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木薯细菌性萎蔫病菌的LAMP快速检测方法
引用本文:封立平,李洪林,倪新,王简,纪瑛,甘琴华.木薯细菌性萎蔫病菌的LAMP快速检测方法[J].植物保护,2015,41(3):93-99.
作者姓名:封立平  李洪林  倪新  王简  纪瑛  甘琴华
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京100193
基金项目:转基因生物新品种培育科技重大专项(2014ZX008011-003)
摘    要:建立了一种木薯细菌性萎蔫病菌的环介导恒温扩增快速检测方法,为木薯细菌性萎蔫病的快速检测提供有力的技术支持。针对木薯细菌性萎蔫病菌TAL效应器蛋白质(pthBXam)靶序列的6个位点设计4条特异性引物,并对反应温度和内引物浓度等参数进行了优化,设计的引物与试验中提供的其他黄单胞近缘种都没有扩增反应,表现了较好的特异性。LAMP方法对木薯细菌性萎蔫病菌菌株DNA的检测下限为1pg/μL,比常规PCR灵敏度高100倍。该方法采用SYBR Green I染料法对扩增产物闭管检测,裸眼观察颜色变化判断反应结果,能快速、准确地对田间样品进行检测,没有出现假阳性和假阴性。与其他检测方法相比,LAMP方法检测时间短,效率高,降低了设备投入,易于操作,适合木薯细菌性萎蔫病菌的现场检疫和大规模监测。

关 键 词:抗草甘膦转基因大豆    Cp4-epsps    LAMP    快速检测
收稿时间:2014/12/17 0:00:00
修稿时间:2015/3/9 0:00:00

Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) for rapid detection of Xanthomonas axonopodis pv. manihotis
Feng Liping,Li Honglin,Ni Xin,Wang Jian,Ji Ying,Gan Qinhua.Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) for rapid detection of Xanthomonas axonopodis pv. manihotis[J].Plant Protection,2015,41(3):93-99.
Authors:Feng Liping  Li Honglin  Ni Xin  Wang Jian  Ji Ying  Gan Qinhua
Institution:State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:glyphosate-resistant soybean  Cp4-epsps  LAMP  rapid and simple detection
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