番木瓜CpTIFY10A-like基因克隆及表达分析

[目的]克隆番木瓜CpTIFY10A-like基因序列,并分析其表达特性,为探索该基因功能和抗番木瓜环斑病毒(PRSV)分子机制提供理论依据.[方法]结合前期研究的抗PRSV转录组数据,利用RACE对上调表达基因Cp-TIFY10A-like进行克隆,获得该基因cDNA全长序列,分析其编码区序列(CDS)及进行生物信息学分析.利用已鉴定的PRSV对3月龄番木瓜植株进行不同处理,以感染PRSV且出现病症的植株(CK+)、1.0 mL/L禾甲安(CTS-N)灌施感染PRSV且出现病症的植株(B)为处理组,以清水灌施(不添加禾甲安)不感染PRSV的植株(CK-)为对照组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同处理下PRSV基因和CpTIFY10A-like基因在番木瓜叶片中的表达情况.最后将CpTIFY10A-like基因CDS序列连接至pET28a-sumo载体上构建原核表达载体,转化Rosetta(DE3)感受态细胞,通过不同浓度IPTG诱导蛋白表达,利用SDS-PAGE电泳检测原核表达情况.[结果]CpTIFY10A-like基因全长为1352 bp,CDS序列为822 bp,编码273个氨基酸残基;其编码蛋白理论等电点(pI)9.23,不稳定系数62.97,亲水性平均系数-0.458,属于不稳定的亲水性碱性蛋白,定位在细胞核上,其二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,同时含有少量的β-折叠和延伸链.CpTIFY10A-like蛋白与酸枣和白梨TIFY蛋白的氨基酸序列相似性较高,均含有特定的TIFY结构域,属于TIFY蛋白家族,三者在系统发育进化树上聚在同一分支,表明亲缘关系较近.不同处理的番木瓜叶片中,PRSV基因的相对表达量排序为CK+(1.02)>B(0.39)>CK-(0),CpTIFY10A-like基因的相对表达量排序为B(53.12)>CK+(1.15)>CK-(1.02),且CpTIFY10A-like基因在经禾甲安处理的感染PRSV番木瓜叶片中相对表达量显著升高(P<0.05,下同),而PRSV基因的相对表达量显著降低.CpTIFY10A-like基因在原核细胞中表达蛋白的分子量与理论分子量(29.36 kD)相符,且不同浓度IPTG诱导下,IPTG浓度越高,蛋白表达量越多,表明该基因在原核细胞中成功表达.[结论]禾甲安可诱导CpTIFY10A-like基因高效表达,进而通过茉莉酸通路起调节作用以抵抗PRSV感染,即CpTIFY10A-like基因在番木瓜抗PRSV过程中发挥重要调控作用.     

光照强度对2种来源的空心莲子草生长的影响

研究了空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)匍匐茎片段(来源于水体)和宿根片段(来源于陆生环境)萌生苗在不同光照强度下的生长。主要结果为:2种来源的空心莲子草幼苗(陆生苗和水生苗)在相同的光照强度下(全光照、33%光照、9%光照),具有基本相同的生长格局,对光照强度的变化也具有相似的反应。随着光照强度的降低,甚至在9%光照时,空心莲子草的总分枝数、最长枝长、节间长度、叶片数没有显著差异,而空心莲子草的叶绿素相对含量显著降低,地上茎直径显著减小;在中等光照条件下(33%光照),其叶面积发生补偿性增大;就生物量的分配而言,随着光强的减弱,根生物量和总生物量显著减少,而茎、叶的生物量只有在光强极低的条件下(9%光照)才显著减少。这些结果表明,在不同的光照强度下,一方面空心莲子草的生长表现出一定程度的形态可塑性,另一方面,空心莲子草基本的空间生长格局特征具有相对稳定性,这种生长策略上的权衡可能是空心莲子草成功入侵的一个重要机制。     

青蒿及复合中草药添加剂对散养肉鸡生长性能及血液生化指标的影响

为研究青蒿及复合中草药添加剂对散养肉鸡生长性能及血液生化指标的影响,试验选用健康、体重基本一致的30日龄良凤花公鸡360只,采用多因素单水平的试验设计,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30只鸡,对照组饲喂基础日粮,三个试验组分别在基础日粮上添加1%的青蒿、1%的青蒿复合添加剂Ⅰ及1%的青蒿复合添加剂Ⅱ,进行为期60 d的饲养试验。饲养试验结束后每个重复选取3只鸡采血和屠宰并测定相关指标。结果表明:与对照组相比,试验3组和试验2组能显著提高肉鸡的平均日增重(P0.05);试验2组能显著提高肉鸡的全净膛率和腿肌率(P0.05);试验2组能显著提高肉鸡血清总蛋白(P0.05),试验3组能显著降低甘油三酯含量(P0.05)。根据以上结果综合分析,在日粮中添加青蒿复合添加剂Ⅰ(试验2组)对提高散养肉鸡的效果最好。     

