励珂健喷剂对10日龄内仔猪腹泻和免疫力的影响

为研究励珂健喷剂（主要成分：杨树花提取物）对10日龄内仔猪腹泻和免疫力的影响,将18头PIC母猪随机分成3组,每组6头,分别为蒸馏水组、土霉素组和励珂健喷剂组,蒸馏水组仔猪1、3、5日龄时皮肤喷洒蒸馏水1 m L/头/d,土霉素组仔猪3、7日龄时分别肌肉注射20%长效土霉素注射液0.2 m L/头/d、0.5m L/头/d,励珂健喷剂组仔猪1、3、5日龄时皮肤喷洒励珂健喷剂1 m L/头/d。结果表明,励珂健喷剂可有效降低10日龄内仔猪的腹泻率和发病率,且励珂健喷剂组腹泻仔猪的治愈速度快于土霉素组和蒸馏水组。由此证明：励珂健喷剂对10日龄内仔猪腹泻有防治作用,并且还可以增强仔猪的免疫力。     

鸡尿酸盐沉积模型的研究与机理探讨

采用高蛋白高钙饲料,通过人工试验鸡尿酸盐沉积模型,观察鸡肾脏临床病理变化。供试鸡群分为健康对照组、高蛋白组、高钙组、高蛋白高钙组。观察鸡群死亡率、采食及饮水量变化、体重变化、血液中尿酸盐含量等指标;考察肾肿模型,其中用磷钨酸显色法测定血液中尿酸含量。结果表明,高蛋白高钙饲料能使鸡体增重率降低,饮水量、采食量降低,死亡率升高,血清中尿酸盐含量升高,尿酸盐在肾脏沉积形成花斑肾。     

猪Chemerin和受体基因的克隆与组织分布

基于电子延伸序列,本试验克隆并分析了猪Chemerin和受体(ChemerinR)基因;各种组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD19-T连接后转化E.coli JM109,检测阳性克隆并测序;结果表明:猪Chemerin cDNA克隆片段为558 bp,开放阅读框架为492 bp,编码有163个氨基酸.ChemerinR cDNA克隆片段为1 470 bp.开放阅读框架为1 092 bp,编码363个氨基酸.同源分析结果表明,猪Chemerin的核酸序列与牛、人和大鼠的同源性分别为86.7%,79.1%和73%,氨基酸序列的同源性分别为83.1%、83.4%和67.7%,ChemerinR的核酸序列与人、大鼠和小鼠的同源性分别为80.4%、77.6%和72.6%,氨基酸序列的同源性分别为88.2%、80.7%和79.3%.组织分布结果显示:猪Chemerin在多种组织均有分布,ChemerinR仅在膀胱、大脑和肌肉有分布.     

猪锌转运蛋白基因的克隆及其在消化道组织中的分布

slc30A编码的锌转运蛋白可将胞质锌排出细胞外或转入细胞器,从而降低胞浆锌的含量。本研究运用电子克隆设计引物,对猪(Sus scrofa)消化道组织中slc30A1~slc30A9进行克隆,将克隆的slc30A1~slc30A9序列及其编码蛋白的氨基酸序列与其他物种进行同源性比较,并对slc30A1~slc30A9在猪消化道组织中的分布进行研究。克隆结果表明,猪slc30A1~slc30A9均包含一个完整的开放阅读框架,长度为1044~2301bp,编码由348~767个氨基酸残基组成的ZnT(Zinc transporter)蛋白,GenBank登录号分别为:FJ374262.1、EU825192.2、FJ358706.1、EU835903.1、FJ230771.1、FJ237622.1、FJ237623.1、FJ588029和FJ164069.1,其中slc30A8为一个突变体;同源性分析比较发现,slc30A和ZnT蛋白氨基酸与其他种属的同源性分析结果基本一致,与牛(Bos taurus)和人(Homo sapieus)的同源性较高,与小鼠(Mus musculus)和大鼠(Rattusy norvegicus)的同源性较低,且不同异构体及其编码的蛋白也略有差异;组织分布结果表明,除slc30A8仅在回肠中有分布外,slc30A9分布最广,在食道、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠中均有分布,而slc30A1和slc30A6除了回肠,其余组织均有分布,其他几个异构体在回肠中也没有分布,而在食道、十二指肠、空肠、盲肠、结肠和直肠中有不同程度的分布。研究结果提示,slc30A在消化道中的分布具有组织特异性,可能与其在猪体内的功能密切相关。     

