测定苏云金杆菌制剂伴孢晶体蛋白指示毒力效价的方法

用ELISA间接法定量测定Bt产品中伴孢晶体蛋白含量,来指示样品毒力效价的程序和方法,结果表明ELISA技术可用于Bt制剂产品质量的常规检测。     

酶联免疫吸附测定法测定四种苏云金杆菌菌株的晶体蛋白含量

用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定苏云金杆菌81—6的晶体蛋白含量,结果表明:严格控制实验条件,ELISA法测定具有良好的重复性。用ELISA法测定苏云金杆菌四个菌株的纯晶体蛋白和相应的孢晶混合物,通过回归方程可求出各个孢晶混合物中的晶体蛋白含量。HD—1和7216的ELISA法测定结果与用小菜蛾进行生测的LD_(50)值比较,证明ELISA法测定样品晶体蛋白含量的高低基本反映该样品毒力大小。     

紫外线对Bt伴孢晶体的损伤和腐植酸的保护作用

用SDS-PAGE电泳分析和生物测定等方法研究了紫外线对苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）伴孢晶体的损伤及腐植酸对Bt伴孢晶体的保护作用。结果表明，紫外线对Bt伴孢晶体有明显的损伤，伴孢晶体紫外线辐射3h后溶解性能及生物活性基本丧失。腐植酸对紫外线有较强的吸收作用，能有效地减轻紫外线对Bt伴孢晶体的损伤。     

Bt乳剂防治绿豆贮藏期害虫

笔者1984—1986年,连续3年20余点次,用Bt乳剂、“7216”、“82—6(1)—2”3种苏云金杆菌制剂处理绿豆1000公斤,防治绿豆象效果较好。 Bt乳剂(湖北农科院植保所提供)为褐色粘稠液体,含菌12O亿/ml。“7216”和“82— 6(1)—2”(均为湖北生防站提供)含菌100亿/克,细度100目,含水4％左右,灰白色粉剂。3种菌剂均是1984年产。供试绿豆处理前无虫蛀或虫蛀7—10％,发芽率79—     

复方苦部微乳剂指纹图谱的建立及其活性成分含量测定

建立了高效液相色谱(HPLC)测定复方苦部微乳剂指纹图谱和微乳剂中苦参碱及氧化苦参碱含量的方法。样品经85℃水浴去除溶剂后,用0.5%的硫酸溶液溶解、静置后过滤;滤液用浓氨水调节p H至10~11,用氯仿萃取;有机相脱溶,残渣用乙醇溶解。采用Reprosil-par120-NH2色谱柱,流动相为V(乙腈)∶V(无水乙醇)∶V(3%磷酸溶液)=87∶7∶6,检测波长220 nm,柱温30℃,对微乳剂样品进行分离;运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版)软件对10个不同批次的复方微乳剂图谱进行相似度评价和数据处理,以中位数法生成复方微乳剂对照指纹图谱;采用标准品对照法对其峰归属进行分析,结合外标法测定微乳剂中苦参碱和氧化苦参碱的含量。结果表明:10个批次微乳剂样品图谱的相似度均大于0.90,从中分离得到7个共有指纹峰,指认其中两个色谱峰分别为苦参碱和氧化苦参碱。苦参碱在3.63~58.0μg/m L(r=0.999 1)、氧化苦参碱在4.50~72.0μg/m L(r=0.999 0)范围内呈良好的线性关系,在10、20和50 mg/L 3个添加水平下,两者的添加回收率分别为98%~99%(RSD为0.77%~2.6%,n=9)和96%~99%(RSD为1.0%~2.0%,n=9),微乳剂中两者的检出限(LOD)分别为0.201和0.225 mg/L,定量限(LOQ)分别为0.671和0.750 mg/L;10个批次微乳剂样品中苦参碱、氧化苦参碱的平均含量分别为57.07和43.55 mg/L。所建立的HPLC指纹图谱特征性强、信息量大,对复方苦部微乳剂有较好的专属性;建立的HPLC检测方法操作简便、准确度高、重现性好;两者联用能全面有效地控制复方苦部微乳剂质量。     

提高Bt乳剂杀虫效果的经验

Bt乳剂(湖北农科院微生物厂,活孢子含量120亿个/ml)200、250、300倍,二代棉铃虫卵盛期施药,亩喷稀释药液50公斤。1987-1988年在肥乡、临漳、曲周、成安4县进行Bt乳剂防治二代棉铃虫和控制伏蚜的试验。 生产示范,每县示范点面积30亩,Bt乳     

苏云金素对昆虫细胞株的毒力试验

苏云金杆菌伴孢晶体毒素对昆虫细胞株的毒性以及用昆虫细胞株测定伴孢晶体毒素的含量,国内外都发表了一些研究报告,并有所进展。然而,苏云金素对昆虫细胞株的毒性尚未见这方面的报告,本文将简报这一研究结果。     

