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以柑橘溃疡病菌特异性高的假定蛋白基因(登录号:AE008923.1)为靶标,设计并筛选4条引物来特异性识别靶标序列中的6个独立区域,建立柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法。该方法利用实时浊度仪检测反应过程中产生的焦磷酸镁白色沉淀,实现对LAMP整个反应过程的实时监控。从镁离子浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、引物浓度和反应温度5个变量参数对 LAMP检测体系进行优化,并对方法的特异性、灵敏度、稳定性及实际样品检测效果进行评价。结果显示,该体系经优化后稳定性良好,可在66 ℃ 恒温条件下,60 min内完成检测;DNA检测下限可达0.02 ng/μL,灵敏度与荧光定量PCR方法相同,比常规PCR方法高1个数量级;能快速、准确地对田间疑似样品进行检测,与荧光定量PCR方法的检出情况一致,没有漏检。结果说明柑橘溃疡病菌实时浊度LAMP检测方法操作简便、所需时间短,特异性与灵敏度高,为柑橘溃疡病菌的快速筛查提供较好的途径。 相似文献
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[目的]分析山东口岸进境矿产品植物疫情截获情况,提高矿产品有害生物疫情检出率,有效保护国门生物安全.[方法]分别从截获植物疫情变化规律、疫情类别、矿产品类型、检疫性有害生物与一般有害生物情况、来源地、不同隶属关截获情况等方面对山东口岸2008—2017年进境矿产品截获的各类疫情进行了统计分析.[结果]山东进境矿产品中截获有害生物总计54种(属),2560种次,1574批次,检疫性有害生物4种(属),29种次.进境矿产品中有害生物截获种类和种次均呈现中间多两端少的特点,以昆虫、线虫和杂草截获种类最多,占截获种类总数的87.04%,昆虫截获种次最多,占截获总种次的65.70%;有害生物的截获种类和种次均以非金属矿产截获最多,金属矿产次之;共截获4种(属)、29种次检疫性有害生物,50种(属)、2531种次一般性有害生物;截获种次前三位国家分别是朝鲜、韩国、印度尼西亚.[结论]研究结果对口岸进境矿产品疫情截获及防控提供了理论和数据支持. 相似文献
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盛夏来临,气温极高,天干地燥,怎么给花卉盆栽"喝水"呢?高温时进入半休眠状态的花卉种类:如红花酢浆草、天竺葵类、倒挂金钟、君子兰、马蹄莲、秋海棠类、景天、长寿花、仙人掌类、水晶掌、大花犀牛、翡翠珠、大弦月、瑞香、蟹爪兰、马齿苋树、芦荟等,由于气温过高,其生长活动基本停止,代谢水平很低,应减少浇水,保持盆土湿润,并注意遮荫和通风,为其创造一个相对凉爽的环境。若浇水过多,易导致植株烂根,还会严重影响其入秋后的恢复生长。 相似文献
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非洲是世界第3大竹资源分布区,竹资源量仅次于亚洲和拉丁美洲。东部非洲的埃塞俄比亚、肯尼亚等国家的竹种资源比较单一,以高地竹和低地竹为主;南部非洲的马达加斯加、中部非洲的喀麦隆和西部非洲的尼日利亚等国家竹种资源较为丰富。埃塞俄比亚、尼日利亚、喀麦隆、马达加斯加、刚果、莫桑比克、塞内加尔、加纳的竹林面积位居非洲前列。非洲竹资源加工利用主要以传统产品为主,现代加工水平不高,竹产品进出口水平有限。近年来,非洲主要竹资源分布国的竹产业战略与政策发展以及国际合作日渐活跃并取得积极进展。文章分析了非洲21个国家的竹资源及利用现状,以期为开发利用非洲竹资源提供参考。 相似文献
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松针瘿蚊隶于双翅目(Diptera),瘿蚊科(Cecidomyiidae),鞘瘿蚊属(Thecodiplosis),多危害赤松、黑松等松属植物,均以幼虫取食针叶基部组织形成虫瘿,植株受害后树势衰弱,易受到次期性病虫危害,严重影响植株正常生长。该虫原产于日本,现分布于韩国、朝鲜,中国的福建、广东、山东。松针瘿蚊成虫体型微小,在各个发育阶段形态特征变化很大。该虫一年发生一代,以老熟幼虫在林下土壤中越冬长达5~6个月,整个幼虫期都处于隐蔽状态。其飞行能力弱,幼虫和蛹依靠寄主植物或与其同苗圃的土壤调运等进行远距离传播和扩散。松针瘿蚊入侵我国后,其疫情扩散蔓延到周围省区的可能性大大增加,势必对国内松林的安全和相关产业的发展构成威胁。开展松针瘿蚊疫情调查,研究其快速鉴定方法,对及时通报疫情,防止该有害生物的进一步蔓延,减少经济损失具有重要的意义。 相似文献
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木薯细菌性萎蔫病菌的LAMP快速检测方法 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了一种木薯细菌性萎蔫病菌的环介导恒温扩增快速检测方法,为木薯细菌性萎蔫病的快速检测提供有力的技术支持。针对木薯细菌性萎蔫病菌TAL效应器蛋白质(pthBXam)靶序列的6个位点设计4条特异性引物,并对反应温度和内引物浓度等参数进行了优化,设计的引物与试验中提供的其他黄单胞近缘种都没有扩增反应,表现了较好的特异性。LAMP方法对木薯细菌性萎蔫病菌菌株DNA的检测下限为1pg/μL,比常规PCR灵敏度高100倍。该方法采用SYBR Green I染料法对扩增产物闭管检测,裸眼观察颜色变化判断反应结果,能快速、准确地对田间样品进行检测,没有出现假阳性和假阴性。与其他检测方法相比,LAMP方法检测时间短,效率高,降低了设备投入,易于操作,适合木薯细菌性萎蔫病菌的现场检疫和大规模监测。 相似文献
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