牛附红细胞体单管套式PCR检测方法的建立

为快速、准确地检测出牛附红细胞体,根据GenBank上发表的牛温氏附红细胞体(Mycoplasma wenyonii)l6S rRNA基因序列(登录号AF016546)设计合成内外2对引物,建立了牛附红细胞体单管套式PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性及应用试验。结果:建立的牛附红细胞体单管套式PCR检测方法扩增的片段大小为361 bp,与GenBank中相应序列同源性为98%,该方法扩增不出牛瑟氏泰勒虫、新孢子虫、布氏杆菌及牛无乳链球菌等基因片段,检测出标准模板DNA的最小量为1.22 fgμ/L。通过对吉林省延边地区66份血液样本的临床检测显示,单管套式PCR检出率28.8%,高于常规PCR的21.2%和鲜血压片镜检的12.1%,具有准确、特异、敏感等优点,是检测牛附红细胞体的一种新型、可靠的诊断技术。     

东北三省部分地区猪附红细胞体16S rRNA核苷酸序列比较分析

为了解东北三省猪附红细胞体基因的流行变异情况,本试验选取相对保守的16S rRNA核苷酸序列作为分析对象,采用酚仿抽提法提取吉林株、辽宁株和黑龙江株猪附红细胞体基因组DNA,用一对特异性引物扩增目的DNA,然后分别与pMD-18T载体连接并转化BL-21菌株,经重组质粒PCR鉴定后并测序,比较其核苷酸序列。从同源性分析结果可以看出,黑龙江株、辽宁株与广东株猪附红细胞体核苷酸同源性最高,均达到100%;吉林株与美国株猪附红细胞体的核苷酸同源性最高,为97%。系统进化分析结果显示,黑龙江株与辽宁株猪附红细胞体亲缘关系最近,而与吉林株猪附红细胞体较远。结果表明,吉林株、辽宁株和黑龙江株猪附红细胞体16S rRNA基因序列存在差异。     

拍卖交易对我国农产品流通的作用

我国农产品种植规模小、层次低以及农产品的易损耗性决定了农产品流通体系的重要性。拍卖交易方式具有提升交易效率、价格发现、促进农产品标准化建设和现代化建设的作用,从而加速农产品的流通。我国已经初步具备了实现农产品拍卖交易模式的基础条件,发展前景十分看好。     

国际田间试验机械化协会简介

战后,随着世界人口的增长和对粮食数量和质量需求的不断提高,一些国家和地区已经认识到专门的田间试验机具及相关的实验室设备对其研究进程的影响,并将田间试验机械化作业作为农业科研手段现代化的重要内容。菲律宾国际水稻研究所和墨西哥国际玉米小麦改良中心都设有自己的农业科研机具车间,一些先进国家专门生产试验机具的厂家也陆续出现,规模较大的有奥地利的Wintersteiger公司和联邦德国的黑格(Hege)公司等。由于试验机具及相关实验室设备除了具有科研工作特殊用途外,还要满足精     

国际田间试验机械化协会的出版物

欲卓有成效地开展农业科研工作,促进科研手段现代化是一个重要的环节,这已被各国农业科学家所认识,并成为他们制订农业科研发展战略的组成部分。与生产不同,小区试验和试验室工作需采用专门的机具和设备,产品市场的特殊性在于生产厂家较少、用户遍及世界各地。国际田间试验机械化协会(The International Association onMechaniztion of Field Experiment,     

农产品价格炒作形成原因及预防措施研究

农产品作为居民基本生活必需品,关系到千家万户的利益。我国农产品价格长期保持在低位运行,因此从2009年下半年开始的农产品价格过快上涨引起了各界的普遍关注,对于农产品价格炒作及预防措施的研究也已经提上了议事日程。运用了分品种价格对比方法,报告了农产品价格过快上涨的现状,指出农产品市场存在价格炒作,对农产品价格炒作的形成原...     

猪附红细胞体SRP54基因的克隆及表达质粒的构建

根据GenBank上发表的猪附红细胞体全基因组序列(登录号:NC_015153.1),针对其中的信号识别颗粒(SRP)基因设计合成一对特异性引物,应用PCR方法扩增猪附红细胞体信号识别颗粒54 (SRP54)基因片段,克隆至pMD18-T simple载体上,经PCR、酶切初步鉴定正确后进行测序,对所克隆片段进行生物信...     

牛附红细胞体LAMP检测方法的建立

为建立一种快捷、灵敏的牛附红细胞体检测方法,本研究根据GenBank上发表的16S rRNA基因(登录号:AF016546)序列设计合成2对LAMP特异引物,建立了检测牛附红细胞体环介导等温扩增(LAMP)方法,并优化了LAMP的各反应条件,进行了敏感性和特异性试验。LAMP扩增产物经电泳、显色鉴定。结果显示,LAMP方法扩增牛附红细胞体产物呈特征性梯状条带,显色反应呈现绿色荧光;敏感性检测最低浓度为25.6 fg/μL;特异性试验结果显示,牛附红细胞体检测管显色后呈阳性,而猪附红细胞体、牛新孢子虫、弓形虫及牛瑟氏泰勒虫等对照组均呈阴性,说明本研究建立的LAMP方法具有灵敏、特异、快速等优点,适合于牛附红细胞体的检测。     

猪附红细胞体巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

为建立一种更加准确、敏感的猪附红细胞体检测方法,本试验根据猪附红细胞体特异的DNA序列(AJ504999)设计2对巢式PCR引物,建立了巢式PCR检测方法。筛选该检测方法的最佳反应条件,并进行了特异性、敏感性及临床样本检测试验。结果表明,建立的巢式PCR对猪附红细胞体基因组DNA能扩增出特异性片段,而对弓形虫、链球菌、牛瑟氏泰勒虫、牛附红细胞体基因组DNA扩增反应结果均为阴性;DNA最低检测量为0.124 fg/μL;通过对55份临床样本的检测,该巢式PCR较常规PCR的阳性检出率高23.7%。本试验为猪附红细胞体病的诊断提供了一种更为特异、敏感的检测技术。