马乳脂肪球膜蛋白组鉴定及潜在功能分析

试验旨在研究马乳脂肪球膜（milk fat globule membrane，MFGM）蛋白组成及潜在的生物学功能。选取12匹5岁左右、平均体重为450~500 kg的健康纯血母马作为试验动物，主要饲喂干牧草，所有马匹饲养和管理条件均相同。将12份样品以每组4份进行混合，分离提取产后第60天马乳中MFGM蛋白，进行高分辨质谱仪鉴定和生物信息学分析。结果显示，马MFGM组分中共鉴定出310种表达蛋白，这些蛋白主要参与的生物过程为生物调节、刺激应答、定位、多细胞生物过程、运输、信号、细胞通讯、发育过程、细胞分化和免疫系统过程等；细胞成分主要为胞外区域、膜、囊泡、核仁和线粒体等；分子功能主要为催化活性、蛋白质结合、碳水化合物衍生物结合和小分子结合等。KEGG通路分析表明，MFGM蛋白主要参与血小板活化通路、内吞、脂肪酸生物合成和Ras信号通路等。马乳MFGM蛋白的蛋白质互作网络分析图中共包含215种蛋白质。本研究结果揭示了马乳MFGM蛋白质组的复杂性，为解析其营养和生物学功能提供了科学数据。     

猪耳组织DNA的快速提取

采用一步法提取的猪基因组DNA,可直接用于PCR扩增、单链构象多态性(SSCP)分析及测序。操作步骤为:采取新鲜猪耳组织2～10mg,蛋白酶K消化,55℃1h,滤纸过滤消化产物。取孔径为1.2mm的滤纸(含有足量的DNA)作为模板进行PCR扩增。结果表明,提取的基因组DNA质量较高,PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和SSCP分析后可见清晰的条带,可进一步用于克隆测序。滤纸上的DNA干燥后可常温保存。该方法简单、快速,成本低,效率高,适用于大批量的基因分型,也可用于提取不同组织的基因组DNA。     

灌注必需和非必需氨基酸对泌乳奶牛乳腺代谢和产奶量变化的影响

本试验旨在研究乳腺对不同类型的氨基酸需求和乳腺对不同的氨基酸供给模式其代谢模式的变化。试验采用带14d残差效应的重复4×4平衡拉丁方试验设计,8头荷斯坦奶牛(泌乳日龄61d±4d)被随机分配到4个处理组中。试验日粮满足100%净能需要和72%代谢蛋白需要。4个处理组分别为皱胃灌注水处理组(1组)、皱胃灌注必需氨基酸组(359g/d)(2组)、皱胃灌注非必需氨基酸组(356g/d)(3组)、皱胃灌注必需氨基酸(359g/d)和非必需氨基酸(356g/d)组(总计715g/d)(4组)。灌注液氨基酸组成除了蛋氨酸被提高到与赖氨酸保持3∶1比例、酪氨酸由于其溶解性低全部由苯丙氨酸替代和部分谷氨酸由谷氨酰胺替代外,灌注氨基酸谱图与酪蛋白氨基酸谱图相同;与其他处理组相比,必需氨基酸处理组提高了乳产量和乳蛋白产量,非必需氨基酸处理组趋向于提高乳腺对葡萄糖的摄取率。必需氨基酸处理组,乳腺摄取的氨基酸(His、Met、Phe、Trp和Tyr)与乳蛋白排出的氨基酸(His、Met、Phe、Trp和Tyr)比例不一致且这种比值有增加的趋势。灌注必需氨基酸时,Ile、Leu、Lys和Val表现出相同的试验结果。结果表明,当供给的氨基酸谱图和剂量不同时,乳腺能选择性的吸收氨基酸和产能营养素;当供给蛋白质缺乏非必需氨基酸时,未发现乳产量和乳蛋白合成的提高。     

哈萨克母羊分娩前与胎儿组织器官细菌的多样性

【目的】研究分娩前哈萨克母羊和胎儿组织、肠道内容物及相关器官菌群的多样性。【方法】试验选择5只4岁、胎次相同、健康的妊娠后期母羊,平均体重为(55.64±4.37) kg,安乐死后,分离各组织器官并采集相关样品,用于分析菌群多样性。【结果】(1)母羊唾液、小肠内容物及羊水中有较高的多样性,chao1指数分别为1 042.02、1 058.31、1 011.22,ACE指数分别为1 069.18、1 067.41、1 014.17。(2)在物种分类水平上,母羊小肠、盲肠内容物、脐带及羔羊胎粪中厚壁菌门丰度较高,占比分别为79.08%、65.94%、49.66%和35.69%;在母羊唾液和羔羊瘤胃中拟杆菌门占比较高,分别为26.98和51.80%;羔羊瘤胃和母羊唾液中变形菌门的占比分别为64.92%和41.92%。(3)羔羊瘤胃液、胎粪及脐带中物种相似性较高,母羊唾液和瘤胃液中物种相似性较高,母羊小肠内容物和母羊盲肠内容物中物种相似性较高。【结论】母羊妊娠后期唾液、小肠内容物及羊水中有较高的多样性指数,厚壁菌门、变形菌门及拟杆菌门是此阶段母羊和胎儿各组织器官主要的物种。     