生态网络视角下的城市湿地公园规划探讨

湿地是自然原生态环境下保持生态系统平衡的生态系统网络。湿地公园是在一定的区域内对原有的原生态湿地进行重建,本文指出了城市湿地公园目前存在的困境,反思了城市湿地公园的分散设计。从生态网络系统的连通性、开放性、多样性和可持续性的角度对城市湿地公园进行规划和管理,有效实现城市湿地公园的可持续发展。     

生态河岸的功能与运用

文章在研究河岸自然特征和河流主要生态问题的基础上,根据生态河岸建设的基本原则,对公园进行了生态河岸规划与建设,探索了对规划构建的公园生态河岸进行综合评价的指标和评价方法。     

宜昌桥边河河道景观设计的探讨

桥边河自西向东蜿蜒而去,流经各种地块,傍着奥体中心而下。绿化作为河道的骨骼,与河道的筋脉水乳交融,"流淌的绿脉"充分体现桥边河绿化设计的精髓。     

PCV2感染对仔猪抗氧化功能的影响

动物体内抗氧化能力的改变可引起包括组织损伤在内的一系列变化。为了解猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)对仔猪组织损伤的机理,测定了PCV2对断奶仔猪抗氧化能力的影响。选用19头PCV2阴性的断奶仔猪,随机分成4组,其中对照组4头,其余3组(每组5头)接种PCV2,并分别在接种后的14、21、35天扑杀,取血样、胸腺和腹股沟淋巴结组织。用酶法测定还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,比色微板法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活力,硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)的含量。结果显示:试验猪血清中,GSH含量第21天降至最低,GSH-PX活力第21天显著升高且达到最高值(P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)和铜锌超氧化物歧化酶(Cu-ZnSOD)的活力均在第14天最强,且T-SOD活力在第14天显著高于对照猪。胸腺和腹股沟淋巴结中,GSH含量第21天显著升高(P<0.05),且达到最高值;SOD活力试验组均比对照组高,且呈上升趋势;MDA含量均在第14天升高,且胸腺中MDA含量在第14天显著升高(P<0.05)。结果表明:谷胱甘肽抗氧化系统在PCV2感染后第21天发挥最大的抗氧化作用,SOD系统在PCV2感染后第14天发挥最大的抗氧化作用。仔猪抗氧化能力的变化是PCV2引起组织损伤的重要原因。     

贵州省肉羊产业发展成效、经验及对策建议

目前,贵州省肉羊产业发展取得重大成就,如保持了自给的增长势头、建立起较稳定的品种繁育基础、坚定了产业规模化发展的信心、涌现出一批发展迅猛的重点县、摸索到品牌化经营的方向策略等。然而,在实际的生产过程中还存在着肉羊产业发展存在需求缺口较大、县域间发展水平参差不齐、辐射推广效果不理想、自发性经营不规律、节本增效路径偏窄等问题,由此笔者提出扩群增量,打造示范县“样板间”,落实“351”工程,示范引领做大肉羊产业规模的对策建议,以期为贵州肉羊产业发展提供决策参考。     

虾青素的生理功能及其在动物遗传资源保护和生产中的应用

虾青素是一种类胡萝卜素,具有抗氧化和抗炎等生理功能。其在动物遗传资源保护方面,被用于动物精液低温保存、受精卵和胚胎的冷冻保存。不仅促进了动物遗传资源异位保种效果,而且有助于解决配子和胚胎远距离运输面临的困难。在动物营养与饲料研究方面,虾青素常作为添加剂被广泛应用于水产养殖和畜牧业生产等领域。该文就虾青素的理化性质、来源、生理功能和应用等方面进行了论述,为开展虾青素研究、开发改性产品和实现其在动物遗传资源保护和畜牧业中的高效利用提供理论依据。     

苗药对3种常见致病菌体外抑菌效果研究

为研究板蓝根、五倍子、黄芪等20味苗药及其组方对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌的体外抑菌效果,本试验通过水煎法、超声水提法、超声醇取法提取苗药及其组方的有效成分,采用二倍稀释法分别测定提取物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果显示,苗药不同提取方法对其抑菌效果影响不同,单味药效果:超声醇提法超声水提法水煎法。五倍子和仙鹤草超声醇提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC分别为0.18、0.71和1.43mg/mL(五倍子)及1.56、3.13和3.13mg/mL(仙鹤草);南五味子、乌梅、刺梨、金银花、绵马贯众、杜仲的MIC值高于五倍子和仙鹤草,低于其他12种药,这6种单味苗药超声醇提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC分别为3.69~50.00、3.13~50.00及3.31~66.25mg/mL。组方药效果结果显示,超声水提法超声醇提法水煎法。组方5超声水提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC最低,分别为0.34、2.75和2.75mg/mL;组方1超声水提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC比组方2、3、4低,分别为2.88、5.75和5.75mg/mL。结果表明,五倍子、仙鹤草及组方5对3种常见致病菌抑菌效果较强,南五味子、乌梅、刺梨、金银花、绵马贯众、杜仲和组方1有一定的抑菌作用,其他苗药的抑菌效果相对较弱。