α肿瘤坏死因子的研究进展

α肿瘤坏死因子(TNF-α)是一种由多核巨细胞产生的有广泛生物学活性的细胞因子,具有调节机体的免疫功能和导致肿瘤细胞坏死的特性。随着对TNF-α生物学活性研究的深入,TNF-α与各种疾病的关系越来越紧密,在许多疾病的研究中都将其作为检测的重要指标。论文通过对TNF-α的基因结构、在组织中的分布、生物学功能和检测方法的叙述,为有关TNF-α在生物学和医学方面更深入的研究提供参考依据。     

樱桃谷鸭CD3ε胞外区多肽原核表达、抗体制备及初步应用

应用PCR技术从樱桃谷鸭总RNA中克隆CD3ε基因ORF序列(DuCD3ε),通过生物学软件分析,切除信号肤和跨膜区,将胞外区cDNA(DuCD3ε)插入表达栽体pET-28a.构建了E.coli BL21(pET一28a/DuCD3ε)原核表达系.经IPTG诱导表达、蛋白纯化,制备兔抗DuCD3ε多克隆抗体.应用免疫组织化学SABC方法在樱桃谷鸭外周血液涂片上进行初步应用.结果显示,DuCD3ε胞外区序列长252 bp,编码83个氨基酸.SDS-PAGE和Western-blot分析证实重组DuCD3ε(rDuCD3ε)在BL21大肠杆菌中表达.表达蛋白相对分子质量约为14000,经3次免疫后,通过问接ELISA测定兔抗rDuCD3ε蛋白多克隆抗体效价为1:12800.在鸭瘟病毒感染后不同时间,对照组CD3+T淋巴细胞数占淋巴细胞总数的百分比为28%～47%,试验组CD3+T淋巴细胞百分比为32%～77%,在感染后1～3 d外周血液中CD3+T淋巴细胞比值急剧升高,3 d以后比值缓慢下降.结果表明,本试验成功表达CD3ε胞外区多肽,制备的兔抗樱桃谷鸭CD3ε多克隆抗体可用于鸭外周血中CD3+T淋巴细胞标记染色,具有较好的特异性.     

鸭源呼肠孤病毒感染引起雏鸭免疫损伤的观察 征文

 【目的】观察鸭源呼肠孤病毒对雏鸭脾、法氏囊的病理损伤及相关免疫指标,初步阐明鸭源呼肠孤病毒对所引起的机体免疫器官损伤以及机体免疫抑制,为进一步探讨发病机理和免疫防治提供理论依据。【方法】7日龄樱桃谷雏鸭人工感染鸭源呼肠孤病毒,分别观察脾、法氏囊组织病理学变化,检测脾、法氏囊指数,外周血CD3+、CD8+T细胞阳性率,脾、法氏囊IgY生成细胞,并分析试验组及对照组差异显著性。【结果】感染鸭源呼肠孤病毒后,雏鸭脾出现明显坏死灶,之后出现肉芽肿结构,法氏囊固有层淋巴滤泡明显减少;脾、法氏囊指数降低;外周血CD3+、CD8+T细胞阳性率降低;脾IgY生成细胞数量增多、法氏囊IgY生成细胞数量减少。【结论】鸭源呼肠孤病毒感染可导致雏鸭免疫器官严重损伤并引起免疫抑制。     

鸭源呼肠孤病毒感染引起雏鸭免疫损伤的观察

【目的】观察鸭源呼肠孤病毒对雏鸭脾、法氏囊的病理损伤及相关免疫指标,初步阐明鸭源呼肠孤病毒对所引起的机体免疫器官损伤以及机体免疫抑制,为进一步探讨发病机理和免疫防治提供理论依据。【方法】7日龄樱桃谷雏鸭人工感染鸭源呼肠孤病毒,分别观察脾、法氏囊组织病理学变化,检测脾、法氏囊指数,外周血CD3+、CD8+T细胞阳性率,脾、法氏囊IgY生成细胞,并分析试验组及对照组差异显著性。【结果】感染鸭源呼肠孤病毒后,雏鸭脾出现明显坏死灶,之后出现肉芽肿结构,法氏囊固有层淋巴滤泡明显减少;脾、法氏囊指数降低;外周血CD3+、CD8+T细胞阳性率降低;脾IgY生成细胞数量增多、法氏囊IgY生成细胞数量减少。【结论】鸭源呼肠孤病毒感染可导致雏鸭免疫器官严重损伤并引起免疫抑制。     

鸭I型肝炎病毒抗体检测方法的研究

鸭I型病毒性肝炎是一种高度致死性、传播迅速的病毒性疾病，是危害养鸭业最为严重的疾病之一。鸭I型病毒性肝炎抗体的检测方法有中和试验、酶联免疫吸附试验、间接血凝试验、补体结合试脸和乳胶凝集试验等。通过比较这些方法的优缺点，为临床上鸭I型肝炎病毒抗体水平的检测提供参考依据，进而有利于减少该病给鸭农带来的经济损失。     

鸡大肠埃希菌与沙门菌混合感染的病原分离鉴定及药敏试验

对武汉市某鸡场送检的病鸡进行病理剖检,病理组织切片观察,并从病鸡的肝脏和心脏中分离得到两株细菌,依次进行分离纯化培养、镜检、生化鉴定及鸡白痢鸡伤寒玻片凝集试验,确定一株为大肠埃希菌,另一株为沙门菌.通过进行小鼠感染试验,表明所分离的两株细菌均有致病力.通过药敏试验分析它们对卡那霉素、恩诺沙星、利福平、庆大霉素、氟哌酸、...     

麻鸭和樱桃谷鸭的CD3ε、CD4、CD8α基因ORF克隆及序列分析

 【目的】分析比较中国部分品种鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列,为研究CD3ε链、CD4和CD8α链的结构和功能及其抗体的应用提供依据。【方法】利用RT-PCR,对麻鸭、樱桃谷鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列克隆测定,应用ClustalX（1.83）和DNAstar生物学软件分别与GenBank上公布的北京鸭CD3ε（AF378704）、CD4（AF378701）和CD8α（AF378373）基因ORF序列进行序列分析。【结果】麻鸭、樱桃谷鸭、北京鸭CD3ε和CD4基因ORF序列及所编码的氨基酸同源性为99%;北京鸭和麻鸭CD8α基因ORF序列同源性为99%,与樱桃谷鸭的同源性为95%。麻鸭和北京鸭CD8α基因ORF序基因编码的氨基酸完全一致,与樱桃谷鸭的CD8α存在16处位点差异,其中胞外区有15个氨基酸的差异,使亲水性、抗原性以及此区域位于蛋白质表面的可能性都有明显差异。从遗传发生树得出樱桃谷鸭、北京鸭、麻鸭CD3ε和CD4的ORF序列相互之间的遗传关系近;樱桃谷鸭、麻鸭和北京鸭CD8α基因ORF序列之间的遗传关系较远。【结论】樱桃谷鸭、北京鸭、麻鸭CD3ε和CD4的ORF序列遗传变异性低,樱桃谷鸭与麻鸭和北京鸭CD8α基因ORF之间具有较高遗传变异性。