枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选

枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增，采用预实验中效果较好的iPBS分子标记引物2241，对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化，根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用：10×Taq buffer 2μL，25mM Mg2+ 1.6μL，2.5mM dNTP 1.6μL，10μmol/L Primer 1μL，5U/μL Taq酶0.2μL，模板DNA 5ng 的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到22谱带清晰、多态性好的引物，可用于枇杷的分子标记分析。     

江苏枇杷产业发展现状及展望

为找准江苏省枇杷产业症结,促进产业健康发展,于2017年4—5月对全省枇杷产业进行调查,结合调查结果阐述和分析了江苏省枇杷栽培历史、生产现状、发展趋势等,并分析其优点和缺点,提出了制订全省产业规划、完善发展扶持政策、加大品种技术研发、加强品牌树立和三产融合、做大绿化苗木产业等一系列发展策略。     

白沙枇杷主要品种抗寒性调查

枇杷是亚热带常绿果树，对气温的要求较严格。在亚热带北缘地区栽培，冬季低温是影响枇杷授粉受精和幼果发育的主要因素。为此，对苏州洞庭东、西山白沙枇杷主栽品种抗寒性进行初步调查，以了解不同品种间抗寒性的差异，为不同地区选择枇杷品种、培养结果母枝、控制和调节结果部位等提供参考。     

江苏枇杷花腐病的初步研究

为进一步了解2019年江苏枇杷花腐病（Botrytis cinerea）的发生情况,指导枇杷生产,笔者组织了本次调查,调查范围覆盖江苏主要枇杷产区,以花序腐烂率、全花腐烂率及果实数量为主要调查指标。结果表明：江苏枇杷花序北冻南腐现象明显;设施枇杷几乎不受影响,山地、平地、湖边枇杷园腐烂率差别不显著,均超过74%;主栽品种青种的全腐烂率明显低于白玉;郁闭园明显高于非郁闭园,产量影响较大;及时防治具有较好的效果。据此分析了气象因素,提出了具体防治技术措施。     

枳2个F-box基因cDNA全长的克隆及其亚细胞定位分析

利用生物信息学方法,以拟南芥TIR1和F-box cDNA序列为模板,对柑橘EST数据库进行同源检索,筛选出柑橘TIR1和F-box基因的cDNA序列,并以枳花cDNA为模板,根据以上cDNA序列设计5'末端和3'末端扩增的特异引物,利用5'RACE和3'RACE技术,分别获得该基因的5'和3'末端,序列拼接后获得枳的TIR1和F-box cDNA全长。分别命名Pt-TIR1和Pt-F-box,大小分别是2 048,1 695 bp,在GenBank的登录号分别是FJ502240和FJ502241,其分别编码569和468个氨基酸全长。生物信息学分析表明,Pt-TIR1和Pt-F-box的cDNA序列中分别有microRNA393和microRNA394的识别位点,其与其他植物的F-box一样有着高度保守的序列即F-box结构域。构建Pt-TIR1和Pt-F-box亚细胞定位载体35S-GW-GFP-FJ502237/FJ502238,基因枪转化洋葱表皮细胞,暗培养24 h后激光共聚焦显微镜下观察。亚细胞定位结果表明Pt-TIR1和Pt-F-box均定位于细胞核中。转录因子Pt-TIR1和Pt-F-box均具有核定位功能。     

枇杷叶片气孔保卫细胞叶绿体数目分析

[目的]研究枇杷叶片保卫细胞的叶绿体数目差异,探讨其变化规律。[方法]取43份枇杷资源嫩叶进行处理,在20倍显微镜下进行统计,随机选择50个保卫细胞计算叶绿体数目。[结果]枇杷叶片保卫细胞叶绿体数目在11～17,平均为13.19个,品种间差异大。不同品种叶绿体数目变异幅度不同,在9～14,仅栎叶枇杷的叶绿体数目大于16。[结论]栎叶枇杷可能是多倍体,这可为枇杷资源的倍性鉴定提供参考。     

