鸡Ii基因的克隆、鉴定及其原核表达

从ConA诱导的5周龄SPF鸡脾细胞中提取总RNA,用自行设计的一对引物通过RT—PCR方法扩增出鸡恒定链(invariant chain,Ii)基因片段。经酶切鉴定后,再将该片段克隆到pcDNA3载体中,测定其DNA序列,结果表明该片段长度为669bp,其DNA序列与GenBank登录的基本一致。再将该片段插入原核表达载体PGEX-4T-1,并导入菌株BL21,经诱导培养、蛋白提取和SDS—PAGE,获得分子量约为50kD的特定蛋白条带,表明所克隆的鸡Ii基因在原核细胞中得到表达。     

饲喂发酵芝麻粕对肉鸭生长性能、血液生化指标和肉风味的影响

【目的】研究发酵芝麻粕对肉鸭生长性能、血液生化指标和肉风味的影响。【方法】试验选用1 日龄樱桃谷SM3雏鸭2 520只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复126只,分别饲喂玉米豆粕型基础日粮（对照组）,以及用芝麻粕、干发酵芝麻粕和湿发酵芝麻粕（按风干物质计）等比例替代基础日粮中4.2%(质量分数)豆粕的日粮。试验期40 d,分为前期（1~15 d）和后期（16~40 d） 2个阶段。试验结束时进行屠宰性能、血液常规指标、血清免疫指标以及肌肉肌苷酸和氨基酸测定。【结果】试验前期,湿发酵芝麻粕组肉鸭日增体质量显著高于芝麻粕组（P<0.05）和极显著高于干发酵芝麻粕组（P<0.01）,与对照组差异不显著（P>0.05）;试验后期以及全程,各组肉鸭日增体质量、日采食量、料体质量比和死淘率差异均不显著（P>0.05）。湿发酵芝麻粕组肉鸭的全净膛率较芝麻粕组显著提高,而其他各组间差异不显著（P>0.05）。与对照组相比,湿发酵芝麻粕组血液中总蛋白质量浓度和血钙浓度显著提高（P<0.05）,各组IgG、IgA和IgM质量浓度差异不显著（P>0.05）。干发酵芝麻粕组肌苷酸含量显著高于对照组（P<0.05）,其他各组间差异不显著（P>0.05）。湿发酵芝麻粕组肌肉中部分氨基酸含量极显著高于对照组（P<0.01）。【结论】芝麻粕发酵后不烘干饲喂的效果优于烘干。湿发酵芝麻粕可以部分替代日粮中的豆粕,对肉鸭生长性能无显著影响,且能增加血液中总蛋白和钙含量,提高肉鸭屠宰性能,改善鸭肉风味。     

黄芪多糖对犬淋巴细胞转化影响的实验研究

将犬平均分成3组,第Ⅰ组:口服给药,1ml/kg,1次/d,仅用1d;第Ⅱ组:口服给药,1ml/kg,1次/d,连用5d。第Ⅲ组:口服给药,1ml/kg,1次/d,连用10d。在用药后第5d、10d、20d进行3次检测。通过淋巴细胞体外培养,经形态学检查,检测200个淋巴细胞中的转化比率,结果表明试验组淋巴细胞转化率比对照组的显著提高(P<0.01)。     

日粮蛋白水平对圩猪生长性能、肉质和血清生化指标的影响

【目的】探讨不同蛋白水平日粮对圩猪生长性能、肉质和血清生化指标的影响,确定圩猪适宜的蛋白质营养水平。【方法】选用平均体质量约为35kg的健康圩猪24头,按照公母比例1∶1的原则随机分为3个处理组,每组8个重复,采用种猪自动饲喂系统饲喂,耗料和体质量实时自动记录。试验期共分为2个阶段(生长期:35~60kg;肥育期:60~80kg)饲养,1,2,3组生长期粗蛋白水平分别为180,160和140g/kg,肥育期粗蛋白水平分别为160,140和120g/kg。3个处理组除粗蛋白水平不同外,其他营养水平基本一致。试验结束时,对全部试猪前腔静脉采血以进行血液生化指标与部分内分泌激素浓度的测定,同时每组选取4头体质量相近的公猪屠宰,测定其屠宰性能和肉质。【结果】在育肥阶段,日粮中粗蛋白含量最少的试验3组料体质量比极显著高于1组和2组(P<0.01)。除屠宰后24h肉样的pH值和亮度(L)值外,各组间肉质性状差异均不显著(P>0.05),1组屠宰后24h的pH值显著低于2组(P<0.05),而L值显著高于2组(P<0.05);1组的肌苷酸含量显著高于2组(P<0.05),不饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸含量极显著高于3组(P<0.01),但均与2组差异不显著(P>0.05)。随着日粮蛋白水平的降低,血清尿素氮浓度下降,3组血清尿素氮浓度显著低于试验1组和2组(P<0.05),血清甲状腺素T3浓度显著高于2组(P<0.05)。【结论】在日粮消化能水平为12.77MJ/kg时,圩猪生长期和肥育期日粮粗蛋白水平均以140g/kg为宜。     

