应用RACE技术扩增驴DGAT1基因3′端及序列分析

DGAT1（脂酰辅酶A：二脂酰甘油酰基转移酶）基因是产奶性状的一个重要功能侯选基因。由于通过预测奶牛DGAT1基因序列与马属动物DGAT1基因序列具有98%的同源性,本试验从影响牛产奶性状的DGAT1基因出发,以驴乳腺组织的RNA为模板,按照不同物种DGAT1基因的相似性设计特异引物,运用PCR和3′RACE技术扩增并获得了特异片断,特异片段回收纯化连接到pUCmT Vector载体后,转化到大肠杆菌中并筛选阳性菌落;提取质粒进行测序,结果发现该段序列与预期的目标一致,通过与其他动物同源性比较分析说明已首次克隆到驴DGAT1基因3′端。     

促进浙江省纺织产业发展的对策

浙江省纺织产业的发展仍未完全摆脱高投入、高消耗、高污染,片面追求产量的低产出、低效益的粗放型发展模式。分析浙江省纺织产业发展中存在的问题,并提出促进浙江省纺织产业发展的对策。     

应用PCR技术鉴定牛早期胚胎性别方法优化的研究

研究的目的是优化胚胎PCR性别鉴定方法的条件，建立实用的鉴定方法。试验设计获得了牛种属和公牛特异的引物，利用聚合酶链反应（PCR）对模板DNA进行扩增，通过常规双重PCR法和巢式PCR法的比较研究，结果表明巢式PCR法大大提高了鉴定牛早期胚胎性别的灵敏度。对组织DNA样品、血样、颗粒细胞和公牛冷冻精子进行检测，结果全部与实际性别一致；对于胚胎样品，判定结果与产犊性别一致。通过批量胚胎现场的检测，证明建立的胚胎性别鉴定方法可用于生产。     

奶牛活体采卵与屠宰场卵巢卵子体外生产胚胎的效果比较

先利用屠宰场卵巢获得的卵母细胞进行体外培养试验.在建立了培养体系获得较稳定的囊胚率的基础上,再利用具有优良乳用遗传性状的老龄奶牛进行活体采卵(OPU),获得的卵子进行体外胚胎生产,对奶牛活体采卵与屠宰场卵巢卵子体外生产胚胎的效果进行了比较.同时对奶牛重复OPU的效果及OPU卵子的培养天数对妊娠率的影响因素等进行探讨,试图为研究和生产建立一个高效的活体采卵体外胚胎生产方法.结果表明:(1)活体采卵获得的卵母细胞从形态以及后期的发育情况均明显差于屠宰场卵巢获得的卵子;OPU法的卵裂率、囊胚率(70.5%、18.3%)明显低于从屠宰场卵巢获得的卵子的卵裂率、囊胚率(75.1%、34.8%)(P＜0.01).(2)不同个体采集卵子数量差异明显(5.92枚/头与1.4枚/头)(P＜0.05).(3)同一头奶牛每次采卵数之间无显著差异,但有波动性变化.(4)奶牛OPU卵子经培养在第6 d或第7 d发育至囊胚的胚胎移植妊娠率高于第8 d发育至囊胚的胚胎.     

盆栽梨树的品种改良

本文主要介绍靠接技术在盆栽梨树上的应用情况。近年来为改良品种提高观赏效果,重点对接穗、砧木进行优良选择,并详细阐述了靠接过程及靠接后的管理。通过实际操作,反复实验,认为靠接技术在盆栽梨树上的应用效果好,科学性强,值得推广。     

疆岳驴体重和体尺性状的相关和回归分析

疆岳驴是我国优良的乳肉兼用地方品种,为了加快对疆岳驴的选育、提纯复壮和保种速度,本研究选择101头疆岳驴进行体重和体尺测定,并应用R语言(2.15.0)进行相关和回归分析。结果表明,年龄对疆岳驴的体高、胸围和体重影响极显著(P<0.001),对体长和管围影响显著(P<0.05),其中1～3岁年龄组的体高、体长、胸围、管围和体重值最大,并且1～3岁公驴的体高、管围和体重显著优于母驴(P<0.05)。疆岳驴的体重与体尺性状有极显著的相关关系(P<0.001),通过建立最优回归方程表明,影响体重的重要性状依次为胸围、体高和体长。建议疆岳驴在选育、提纯复壮和保种时应加大对胸围、体高和体长的选择力度,同时参照最优回归模型可以获得较好的效果。     

牛早期胚胎性别鉴定体系的建立和优化*

根据牛SRY基因5’调控区序列设计合成了2对巢式PCR引物作为公牛特异的性别鉴定引物，根据牛酪蛋白基因序列设计合成了l对引物作为内标基因引物，建立了牛早期胚胎性别鉴定的PCR反应体系，同时对微量牛胚胎细胞DNA的提取方法、巢式PCR和常规PCR的灵敏度进行实验，以便建立适合在生产实践中应用的牛胚胎性别鉴定技术。结果表明，设计使用的性别鉴定引物公牛特异，所有引物牛特异。煮沸法和反复冻融法都可应用于微量牛胚胎细胞DNA的提取。实验所使用的巢式PCR只要10个以上细胞就可看到扩增结果，适合在胚胎性别鉴定中使用。在建立了胚胎性别鉴定的PCR反应体系后，鉴定了10枚奶牛胚胎的性别，目前已产下两头犊牛，其实际性别和鉴定结果相一致。     

保证果树盆景坐果率的新技巧

果树盆景必须挂果才能更喜人,本文就如何保证提高果树盆景的坐果率展开论述.     

疆岳驴催乳素受体基因多态性及其与泌乳性状间的相关性分析

试验旨在研究疆岳驴催乳素受体（prolactin receptor,PRLR）基因多态性及其与泌乳性状间的关系,探寻可用于疆岳驴选育的分子遗传标记。随机选取120头疆岳驴,对疆岳驴的泌乳性能指标进行测定,并运用PCR-SSCP方法对疆岳驴PRLR基因侧翼区进行多态性分析。结果显示,PRLR基因在疆岳驴群体中存在2种基因型：AA和AB,A为优势等位基因;测序结果显示,PRLR基因的碱基突变位置为g.29764584 C>G,该突变为同义突变,没有导致编码的氨基酸发生改变;经关联分析,PRLR基因AB基因型个体平均日泌乳量显著高于AA基因型（P<0.05）,AA基因型个体乳蛋白率显著高于AB基因型（P<0.05）,在乳糖率上差异不显著（P>0.05）。疆岳驴PRLR基因突变与泌乳性状存在关联性,推测PRLR基因可以作为疆岳驴乳用型选育的分子遗传标记之一。     

定果后果树盆景换盆技术

根据近几年果树盆景养护经验,总结了一套独特的先定果后果树盆景换盆技术,这项技术具有成型快、易操作、观赏价值高等特点。