大豆北方茎溃疡病菌荧光RAA检测方法的建立

本文根据大豆北方茎溃疡病菌与其近似种在序列上的差异,设计了特异性的引物和探针,建立了荧光RAA特异性检测方法,并用大豆上常见的病害及其近似种进行验证。结果表明:供试的菌株,只有大豆北方茎溃疡病菌表现出阳性扩增信号,其他菌株和空白对照均未检测到荧光信号,该方法可以检测到1.0×10³ mL^-1的阳性DNA,完成整个检测只需20 min左右,可以快速、灵敏的完成进出境大豆产品的大豆北方茎溃疡病菌的检测。     

一种植物病毒检测新方法—纳米上转换荧光技术

随着大豆进口量的日益增加,大豆携带病毒传入我国的风险在不断增大,高效、快速地进行植物病毒检测,防止外来有害生物入侵,是目前各口岸植物检疫工作的重点。本文介绍了一种植物病毒检测的新方法—纳米上转换荧光技术。该技术是一种利用磁性纳米颗粒(magnetic nanoparticles, MNP)进行病毒分离、富集和定位;同时引入上转换荧光(up converting phosphor, UCP)材料作为标记物的免疫检测方法,具有高度的抗干扰性、多元性、稳定性和安全性等特点。     

毛刺属线虫传毒种及其研究进展

介绍了毛刺属线虫的圆桶毛刺线虫(Trichodorus cylindricus)、原始毛刺线虫(T.primitivus)、具毒毛刺线虫(T.virulifertis)、相似毛刺线虫(T.similis)4种传毒线虫种类,综述了这4种传毒种毛刺属线虫传毒的专化性、形态学鉴定、分子生物学鉴定的研究进展,并提出了检疫部门今后的研究重点是为一线人员提供快速、精确、灵敏的检疫方法.     

分子生物学技术在松材线虫研究中的应用

根据松材线虫(Bursaphlenchus xylophilus)分子生物学的研究基础,以及基于不同的研究目的,对松材线虫不同DNA区域,包括基因组DNA、线粒体DNA、核糖体DNA和卫星DNA研究做了综述,并分析、比较一些常用的分子生物学技术在松材线虫研究中的适用性,以及在生物防治研究中的进展。     

从德国原木上截获的栎红天牛

2007年1月，湖州检验检疫局对一批来自德国的橡木原木进行检疫，撬开树皮发现木质部密布虫道，有的深入边材，截获虫蛹和老熟幼虫数头，带回实验室进行培养1周后羽化成虫。该成虫经本局植检实验室鉴定和浙江检验检疫局技术中心复核，定名为栎红天牛（Midium sanguineum（L．））。现将其成虫及幼虫的形态特征描述如下。     

玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫—实时荧光PCR检测

针对玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病这两种检疫性病菌进行酶联免疫—实时荧光PCR检测研究,对该方法进行了特异性、灵敏度以及实际样品模拟试验。结果表明,该方法具有较好的特异性,检测低限在100~200 cfu·mL-1,同时可用于实际样品的检测鉴定。     

产气荚膜梭菌α毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立

为建立产气荚膜梭菌α毒素的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,本研究以抗产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体(MAb)为捕获抗体,抗产气荚膜梭菌α毒素多克隆抗体为检测抗体,建立了检测α毒素的DAS-ELISA。通过优化反应条件,建立标准曲线;并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。采用该方法测定产气荚膜梭菌α毒素的最低检测限为0.353倍的小鼠LD_(50),可定量范围为0.353~90.368倍小鼠LD_(50)。结果表明该DAS-ELISA方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,可以用于大批量样品检测。初步应用结果显示:患产气荚膜梭菌病的兔群肠内容物中产气荚膜梭菌的α毒素水平显著高于健康兔群(p0.05)。本研究检测α毒素的DAS-ELISA建立有助于畜禽产气荚膜梭菌病的诊断及研究。     

南京毛刺线虫(Trichodorus nanjingensis)浙江群体与北京群体的形态学及分子特征比较

对采集自国内13省(市)的1 546份土壤样品进行线虫分离和鉴定,从北京和浙江2省(市)的果园、桑园、观赏性花木等多年生植物的根围土样中分离到23个南京毛刺线虫群体,其中北京群体检出率占北京样品采集总量的39.1%,表明南京毛刺线虫是北京市多年生植物根围寄生线虫优势种;通过对浙江群体与北京群体的形态及测量值比较,发现不同地理群体间的形态测量值差异很小,但北京美人梅(代码129)群体的2条雄虫和水栒子(代码088)群体的1条雄虫仅具1枚腹中颈乳突;各群体18SRNA区扩增序列与GenBank登录序列AJ439579和AJ439580的相似百分比达到99.2%～100.0%;对上述南京毛刺线虫群体rDNA ITS1区、ITS2区和28SRNA基因中D2D3区序列比较和酶切分析显示,该3段序列在南京毛刺线虫种内群体间都较为保守。     

激素对黑松愈伤组织褐变和增殖的作用

用成熟胚接种于 1 2MS +2 ,4 -D10 .0mg L +KT4 .0mg L +6 -BA4 .0mg L的培养基中 ,在 2 7± 1℃黑暗条件下诱导 ,成功地诱导出黑松和马尾松的愈伤组织 ,且诱导率分别高达 89%和 90 %。附加激素对黑松愈伤组织褐变和增殖作用研究的结果表明 ,在原有培养基[8] 的基础上 ,附加GA30 .2mg L能促进愈伤组织的生长 ,而附加0 .6mg L或 1.0mg L的GA3能明显改善褐变程度 ;加入LH能提高愈伤组织的增殖倍数 ,且当加入LH 10 0mg L或5 0 0mg L时 ,可降低褐变指数 ;加入 6 -BA既不能降低褐变度 ,也不能提高增殖率 ;2 ,4 -D用量为 1.0mg L时 ,褐变指数为 0 ,这是所试培养基配方中最低的 ,且其增殖倍数在该组试验中最高。结合褐变指数和增殖倍数两项指标 ,培养基组成以 1 2MS +NAA 0 .5mg L +IBA 0 .1mg L +GA31.0mg L +LH 10 0mg L +2 ,4 -D 1.0mg L最佳。使用该配方继代 6代诱导出的黑松愈伤组织没有明显褐变 ,10d增殖倍数保持在 1.5以上     

松材线虫入侵对不同类型松林群落演替的影响

对马尾松和黑松纯林及混交林不同类型森林生态系统的植物分层情况、种类丰富度、个体数量、多样性指数、均匀度指数、生态优势度及重要值进行了调查和分析.结果表明:内陆型生境中,无论是马尾松纯林还是马尾松混交林群落,被松材线虫危害后,乔木层植物的种类及植物多样性均有较大程度的增加,原有森林群落并未向灌丛方向退化,反而比危害前生物多样性指数有较大的增加.危害后的黑松混交林群落比纯林的生物多样性指数大,种类丰富度及个体数量均增大.无论是纯林还是混交林,马尾松林乔木层植物的种类丰富度、生物多样性均大于黑松林,种类组成及空间分布更趋合理.