新城疫病毒（NDV）-F基因（NDV-F）稳定表达P815细胞株的建立

在成功构建新城疫病毒(NDV)-F基因真核表达载体pCDNA3-NDV-F的基础上,应用脂质体LipofectamineTM2000介导法,将其转染小鼠肥大细胞瘤细胞株(P815),经过加入G418(600 靏/mL),筛选得到稳定的细胞克隆株,并进一步扩大培养.应用Trizol法提取细胞RNA,经RT-PCR鉴定,转染细胞提取物在1 600bp处出现目的条带.收集转染细胞,经Westernblot和免疫荧光法检测到表达的目的蛋白.将获得的细胞株在液氮中冻存6个月后检测,该细胞株仍能很好表达NDV-F基因,表明其具有高度稳定性,证明采用脂质体法已成功地建立了能够稳定表达NDV-F基因的细胞株.     

NDV-F基因稳定表达P815细胞株的建立

在成功地构建NDV-F基因真核表达载体pCDNA3-NDV-F的基础上,应用脂质体LipofectamineTM2000介导使其转染小鼠肥大细胞瘤细胞株（P815）,以G418加压筛选（600μg/ ml）得到稳定的克隆并扩大培养成系。应用Trizol法提取细胞RNA,经RT-PCR鉴定,转染细胞在1600bp处出现目的条带。收集转染细胞,经Western blot和免疫荧光法检测到目的蛋白的表达。进一步将获得的细胞株在液氮中冻存6个月以检测其稳定性,实验证明该细胞株仍能很好的表达F基因。本实验采用脂质体法已成功建立了能够稳定表达NDV-F基因细胞株,为进一步研究ND核酸疫苗的效果奠定良好的实验基础。     

小麦制酒精浮渣饲喂鸡的营养价值评定

本试验通过测定小麦制酒精后浮渣的常规营养成分和氨基酸含量,同时选用12只平均体重为(2.2±0.11)kg的成年皖南三黄鸡公鸡,采用套算法测定其各常规养分代谢率及代谢能,确定小麦制酒精浮渣饲喂鸡的营养价值.结果表明(干物质基础):小麦制酒精浮渣中粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、钙、磷的含量分别为38.70％、14.21％、10.17％、3.95％、0.36％和0.66％;各氨基酸含量分别为天冬氨酸2.82％、苏氨酸1.39％、丝氨酸1.55％、谷氨酸4.68％、甘氨酸1.43％、丙氨酸1.68％、缬氨酸1.80％、蛋氨酸0.66％、异亮氨酸1.27％、亮氨酸2.48％、酪氨酸1.19％、苯丙氨酸1.42％、赖氨酸1.56％、组氨酸0.75％、精氨酸1.81％、脯氨酸1.65％、胱氨酸0.59％、色氨酸0.15％;代谢能为12.60MJ/kg;粗蛋白质利用率为41.82％,可利用粗蛋白质含量为16.18％.可见,小麦制酒精浮渣对鸡具有一定的营养价值,可以作为一种鸡用蛋白饲料原料.     

动物营养学教学模式初探

根据动物营养学发展迅速、应用性强、多学科交叉等知识特点,探讨了以提问式、启发式等多种教学方法结合的教学模式,同时也提出了动物营养学教学改革的一些思路.     

发酵芝麻粕替代豆粕对产蛋鸡生产性能·蛋品质和血清生化指标的影响

[目的]研究发酵芝麻粕对罗曼褐蛋鸡生产性能、血清生化指标和蛋品质的影响.[方法]选用健康且产蛋率、平均蛋重和日产蛋量相近的62周龄罗曼褐母鸡960只,分为4组:对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,每组5个重复,每个重复48只.对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂用发酵芝麻粕湿料等能等氮替代豆粕4％、6％和8％的日粮.预饲5d,试验期30d.试验结束时,计算各组鸡的生产性能,测定血清生化指标和蛋品质.[结果]与对照组相比,试验Ⅰ组罗曼褐蛋鸡的料蛋比显著降低(P＜0.05),各试验组鸡的产蛋率、料蛋比、平均蛋重、日采食量、日产蛋量、死淘率无显著差异(P＞0.05);与对照组相比,试验Ⅲ组破软壳率极显著降低(P＜0.01),各试验组蛋形指数、蛋壳率、蛋壳强度、蛋白高度、蛋黄颜色、蛋黄比例、哈氏单位无显著差异(P＞0.05);各试验组血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、血磷和血钙无显著差异(P＞0.05).[结论]日粮中添加适量的发酵芝麻粕湿料可以降低产蛋鸡的料蛋比和破软壳率.     

鸡IL-2基因克隆及其重组质粒的构建与表达

利用一对自行设计的引物,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),从ConA诱导的5周龄SPF鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素2(IL-2)基因片段,其长度为439 bp,经酶切鉴定,初步确定为鸡IL-2基因.再将该IL-2基因片段定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经DNA序列鉴定,表明构建的重组质粒含有IL-2基因,该基因的cDNA序列与Sundick报道的结果基本一致.然后,将IL-2基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-1,并导入菌株BL21, 经诱导培养、蛋白提取和SDS-PAGE,获得分子量约为42 000的蛋白条带,表明所克隆的鸡IL-2基因在原核细胞中得到表达.