枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选 |
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引用本文: | 顾林平,张冰,费艳,王化坤,王鹏凯.枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选[J].中国果业信息,2019,48(1). |
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作者姓名: | 顾林平 张冰 费艳 王化坤 王鹏凯 |
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作者单位: | 苏州吴中金庭镇农林服务站,苏州吴中金庭镇农林服务站,江苏省太湖常绿果树技术推广中心,江苏省太湖常绿果树技术推广中心,苏州农业职业技术学院 |
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基金项目: | 江苏省农业科技自主创新资金[CX(17)2016];苏州市科技计划项目(SNG201632) |
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摘 要: | 枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预实验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化,根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用:10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+ 1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng 的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到22谱带清晰、多态性好的引物,可用于枇杷的分子标记分析。
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关 键 词: | 枇杷 iPBS分子标记 体系优化 引物筛选 |
收稿时间: | 2018/4/11 0:00:00 |
修稿时间: | 2018/6/13 0:00:00 |
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