喹诺酮类药物研究新进展（一）

喹诺酮类药物是一类化学合成的抗菌药物，是最具有开发前途的一类药物，是目前临床应用广泛的抗菌药物之一，已发展到了第4代。在其广泛应用的同时亦存在毒性反应、胃肠道反应、耐药性等诸多问题。文章就其研究进展、临床应用等方面进行综述。     

猪Mighty基因的克隆与组织表达分析

Mighty基因是在骨骼肌中发现的一个新颖的肌形成前期因子。基于电子延伸序列,本试验成功克隆出了Mighty基因,其全长874 bp,开放阅读框为579 bp,编码有193个氨基酸,提交GenBank(EU559709)。同时,试验采取半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究了Mighty基因在仔猪18个组织中的分布和mRNA的表达水平。     

猪干扰素IFNE1基因克隆及重组表达载体的构建

依据电子延伸序列设计一对克隆引物,用RT-PCR法从猪胃组织扩增出猪干扰素epsilon 1(IFNE1)基因的完整编码区并进行序列分析;再根据克隆的序列设计一对表达引物,用PCR法从重组克隆载体中扩增出含EcoRI/XhoI酶切位点的猪IFNE1片段,插入原核表达载体,转化至宿主菌,诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白。结果表明,克隆的猪IFNE1基因包含完整的开放阅读框架,长为586 bp,ORF为582 bp,编码193个氨基酸,与人、小鼠的同源性分别为83.6%和69.2%,推测的氨基酸序列与人、小鼠的同源性分别为76.2%和55.2%,表达的融合蛋白分子量约为47 kDa。     

猪肿瘤抑制基因候选5的克隆与序列分析

基于电子延伸序列,克隆了仔猪肿瘤抑制基因候选5(TUSC5),并初步分析其组织分布情况;获得了TUSC5基因的全长序列636bp,包括开放阅读框架(ORF)534bp,编码177个氨基酸。克隆的仔猪TUSC5基因与人、小鼠、大鼠的TUSC5基因序列的同源性分别为83.5%,82.4%,82.6%,推测的氨基酸序列同源性分别为71.2%,77.5%,78%,成功克隆了猪TUSC5基因。     

饲料中不同蛋白和钙对鸡肾脏影响的研究

通过饲喂不同蛋白,人工试验出鸡尿酸盐沉积模型,并观察鸡肾脏临床病理变化。采用高蛋白高钙饲料造模,将动物分健康对照组、高蛋白组、高钙组、高蛋白高钙组,通过鸡的死亡率、采食饮水量的变化、体重变化率、血液中尿酸盐含量等指标,考察肾肿模型,其中用磷钨酸显色法测定鸡血液中尿酸的含量。高蛋白高钙能使鸡增重率降低,鸡的饮水量、采食量降低,死亡率升高,血清中尿酸盐含量升高,尿酸盐在肾脏沉积形成花斑肾。用44%高蛋白高钙(0.5%钙)可以人工试验出鸡尿酸盐沉积模型。     

仔猪组织基因表达中实时定量PCR内参基因的选择

实时定量PCR研究中需要选择表达稳定性高的内参基因才能准确地校正目标基因的表达量。以仔猪不同组织为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术,检测了beta-肌动蛋白（ACTB）、beta-2-微球蛋白（B2M）、3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）、羟甲基胆素合成酶（HMBS）、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶1（HPRT1）、核糖体蛋白L4（RPL4）、琥珀酸脱氢酶（亚基A）（SDHA）、TATA盒结合蛋白1（TBP1）和酪氨酸3-单氧化酶/色氨酸5-单氧化酶激活蛋白zeta多肽（YWHAZ）共9个看家基因mRNA水平的表达情况。经geNorm程序统计学分析处理,结果表明,9个看家基因的表达稳定性为HMBS和HPRT1〉RPL4〉TBP1〉B2M〉YWHAZ〉SDHA〉GAPDH〉ACTB,确定了HMBS基因在仔猪不同组织中用于校正目标基因的表达量为最佳选择,而RPL4基因则可以作为高转录本的内参基因。