柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法的建立及应用

以柑橘溃疡病菌特异性高的假定蛋白基因（登录号：AE008923.1）为靶标，设计并筛选4条引物来特异性识别靶标序列中的6个独立区域，建立柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法。该方法利用实时浊度仪检测反应过程中产生的焦磷酸镁白色沉淀，实现对LAMP整个反应过程的实时监控。从镁离子浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、引物浓度和反应温度5个变量参数对 LAMP检测体系进行优化，并对方法的特异性、灵敏度、稳定性及实际样品检测效果进行评价。结果显示，该体系经优化后稳定性良好，可在66 ℃ 恒温条件下，60 min内完成检测；DNA检测下限可达0.02 ng/μL，灵敏度与荧光定量PCR方法相同，比常规PCR方法高1个数量级；能快速、准确地对田间疑似样品进行检测，与荧光定量PCR方法的检出情况一致，没有漏检。结果说明柑橘溃疡病菌实时浊度LAMP检测方法操作简便、所需时间短，特异性与灵敏度高，为柑橘溃疡病菌的快速筛查提供较好的途径。     

灌水对沙漠绿洲区甘草生长动态和产量的影响

为研究灌水对沙漠绿洲区甘草（Glycyrrhiza uralensis）生长动态和产量的效应,本研究设2 700（W1）、3 600(W2)、4 500(W3)、5 400(W4)、6 300(W5)和7 200(W6) m3/hm2 6个灌水处理。结果表明,灌水明显促进甘草茎叶、根的生长。处理W4、W5和W6株高显著高于W1、W2和W3（P<0.05）,主茎生长速度W6处理较W1快60％,较W2快33％;W3、W4、W5和W6处理地上部干质量显著高于W1（P<0.05）,干物质积累速度W3处理较W1快11％;根长、芦径、根干质量随灌水量增加而增加,灌水量超过5 400 m3/hm2则表现下降趋势,处理W3和W4根干质量最高,在根快速生长期W3和W4处理的一年龄和二年龄根干质量增加速度分别较W1快50％和35％。灌水4 500和5 400 m3/hm2,一年龄甘草和二年龄甘草根产量均达到较高水平,但前者灌水效率较后者高,可节水900 m3/hm2。     

苦参种子发芽特性研究

对苦参种子硬实的最佳破除方法、最适发芽的温度、光照条件及盐浓度对种子萌发的影响进行了研究.结果表明:98%浓硫酸处理、烫种和砂纸磋磨处理均可提高苦参种子的发芽率,其中以98%浓硫酸处理40min为最佳处理方法;25℃为苦参种子发芽的最适温度,光照条件非苦参种子萌发的必备条件;适量的NaCl(＜5 g/L)有利于提高苦参种子的发芽势和发芽率,高浓度的NaCl(＞7 g/L)则明显抑制种子萌发.     

植物病毒检测技术研究进展分析

植物病毒的危害性极大,而防治却存在一定的困难,因此我们一定要做好植物病毒的检测工作,从源头控制植物病毒。随着我国生物科学技术的迅速发展,植物病毒的检测方法不断得到改进和创新,很多新兴的植物病毒检测技术得到了很广泛的应用。本文首先探讨了植物病毒检测的基本概况,进而分别介绍了几种植物病毒检测技术的最新研究进展,最后探讨了如何提高植物病毒检测效率,更好的控制植物病毒。     

温度和光照对苦参种子萌发的影响

本试验研究了光照和温度对苦参种子萌发的影响.种子发芽试验的发芽温度分别为10、15、18、20、25、30、35℃;光照条件分别为黑暗和自然光两种条件.完全随机设计.结果表明,10℃低温下种子吸胀和发芽缓慢,随着温度的升高,其吸胀率、发芽率、发芽指数随之增高,当温度达到35 ℃时,种子霉烂率最高,但发芽率降低,其中20、25、30℃条件下,种子吸胀速度较快,发芽时间短,发芽率、发芽指数高,与其它温度相比较均达到了显著差异,苦参种子萌发的最低温度为15℃,最适温度为20-30℃,最高温度为35℃.苦参种子在黑暗和光照条件下都能萌发,但黑暗条件下其发芽率、发芽指数和活力指数较高.     

