抗猪细小病毒单克隆抗体的制备

为了建立一种快速准确的猪细小病毒(PPV)病诊断体系,本研究制备了抗PPV的单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株.将PPV免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用ELISA方法筛选,得到8株分泌抗PPV MAb细胞株,这8株MAb亚类均为IgG1,轻链均为κ型.交叉实验等特异性分析发现这些MAb只特异地与PPV发生反应,而不与猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)等发生交叉反应.将杂交瘤细胞注射BALB/c小鼠制备的腹水抗体效价介于1:2 560～1:20 480之间.Western blot结果显示,8株MAb中2株针对VP1发生反应,5株针对VP2、VP3发生反应,但其中有1株呈阴性反应,该MAb可能识别的是PPV的构象表位.     

猪细小病毒灭活疫苗安全性试验及佐剂的筛选

本研究以猪细小病毒(PPV)现地分离株(BQ)第30代细胞培养毒株作为灭活疫苗研究用种毒,通过优化病毒增殖条件和培养方法,获得较高滴度的病毒传代细胞培养物用于PPV灭活疫苗的制备.PPV细胞培养毒株分别用甲醛和β-丙内酯进行灭活,对2种灭活剂灭活的病毒液分别用国产铝胶佐剂、进口矿物质白油佐剂以及法国赛比克公司的MONTANIDETM ISA 206、ISA15AVG、IMS251CVG 3种佐剂制备10种灭活疫苗,然后分别进行10日龄乳鼠、60日龄仔猪、不同妊娠阶段母猪的安全性试验及成年豚鼠的免疫效果对比试验.通过比较不同灭活疫苗的安全性和对成年豚鼠的免疫效果,初步确认甲醛灭活的病毒液与佐剂ISA15AVG的组合为PPV灭活疫苗的最佳灭活剂和佐剂组合.     

动物检疫监督员如何应对职业危机

动物检疫监督员肩负着动物及动物产品检疫监督、重大动物疫情防控、动物防疫违法案件处理处罚等神圣职责,长期以来默默无闻地奋战在这一特殊的战线,为我国动物疫病防控和动物源性产品安全保障工作做出了突出贡献,但是受社会生活变化、个人因素以及工作压力的影响,检     

动物产地检疫工作有了新依据——看新旧产地检疫规程和规范的异同

<正>动物产地检疫作为动物疫病防控的重要组成部分是预防、控制和扑灭动物疫病,促进养殖业发展,保护人民身体健康,维护公共卫生安全的重要手段。为了规范动物产地检疫工作,推进产地检疫工作的规范化、系统化和科学化发展,农业部于2010     

动物产地检疫工作有了新依据——看新旧产地检疫规程和规范的异同

改革开放以来,我国畜牧业得到了迅速的发展。随着养殖规模的集约化程度的不断提高,动物和动物产品流通不断增多,疫病防控已成为保障畜牧业持续健康发展的重要因素之一。动物产地检疫作为动物疫病防控的重要组成部分,是预防、控制和扑灭动物疫病,促进养殖业发展,保护人民身体健康,维护公共卫生安全的重要手段。     

“瘦肉精”免疫胶体金试纸条的结构原理和使用注意事项

央视3.15特别节目《健美猪真相》节目播出以后,各地普遍加强了对瘦肉精的查验力度。瘦肉精免疫胶体金试纸条作为一种方便、快速且适于现场操作的检测方法,在广大基层检测单位得到了广泛应用。为了提高广大基层检测人员对免疫胶体金试纸条检测方法的了解,本文拟对免疫胶体金试纸条结构、原理和在其使用过程中的注意事项进行阐述,以期能够对瘦肉精的检测工作起到帮助作用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒反转录环媒恒温检测方法的建立

本研究利用PrimerExplorer V4软件设计了针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N基因保守区6个特异性部位的4种引物,建立了PRRSV的反转录环媒恒温检测方法.利用该方法所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,而且猪细小病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和健康猪睾丸细胞的扩增结果均为阴性.本方法对PRRSV的最低检出量为1 ×100个～1×101个基因拷贝.反转录环媒恒温检测方法和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为96.2%.该方法为现地开展猪繁殖与呼吸综合征的快速诊断和综合防治方案的提出提供了有力的诊断工具.     

猪细小病毒细胞适应株的培育及鉴定

从临床表现为皮炎消瘦症状的仔猪肝脏中分离到1株病毒,经聚合酶链式反应（PCR）证实为猪细小病毒（PPV）,采用仔猪原代肾细胞和传代ST细胞分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育1株ST传代细胞培养适应毒株,命名为PPV-BQ2007株。免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）检测病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质内。病毒感染细胞可被已知PPV阳性血清中和。免疫电镜可清晰见到聚集成团的大小不一的病毒粒子,近似圆形,无囊膜,直径大小约20nm-22nm。该分离株经ST细胞培养传代,能够产生典型的细胞病变,病毒滴度随代次显著增加,第30代后毒价达10^7 TCID50/mL以上,且毒价和血凝价稳定。测序结果表明PPV-BQ2007株VP2基因与NCBI公布的皮炎型毒株Kresse株的同源性最高,达99.8％,在系统进化分支上处于同一个分支。PPV-BQ2007株传代细胞培养适应株的成功培育和鉴定,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫与诊断研究等奠定了良好基础。