添喂不同剂量气溶胶OT对绵羊采食、瘤胃原虫和细菌数量的影响

选取4只2岁龄、体重约50kg、装置了永久性瘤胃瘘管的小尾寒羊公羊,采取4×4拉丁方设计,在粗料型和精料型日粮条件下给绵羊添喂气溶胶OT(0,0.4,0.8,4.0g/kg日粮),以研究不同剂量气溶胶OT对绵羊采食、瘤胃原虫和细菌数量的影响。结果表明,添喂气溶胶OT 0.4,0.8,4.0g/kg日粮,在粗料型日粮条件下绵羊的自由采食量分别提高13.2%(P0.01),30.7%(P0.01)和-5.3%(P0.01),瘤胃原虫数量分别减少33.9%(P0.01),54.2%(P0.01)和86.3%(P0.01),细菌总数分别增加33.6%(P0.01),46.9%(P0.01)和-23.5%(P0.01);在精料型日粮条件下绵羊的自由采食量分别提高7.1%(P0.01),16.3%(P0.01)和-5.6%(P0.01),瘤胃原虫数量分别减少30.1%(P0.01),56.2%(P0.01)和89.0%(P0.01),细菌总数分别增加44.7%(P0.01),59.4%(P0.01)和-19.8%(P0.01)。本研究表明,添喂适量的气溶胶OT可以同时减少绵羊瘤胃原虫数量和增加细菌总数,提高绵羊采食量。     

传统Raib型牛奶发酵乳中野生Leuconostocs菌和乳酸球菌的分离及鉴定

Raib(Rayeb)是由乳球菌和明串珠菌发酵产酸进而酸化和产生风味的一种自然发酵乳。Raib及其副产品是许多地中海和撒哈拉以南非洲国家的传统食品。当前尚未有用于发酵Raib的专门发酵剂。本研究目的是分离和鉴定可用于Raib及其副产品的生产,并能保持自身传统特性的天然乳球菌和明串珠菌菌株。在实验室中采用M17和MRS(含万古霉素)培养基,从新鲜阿尔及利亚牛乳、绵羊乳、山羊乳、马乳、骆驼乳等原料乳或其发酵乳中分离了优势乳酸球菌,提取这些菌株的DNA,并且采用Rep-PCR技术对上述菌株指纹图谱分析。采用Rep-PCR技术结合Enterococcus属特异性引物、Lactis/hordniae和Cremoris ofLactococcus lactis.亚属特异性引物,对菌株进行鉴定。分离获得菌株的3个与Raib生产相关的特性被确定,其中包括在正常的相关温度范围内体现的高酸化能力、蛋白酶活性及柠檬酸代谢能力。84株菌被定性,其中包括4株乳球菌和4株明串珠菌;具有抗万古霉素的肠球菌,常常被共分离。一株Leuconostoc mesenteroides菌与亚种模式菌株以及其他天然明串珠菌相比,显示了非典型的表型特征。两株分离自骆驼发酵乳,并具有蛋白酶活性的Lactococcus lactis subsp.lactis biovar diacetylactis和分离自马发酵乳的Leuconostocmesenteroides subsp.Mesenteroides在乳中显示高的酸化潜力;以上3株菌适合用作酸化发酵剂,它们既可保留传统Raib的传统的感官特性,同时可以改善Raib的安全性和延长货架期。     

不同训练场地对伊犁马运动性能、血浆抗氧化指标及糖代谢的影响

旨在研究不同训练场地对伊犁马1 000 m速度赛成绩、生理指标、血浆抗氧化能力及全血糖代谢的影响。本试验选择年龄2岁,1 000 m速度赛成绩接近的伊犁马公马12匹,随机分为2组,分别为沙道训练组和草道训练组。所有马匹训练方法、训练强度一致,饲养管理及日粮营养水平相同,进行为期30 d运动训练试验。结果显示,草道训练组1 000 m用时比沙道快4.39%(P0.05);草道训练组能够显著提高血浆SOD、GSH-Px及T-AOC浓度,分别比沙道组高9.72%(P0.05)、5.96%(P0.05)及6.65%(P0.05);草道训练组能够显著降低全血中乳酸的浓度,比沙道组低14.86%(P0.05)。因此,在本试验条件下,在草道上训练能显著提高伊犁马1 000 m速度赛成绩,提高运动前后血浆抗氧化能力,并降低全血中乳酸的堆积。     

