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枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选
引用本文:顾林平,张冰,费艳,王化坤,王鹏凯.枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选[J].中国果业信息,2019,48(1).
作者姓名:顾林平  张冰  费艳  王化坤  王鹏凯
作者单位:苏州吴中金庭镇农林服务站,苏州吴中金庭镇农林服务站,江苏省太湖常绿果树技术推广中心,江苏省太湖常绿果树技术推广中心,苏州农业职业技术学院
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金[CX(17)2016];苏州市科技计划项目(SNG201632)
摘    要:枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预实验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化,根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用:10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+ 1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng 的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到22谱带清晰、多态性好的引物,可用于枇杷的分子标记分析。

关 键 词:枇杷  iPBS分子标记  体系优化  引物筛选
收稿时间:2018/4/11 0:00:00
修稿时间:2018/6/13 0:00:00
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