AcNPV·Bt·En复配剂对甜菜夜蛾幼虫的毒力测定

甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)是一类严重危害多种蔬菜的农业害虫,苏云金芽孢杆菌(Bt)作为害虫微生物防治的主角之一,已广泛应用于农林害虫的生物防治.Bt杀虫剂在田间防治甜菜夜蛾初孵幼虫中显示出良好的杀虫效果,但仍然显示出单剂的缺陷,如残效期短、对大龄幼虫不敏感.苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)是一种宿主范围较广的昆虫杆状病毒,能感染30多种鳞翅目昆虫,并对甜菜夜蛾有较好的感染致死力.将Bt与AcNPV混用,可充分利用二者的优势.增效蛋白是由某些病毒基因编码的一类金属蛋白酶,具有酯酶活性.纯化的天然增效蛋白在体外能促进NPV对昆虫离体细胞系的感染,能显著提高NPV对昆虫的感染效果,并可增强苏云金杆菌伴孢晶体对幼虫的毒力.本文首次报道基因工程增效蛋白(En)与AcNPV·Bt科学复配使用对甜菜夜蛾的室内毒力测定结果,目的在于寻求甜菜夜蛾综合治理的新途径.     

酶联免疫吸附测定法检测青虫菌工业产品中晶体蛋白的含量

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)的研究和应用在国内有很大进展。用于生物防治的青虫菌(B.t.subsp.galleriae)已进入工业化生产,其产品中伴孢晶体蛋白含量的检测方法在探索中。酶联免疫吸附测定法(ELISA),作为一项新兴的免疫化学技术,具有灵敏、精确、迅速的特点,已被用于苏云金杆菌晶体蛋的测定。     

苏云金杆菌“HD—1”防治番茄田棉铃虫

番茄是我国北方的主要夏、秋蔬菜之一,栽培面积大,近年来受棉铃虫为害日趋加重,轻则造成孔洞畸形,重则发霉腐烂,有的蛀果率高达25％以上;严重影响番茄品质和产量。1985—1986年我们用“HD—1”乳剂,分别在保定,邯郸郊区进行防治试验,结果如下: 一、供试药剂 Bt乳剂和复方Bt乳剂(含菊脂0.2％)为湖北省农科院微生物实验工厂     

四株对小地老虎有活性的苏云金芽胞杆菌的毒力评价

本文对4株苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis（Bt）的杀虫基因类型、杀虫蛋白表达类型、蛋白表达量以及杀虫活性进行了初步的评价分析。菌株PS9-D12和PS9-C12的基因类型与蛋白表达类型丰富,且其杀虫蛋白表达量是对照菌株HD-1的1.7倍。在相同培养条件下,制备菌株胞晶混合冻干粉对小地老虎Agrotis ypsilon的生测结果显示,菌株HD-1、PS9-D12、PS9-C12、PS9-D11和PS9-H9的LC50分别为0.71、0.19、0.14、0.24和1.16 mg·g^-1,菌株PS9-D12和PS9-C12的杀虫活性显著高于菌株HD-1（P〈0.05）;此4株菌株对小菜蛾Plutella xylostella幼虫的校正死亡率均大于78%,它们对甜菜夜蛾Spodoptera exigua幼虫的活性均高于菌株HD-1;而对大猿叶甲Colaphellus bowringi幼虫均无活性。可见菌株PS9-D12和PS9-C12比商业化生产的HD-1有更好的杀虫活性,可作为Bt杀虫剂的候选材料。     

播前施用氟乐灵对棉花苗期病害及蕾期枯萎病的影响

田间试验在棉花苗病和枯萎病常年发病田进行。以１７５ｍｌ４８％氟乐灵乳油／６６６．７ｍ＾２的剂量处理苗床地表土，播种棉籽后以含氟乐灵（１．０－１．５ｍｇ有效成分／ｋｇ土）的土壤覆盖。以清水处理为对照，。结果表明Ｌ氟乐灵处理组的出苗率高于对照，苗前残废对比照降低，５２．９１％－７９．８０％。处理组苗床期立枯病和侄蛱贩发病率及死苗率显著降低，分别下降３０％和４２％左右；棉苗枯萎病的发病率及病情指明显低于     

An effective strain ofBacillus thuringiensis against fourth-instar caterpillars ofBoarmia selenaria

A strain ofBacillus thuringiensis Berliner effective against fourth-instarBoarmk selenaria Schiffermüller (Lepidoptera: Geometridae) was found. Strain HD-251 of the varietykurstaki H-serotype 3a, 3b was more effective than the standard HD-1-S-1980 in laboratory bioassays. The potency of HD-251 is two to four times higher than that of the standard, and varies from 19,821 to 68,645 IU/mg. Two other strains of the varietyaizawai H-serotype 7,viz., HD-249 and T63L4, were inferior to HD-251, with potencies of 6,982 and 13,714 IU/mg, respectively, against first-instar larvae.     

