测定苏云金杆菌制剂伴孢晶体蛋白指示毒力效价的方法

用ELISA间接法定量测定Bt产品中伴孢晶体蛋白含量,来指示样品毒力效价的程序和方法,结果表明ELISA技术可用于Bt制剂产品质量的常规检测。     

酶联免疫吸附测定(ELISA)检测苏云金杆菌伴孢晶体蛋白质研究

用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Bt伴孢晶体毒素蛋白质,最低可检值7.79ng/0.15ml,灵敏、精确,具高度专化性。测定标准品HI—1—S—1980和Bt乳剂产品中伴孢晶体蛋白质含量,分别为108.06mg/g粉剂和4.57—6.17mg/ml乳剂。用标准品与待测样品(Bt乳剂)的晶体蛋白质含量,就可计算出待测样品的相对毒力效价。ELISA与昆虫生测之间有良好的相关性。     

苏云金芽孢杆菌抗蝗虫生物测定模式建立

在人工饲养条件下,研究了蝗虫种群的消长规律与环境因子的关系。结果表明,蝗虫每雌可产卵3～10块,每块达55.0粒,孵化率为76.32%,蝗蝻雌雄比为1.5～2∶1。建立了以蝗虫为试虫,苏云金芽孢杆菌的毒力生物测定模式。选择的最佳生测条件与蝗蝻的最适生长条件一致,温度30±1℃,湿度65%～75%,500～600lx光照14～15h。同时分析了蝗虫的饲料选择及各种环境因子对生测结果的影响。     

苏云金杆菌制剂标准化及毒力效价测定——Ⅰ.用菜粉蝶幼虫测定苏云金杆菌毒效

以室内人工饲养的菜粉蝶幼虫为供试虫,用微量点滴定量感染方法,测定苏云金杆菌制剂的毒力效价,结果较为精确,重复性好,操作简便,完成一次测定只需时2天,标准差14.88％。本文为第一部,介绍生测程序、感染方法和5批测定结果。     

1株广谱苏云金芽孢杆菌及其发酵条件的研究

从土壤中分离出几株广谱杀鳞翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌。其中杀虫效果最好的1株C-33血清型为H5，产生近方形和菱形的伴孢晶体，含有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1C基因，产生144kDa和77kDa的晶体蛋白质。毒力生物测定证明C-33对棉铃虫及甜菜夜蛾有高毒力。对该天然广谱Bt菌株C-33进行了摇瓶发酵和小试发酵试验，结果表明其发酵性能良好。通过2L全自动罐发酵试验，优化了发酵培养基和发酵条件，发酵效价达到3400～3700IU／μl(棉铃虫)。