新城疫病毒河北分离株F基因的克隆与序列分析

通过RT-PCR技术扩增和克隆2003—2007年由河北省分离到的、具有一定代表性的鸡新城疫病毒分离株F基因,与GeneBank中已发表的NDV不同基因型代表株F基因相应核苷酸片段及其氨基酸序列进行比较,构建系统发育进化树并确定分离株的毒力强弱及所属基因型。结果显示,分离株在该区段没有碱基缺失和插入,但有多处点突变分散存在。分离株F基因核苷酸序列与国内外已发表毒株相应序列核苷酸同源性为80.5%~98.5%,推导的氨基酸序列同源性为77.5%~97.7%。表明目前河北新城疫的流行以基因Ⅶ型为主,同时兼有传统的基因Ⅵ型和基因Ⅱ型。     

河北省鸭肝炎病毒的分离鉴定和病毒的细胞培养

从某鸭场疑似鸭病毒性肝炎的发病雏鸭及病死雏鸭肝脏中分离到1株病毒，经鉴定为鸭肝炎病毒。利用鸭胚肝细胞培养病毒，呈现典型CPE，向细胞维持液中加入1％的鸭胚尿囊液，CPE的维持时间可延长至60小时。将病毒的细胞培养物回归鸭胚和雏鸭．其致病力不见明显减弱。     

骆驼乳清蛋白对热应激所致大鼠肝氧化损伤的保护作用

本试验旨在研究骆驼乳清蛋白（CWP）对热应激（HS）大鼠肝损伤、氧化应激及肝功能的保护作用。选取6周龄SD大鼠36只,适应性饲养2周后随机分为6组：正常对照组饲喂基础日粮;CWP对照组添加400 mg·kg^-1的CWP;HS组除饲喂基础日粮外,每天进行2 h HS处理,连续8 d;3个CWP干预组分别于每次HS前灌服100、200和400 mg·kg^-1的CWP。试验结束后,取大鼠肝组织,HE染色观察肝组织病理学变化,同时检测肝功能生物标志物、氧化应激标志物水平及抗氧化酶活性。结果表明：CWP降低了HS大鼠血清谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）活性,400 mg·kg^-1的CWP干预效果最好（P<0.01）;400 mg·kg^-1CWP干预组有效降低了HS诱导的大鼠肝组织病理学改变; CWP降低了大鼠肝活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）水平,增加了超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及谷胱甘肽（GSH）水平,400 mg·kg^-1的CWP干预效果最好（P<0.01）。结果提示,CWP干预能够以剂量依赖性方式降低大鼠肝氧化应激,增加抗氧化系统防御能力,从而缓解HS所致大鼠肝损伤。     

雏鸡多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

从保定市某养鸡场发病死亡雏鸡采集了病料,通过微生物学的病原分离鉴定,最终确定病原体为禽多杀性巴氏杆菌.并用11种药物做了药敏试验,结果该鸡场分离的鸡多杀性巴氏杆菌除对蒽诺沙星、环丙沙星两种药物敏感,对氟派酸中介外,对其余的8种抗生素均产生耐药性.     

甜菜碱对蛋鸡脂肪肝综合征的防治研究

蛋鸡脂肪肝综合征是一种营养代谢性疾病,主要是由于鸡产蛋高峰期机体代谢旺盛,引起脂肪代谢紊乱,导致极低密度脂蛋白合成及转运受阻,使肝脏中合成的脂肪酸不能排出,造成甘油三酯在肝细胞内过度沉积。甜菜碱作为一种多功能新型饲料添加剂,具有调节蛋鸡脂肪代谢、改善蛋鸡的生产性能等疗效。本文综述了甜菜碱的理化性质、蛋鸡的脂肪代谢、甜菜碱促进脂肪代谢、甜菜碱对蛋鸡脂肪肝防治的应用,为甜菜碱在养鸡生产上的广泛应用和进一步理论研究提供科学依据。     

鸡减蛋综合征病毒Hexon基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

用PCR方法扩增出鸡减蛋综合征病毒（EDSV）Hexon基因保守片段,经琼脂糖凝胶电泳及序列测定分析扩增产物的特异性。以构建的阳性重组质粒作为标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应的扩增曲线和溶解曲线,并绘制标准曲线。结果表明,建立的EDSV荧光定量PCR标准曲线Ct值与1×10^1～1×10^6拷贝/μL的基因拷贝数呈现良好线性关系,灵敏度可达10拷贝,且特异性及重复性良好;说明本试验建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法可用于EDSV的诊断及病原的定量分析。     

鸡新城疫病毒地方株的分离鉴定及其遗传变异分析

从河北省保定地区发病鸡群中分离到2个具有血凝性的病毒株分别命名为HBA和HBB,其血凝作用可被NDV阳性血清抑制,而不能被AIV(H9亚型)、EDS76阳性血清抑制,表明2个分离株均为新城疫病毒。通过测定MDT、ICPI和IVPI等方法鉴定分离株的毒力符合强毒标准。利用RT-PCR技术成功扩增了2株分离株的F基因片段(约540bp),通过测序及遗传变异分析表明两毒株之间的核苷酸同源性为87.7%,氨基酸同源性为91.6%,结合系统发育进化树分析表明HBA为基因Ⅵ型,HBB为基因Ⅶ型。     

猪主要病毒性繁殖障碍病的研究现状及防治措施

目前，对于猪病毒性繁殖障碍病尚无有效的治疗性药物，当疾病发生后只能依靠疫苗的紧急接种和加强消毒等综合防治措施来平息疫情或降低经济损失。因此，了解、熟悉病毒性疫病的流行特点，以便采取有效的针对性措施进行预防就显得格外重要。在近几年来对猪病开展研究所取得成果的基础上，本文对我国养猪业出现的几种主要病毒性繁殖障碍病，即伪狂犬病、乙型脑炎、细小病毒感染、猪繁殖与呼吸障碍综合征等疫病的病原特性、临床症状以及流行现状进行分析，并提出综合性防治策略，希望引起人们对这些病的警惕。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3株GP5-M-N蛋白核酸疫苗的构建及免疫原性

为探索猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸疫苗用于免疫预防的可行性,试验用PCR方法扩增出PRRSV HB-3株GP5、M和N基因,通过Linker序列将GP5和M串联为GP5-M,双酶切后和N基因一起插入真核表达载体构建重组质粒pcDNA-GP5-M-N,经酶切鉴定表明GP5、M和N基因和载体连接正确。然后将重组质粒转染至Marc-145细胞,经间接免疫荧光及Western blot分析证实重组蛋白能在Marc-145细胞中表达。然后用重组质粒pcDNA-GP5-M-N免疫Balb/c小鼠,中和抗体检测结果表明,首免后2周即有小鼠产生可检测到的病毒中和抗体(1∶4),随后抗体水平快速升高,第8周抗体效价达到最高(1∶32)。说明本试验构建的重组质粒pcDNA-GP5-M-N能诱发免疫小鼠产生较高水平的中和抗体,为PRRSV核酸疫苗的研究奠定了基础。     

保定地区鸡多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

从保定市某养鸡场发病死亡雏鸡采集了病料,通过微生物学的病原分离鉴定,最终确定病原体为禽多杀性巴氏杆菌。并用11种药物做了药敏试验,结果该鸡场分离的鸡多杀性巴氏杆菌除对恩诺沙星、环丙沙星两种药物敏感,对氟派酸中介外,对其余的8种抗生素均产生耐药性。