不同离子型表面活性剂对反刍动物瘤胃发酵调控的研究进展

表面活性剂是一种新型的反刍动物饲料添加剂,根据表面活性剂的分子结构,可将其分为阴离子型、阳离子型、两性离子型和非离子型表面活性剂,其作用机理是通过改变瘤胃微生物种群数量进而增加瘤胃内源性酶的分泌量、分泌酶活性或促进酶与底物之间的相互作用,改变瘤胃发酵模式,提高瘤胃微生物对粗饲料的降解能力,进而提高反刍动物生产性能。作者主要综述了表面活性剂的分类及几种常见的表面活性剂对反刍动物瘤胃发酵调控的影响,其中包括非离子型(吐温、烷基多糖苷、茶皂素)、两性离子型(甜菜碱、大豆磷脂)和阴离子型(十二烷基苯磺酸钠、磺基丁二酸钠二辛酯);介绍了日粮中添加不同离子型表面活性剂对反刍动物瘤胃微生物种群数量、内源酶活、发酵产物等影响,为新型表面活性剂的开发和表面活性剂在反刍动物日粮中的合理应用提供参考依据。     

补喂复合益生菌对3～6月龄伊犁马粪便纤维含量、挥发性脂肪酸浓度和血浆细胞因子水平的影响

试验旨在研究补喂复合益生菌对3～6月龄伊犁马粪便纤维含量、VFA浓度和血浆细胞因子水平的影响。选取体重相近(90.23kg±11.02kg)、健康状况良好的3月龄伊犁马哺乳马驹10匹,随机分为2组,每组5匹,分别为对照组和试验组。在分阶段补喂等量营养水平的精料补充料和苜蓿干草的基础上,试验组每匹马驹每天补喂0.075g(2×10¹¹ CFU/g)枯草芽孢杆菌和0.133g(3×10¹⁰ CFU/g)植物乳杆菌复合菌,进行为期90d的饲养试验。结果显示,补喂复合益生菌能够显著或极显著降低马驹粪便中酸性洗涤纤维(ADF)和淀粉的含量(P<0.05;P<0.01),分别比对照组低3.50%和11.32%;显著或极显著提高马驹粪便中乙酸和丙酸的浓度(P<0.05;P<0.01),分别比对照组高14.65%和64.29%;极显著提高血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平(P<0.01),比对照组高16.17%。由此可见,补喂复合益生菌能够降低马驹粪便中纤维的含量、提高挥发性脂肪酸(VFA)的浓度,增加3～6月龄伊犁马血浆细胞因子水平。     

非遗传因素对中国美利奴羊(新疆型)主要经济性状的影响

为探索非遗传因素对中国美利奴羊(新疆型)主要经济性状的影响,试验对拜城种羊场1992-2010年共19年周岁母羊鉴定记录进行统计分析,利用最小二乘方差分析法研究出生年份、群别及出生月份3个非遗传因素对周岁母羊鉴定记录的6个主观鉴定性状(头毛评分、毛密度评分、毛弯曲评分、毛细度评分、体型外貌评分、品种等级评分)和4个客观测定性状(毛长度、鉴定时体重、剪毛后体重、剪毛量)共10个经济性状的影响。结果表明,出生年份和群别对10个性状均有极显著影响(P0.01);出生月份对除毛密度评分、毛细度评分、品种等级评分外的其他7个性状均有极显著影响(P0.01)。从毛细度、毛长度和剪毛量3个最主要的性状来看,2008年毛细度评分最高,显著高于2006、2007和2010年(P0.05);1996年毛长度最长,显著高于1994、2002、2004、2006、2007、2008和2010年(P0.05),与1995、2003和2009年差异不显著(P0.05);1995年剪毛量最多,显著高于1994和2009年(P0.05),与1992年差异不显著(P0.05);除此之外,其他年份的毛细度评分、毛长度和剪毛量均极显著低于最高值(P0.01)。除2号群外,不同群别各有优势。1、2月份出生的羊较3、4月份好。由此可见,出生年份、群别和出生月份非遗传因素对中国美利奴羊(新疆型)的主要经济性状存在显著影响,因此,在遗传参数估计和遗传评定时应该综合考虑这些因素,从而为获得更为全面、准确的育种值及制定育种方案提供参考依据。