氧化苦参碱和苦参碱含量在苦参生长发育过程中的动态变化

苦参Sophora flavescens为多年生草本或灌木,其根入药.为了揭示氧化苦参碱(Oxmatrine,OMT)和苦参碱(Matrine,MT)在苦参体内代谢转化规律及两者之间的关系,为人工栽培苦参提供理论依据,运用高效液相色谱(HPLC)技术对苦参根、茎、叶、种子生长发育过程中氧化苦参碱和苦参碱含量动态变化进行了全面的研究.结果表明.根和成熟种子中氧化苦参碱和苦参碱含量最高,苦参碱主要分布在幼嫩的叶和茎中,而在成熟和衰老的叶和茎中苦参碱则转化为较为稳定的氧化苦参碱.在根和种子等贮藏器官中则主要以氧化苦参碱的形式贮存,并且根和种子中氧化苦参碱和苦参碱含量以及相同器官2种生物碱含量变化呈现互补的特点,由此推断,叶中形成的氧化苦参碱和苦参碱在向根和种子运输分配时受其生长竞争的影响,它们之间可以相互转化.     

苦参组织培养及快繁体系研究初探

采用苦参种子为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA和6-BA,进行苦参组培快繁技术研究。结果表明,采用75%乙醇8 s＋0.1%升汞8 min对苦参种子消毒后,污染率低,易获得无菌材料。MS培养基中分别添加0.1 mg/L、3.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA、3.0 mg/L 6-BA的组培苗增殖效果较好,增殖率最高可达120.2%;在1/2 MS培养基中添加0.1 mg/L的NAA,更利于苦参组培苗生根。根长1∽2 cm的无菌苗,在自然光下驯化培养5 d后移栽至蛭石基质中成活率较高。     

苦参根水浸液对玉米种子萌发和幼苗生长的影响

采用不同浓度的苦参根水浸液浸种玉米种子，研究苦参根提取物对玉米种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明，浸种处理后玉米种子的萌发及胚根和胚芽生长明显受到抑制，且随处理浓度提高抑制作用增强，但随培养时间的延长，对种子萌发的抑制减弱，适宜的浓度反而会促进植株的生长。25g／L、50g／L的苦参根水浸液能促进根系生长、植株高度增加、茎增粗以及植株生物学量的增加。     

日光温室苦参播种育苗技术

<正>苦参(Sophora flavescensAi)t为豆科槐属植物,是我国传统药用植物。苦参的根为常用中药材,有明显的抗菌、消炎、杀虫作用。除在医药上被广泛应用外,近年来又被广泛用于生物农药的开发,随着对苦参中提取的苦参碱应用研究的突破,苦参用量逐渐加大。但是苦参种子一般于10月中下旬成熟,     

木薯细菌性萎蔫病菌的LAMP快速检测方法

建立了一种木薯细菌性萎蔫病菌的环介导恒温扩增快速检测方法,为木薯细菌性萎蔫病的快速检测提供有力的技术支持。针对木薯细菌性萎蔫病菌TAL效应器蛋白质(pthBXam)靶序列的6个位点设计4条特异性引物,并对反应温度和内引物浓度等参数进行了优化,设计的引物与试验中提供的其他黄单胞近缘种都没有扩增反应,表现了较好的特异性。LAMP方法对木薯细菌性萎蔫病菌菌株DNA的检测下限为1pg/μL,比常规PCR灵敏度高100倍。该方法采用SYBR Green I染料法对扩增产物闭管检测,裸眼观察颜色变化判断反应结果,能快速、准确地对田间样品进行检测,没有出现假阳性和假阴性。与其他检测方法相比,LAMP方法检测时间短,效率高,降低了设备投入,易于操作,适合木薯细菌性萎蔫病菌的现场检疫和大规模监测。