糖的结构表征及免疫增强作用

本试验旨在制备余甘子多糖（Phyllanthus emblica polysaccharide，PEP），通过对其结构表征进行分析，探索PEP对鸡新城疫（Newcastle disease，ND）疫苗免疫效果的影响。利用紫外光谱（ultraviolet spectroscopy，UV）、红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy，FT-IR）、高效液相色谱分析法（high performance liquid chromatography，HPLC）和扫描电镜（scanning electron microscope，SEM）分析PEP结构；选取175只1日龄河田鸡，随机分成5组，每组35只，分别为空白对照组，疫苗对照组，PEP低、中、高剂量组。除空白对照组外均用ND疫苗进行免疫，7日龄首免，并于28日龄二免。在免疫的同时，PEP低、中、高剂量组分别按照10、20、30 g·L^-1的剂量给药PEP溶液0.5 mL，疫苗对照组和空白对照组给予等量生理盐水，每天1次，连续3 d。分别于7、14、21、28、35、42和49日龄时，测定血清中新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）特异性抗体水平以及γ-干扰素（INF-γ）和白介素4（IL-4）的水平；于28和49日龄时测定外周血淋巴细胞增殖活性和T淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺的比值；于49日龄剖杀后采集脾、法氏囊、胸腺和肝进行组织学观察以及检测免疫器官指数。结果表明，PEP为白色棉絮状，糖含量为（86.70±1.05）%，结构分析结果表明，PEP是含α型糖苷键的多糖，其组分均一，不含核酸和蛋白质，呈片状分布，总体结构规整且致密，单糖组成为葡萄糖醛酸（glucuronic acid，GlcA）、葡萄糖（glucose，Glu）、木糖（xylose，Xyl）和岩藻糖（fucose，Fuc），其摩尔比为0.5：8.3：1.8：0.3。动物试验结果表明，PEP能显著提高鸡血清中NDV特异性抗体、INF-γ和IL-4的水平（P<0.05），还能显著促进鸡外周血淋巴细胞增殖和T淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺的比值（P<0.05），提高免疫器官指数（P<0.05），激活脾、法氏囊、胸腺和肝等器官的免疫功能。PEP糖含量高，结构稳定，可提高机体免疫活性，具有较良好的佐剂活性，对ND具有良好的防治效果。     

The Immunoregulation of Mice by Somatic Transgenic Expression of Porcine Interleukin-6 Gene and CpG Sequence

Porcine IL-6 gene and CpG sequences were used to enhance some indirect indicators of the immune response of mice. An indirect ELISA was used to quantify the amount of IgG in the sera from mice that had been inoculated with VPIL-6, a recombinant VR1020 vector into which had been inserted the porcine IL-6 gene cloned in our laboratory, or with CpG, pUC18 or VR1020. The induced bioactivity of IL-2 of lymphocytes in the spleen was assayed by the MTT method, and the proliferation of lymphocytes stimulated with ConA was tested to identify the immune response of the experimental mice. The amount of IgG in the immunized mice was significantly higher than that in the control group. Among the immunized groups, inoculation with VPIL-6 induced the highest content of IgG (p < 0.05), the greatest bioactivity of IL-2 and the greatest proliferation of lymphocytes from the spleen of the mice. These results suggest that inoculation with porcine IL-6 gene and CpG sequences may enhance the immune response of mice, and might be used as an immunoadjuvant.     

脂质体-禽巴氏杆菌荚膜抗原的免疫研究

将禽巴氏杆菌荚膜粗提物经SephadexG—200分子筛凝胶过滤层析,获得纯化荚膜抗原;然后用反相蒸发法制备脂质体-荚膜抗原(A组),并以单纯荚膜抗原(B组)、禽霍乱“731”菌苗(C组)作对照,进行免疫试验,以酶标单克隆抗体间接ELISA,分别检测IgM和IgG的效价.结果,免疫后3个组的IgM效价相差都不显著(P>0.05),A组的IgG效价明显增高,与其他两组差异非常显著(P<0.01).3个组的IgM、IgG消长规律一致,IgM于免疫后7d开始上升,峰值在14d,其后下降迅速,第8周后降至免疫前水平,IgG于免疫后14d开始明显上升,峰值在28d,其后缓慢下降.保护率,A、B、C组分别为67％、33％、33％.结果表明,脂质体对禽巴氏杆菌荚膜抗原具有明显的佐剂作用.