苏芸金杆菌HD-1防治小菜蛾的研究

应用苏芸金杆菌 HD-1制剂,进行防治小菜蛾(Plutella xylostella L.)技术方法的研究,求出了 HD-1制剂对小菜蛾2、3、4龄幼虫杀虫曲线的回归直线方程分别为 y=8.18+2x,y=7.92+2x,y=6.93+2.1x。田间试验结果说明:每亩应用 HD-1制剂0.1～0.15公斤加水75～100公斤,防治小菜蛾效果达90%,高于常用化学农药,防治费用在0.3元左右,低于常用化学农药。HD-1制剂对天敌昆虫、蜘蛛等无不良影响。     

苏云金杆菌无芽孢突变菌株的选育

采用亚硝基胍、紫外线等处理苏云金杆菌HD-1和7216菌株,获得8663,8714、87085 3株无芽孢突变菌株。分别进行摇瓶试验,并将8663进行7吨发酵罐试验,证明该菌株的发酵性能与原出发菌株基本相当。采用B(?)制剂标准化的程序进行生物测定,效价基本稳定。     

苏云金杆菌芽孢与晶体不同配比对亚洲玉米螟的毒效

苏云金杆菌3个变种的芽孢与晶体按重量百分比混合,以亚洲玉米螟1龄和2龄幼虫测定毒力。对1龄幼虫主要致病因素是晶体。对2龄幼虫,“HD—1”以晶体为主;SB—14菌株当芽孢与晶体1:1时,杀虫效果最好;E743—4菌株以芽孢为主。     

防治地老虎杀卵兼治初龄幼虫的试验

两年来室内和試驗場試驗証实:有机磷杀虫剂如1605及敌百虫等能兼治小地老虎和黄地老虎的卵和初龄幼虫;有机氯杀虫剂如DDT及666等对卵几乎无效,但对初龄幼虫效果頁好。两类药剂混用杀卵效果提高。大田試驗用50％敌百虫乳剂1份、25％DDT乳剂1份、水600份,在卵孵化率为28.6—95.0％时亩施混合液50公斤,防治效果良好;防治适期比药杀初龄幼虫可提早十天左右,大大緩和了时間紧张的矛盾。     

用小菜蛾测定苏云金杆菌毒力的感染方法

用两种感染方法,以3龄小菜蛾作供试虫,美国标准品HD—1—1980作对照的生物测定法,对H_3和H_5两菌株粉剂的毒力效价进行了比较测定,提出了检定该类制剂毒力适用和可靠的方法及其测定程序。     

Biological Control of Botrytis cinerea in Cyclamen with Ulocladium atrum and Gliocladium roseum Under Commercial Growing Conditions

ABSTRACT The effect of treatments with conidial suspensions of Ulocladium atrum and Gliocladium roseum on leaf rot of cyclamen caused by Botrytis cinerea was investigated under commercial greenhouse conditions. Spraying U. atrum (1 x 10(6) conidia per ml) or G. roseum (2 x 10(6) conidia per ml and 1 x 10(7) conidia per ml) at intervals of 2 to 3 weeks during the production period and spraying U. atrum (1 x 10(6) conidia per ml) at intervals of 4 to 6 weeks resulted in a significant reduction of natural infections of petioles by B. cinerea. U. atrum or G. roseum (1 x 10(7)conidia per ml) was as effective as the standard fungicide program. B. cinerea colonized senesced leaves within the plant canopy and infected adjacent petioles and leaves later. The antagonists colonized senesced leaves and reduced B. cinerea development on these leaves. Thus, the inoculum potential on petioles adjacent to necrotic leaf tissues was reduced. The fate of U. atrum conidia on surfaces of green cyclamen leaves during a 70-day period after application was studied. The number of conidia per square centimeter of leaf surface remained relatively constant during the entire experiment. Sixty percent of the conidia sampled during the experiments retained the ability to germinate. When green leaves were removed from the plants to induce senescence and subsequently were incubated in a moist chamber, U. atrum colonized the dead leaves. Senesced leaves also were colonized by other naturally occurring fungi including B. cinerea. On leaves treated with U. atrum from all sampling dates, sporulation of B. cinerea was significantly less as compared with the untreated control. Our results indicate that early applications of U. atrum before canopy closure may be sufficient to achieve commercially satisfactory control of Botrytis leaf rot in cyclamen.