果树在苏州古典园林中的应用

对拙政园、留园、狮子林、艺圃4个苏州古典园林的果树应用进行了调查。结果表明：①果树在各园林得到广泛应用;②各园林的果树数量及种类差别较大;③果树管理水平不高,生长状况不理想。针对存在的问题,给出相关建议。同时,为使果树景观效果更佳,提出果树栽植创意。     

枳SPL9和SPL13全长cDNA克隆、亚细胞定位和表达分析

【目的】从枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]中克隆SBP类[SQUAMOSA(SQUA)promoter-binding-like]转录因子基因SPL9和SPL13全长,构建SPL9和SPL13亚细胞定位表达载体验证其是否具有核定位功能,利用荧光定量PCR研究其在枳不同组织的表达特性,初步确定SPL9和SPL13在枳生长发育过程中的作用。【方法】利用生物信息学结合RACE技术以枳花器官的cDNA为模板,克隆出SPL9和SPL13基因全长,分别命名Pt-SPL9和Pt-SPL13,大小分别是1519bp和1824bp,在GenBank的登录号分别是FJ502237和FJ502238;构建Pt-SPL9和Pt-SPL13亚细胞定位载体35S-GW-FJ502237/FJ502238-GFP,基因枪转化洋葱表皮细胞,暗培养24h后激光共聚焦显微镜下观察;利用SYBR Green I实时定量RT-PCR方法检测Pt-SPL9和Pt-SPL13在根、茎、叶、花序、花和果等不同组织中的表达。【结果】生物信息学分析表明,Pt-SPL9和Pt-SPL13的cDNA序列中都有microRNA156的识别位点,Pt-SPL9与金鱼草、拟南芥和玉米SPL9的同源性分别为48.9%、42.5%和41.7%;Pt-SPL13与拟南芥SPL13、水稻的SPL16和玉米的TGA1同源性分别为40.8%、38.1%和35.8%。Pt-SPL9和Pt-SPL13与其它植物的SBP一样有着高度保守的序列,即SBP结构域和一个双向核定位信号KRXXXRRRK。亚细胞定位结果表明,Pt-SPL9和Pt-SPL13均定位于细胞核中。SYBR Green I实时定量RT-PCR结果表明,Pt-SPL9和Pt-SPL13在各个器官均有表达,但表达量不同,Pt-SPL9在茎中的表达量最高,在花和叶中的表达量次之,在根、花芽和幼果中的表达量最低;Pt-SPL13在幼果中的表达量最高,在茎和花芽中的表达量相当,其次为叶,在花和根中的表达量很低。【结论】转录因子Pt-SPL9和Pt-SPL13均具有核定位功能,Pt-SPL9和Pt-SPL13对枳的茎和果实的发育可能有着重要作用。     

2008年低温暴雪对枇杷北缘地区生产造成的影响

2008年我国南方罕见的长期低温、暴雪天气以及霜冻给枇杷生产带来了产重的影响,特别是枇杷栽培的北缘地区。笔者查阅了江苏省气候资料,低温、暴雪及此后的冰冻、霜冻是造成2008年枇杷减产的主要零周。江苏省苏州市东山镇、金庭镇、张家港市、无锡市、上海市、浙江省余杭市等地的枇杷冻害情况表明：1．低温暴雪天气对2008年的枇杷产量造成较大影响;2．品种之间抗毫牲差异明显;3．地形对枇杷冻害影响明显;4．不同管理水平和树势冻害差异明显。     

江苏枇杷花腐病的初步研究

为进一步了解2019年江苏省枇杷花腐病的发生情况,指导枇杷生产,笔者调查了江苏省主要枇杷产区,以花序腐(冻)率、全花腐(冻)率及果实数量为主要调查指标进行比较。结果表明,江苏省枇杷花序"北冻南腐"现象明显;设施枇杷几乎不受影响,山地、平地、湖边枇杷园腐(冻)率差异基本不显著,均超过74%;主栽品种青种的全腐(冻)率极显著低于白玉,郁闭园极显著高于非郁闭园,产量影响较大;及时防治具有较好的效果。并分析了气象因素,提出了具体的防治措施。