高职院校提高动物外科手术教学质量的途径和方法——以甘肃农业职业技术学院动物外科手术教学为例

高职院校如何进一步深化和升华教学改革,提高动物外科手术教学质量,是畜牧兽医专业教师需要深入研究和探索的一个重要课题。方法和手段、加强实训基地建设、加强师资队伍建设和加强精品网络资源共享课程建设等方面进行了探讨,以供参考。     

猪白细胞介素-2重组蛋白的原核表达及其生物学活性分析

用已构建好的重组表达载体pET30-IL2转化BL-21E.coli,挑取单克隆,利用诱导剂IPTG诱导表达;通过改变诱导剂的浓度、诱导的时间来摸索最佳诱导条件,在最佳诱导条件下大量表达,并利用镍层析柱纯化重组蛋白,用MTS法测定其生物学活性。结果表明,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出25ku的融合蛋白,表达产物主要以包涵体的形式存在,最佳的诱导剂浓度为0.1mM,最佳的诱导时间为4h;对表达产物的包涵体处理后,用镍琼脂糖凝胶FF纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上。通过透析除去部分尿素,复性后在体外利用MTS法检测其生物学特性,结果表明其仍具有较好的生物学活性,这为进一步大量制备和研究猪IL-2重组蛋白奠定了基础。     

猪IL-18在毕赤酵母中分泌表达条件的优化

采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中亚克隆出IL-18基因并完成了真核融合表达载体pPIC9K-IL-18的构建和IL-18在毕赤酵母中的表达,在此基础上从发酵时间、不同诱导型、pH值、诱导剂量和接种量等方面对重组基因工程菌的摇瓶发酵条件进行了优化,进一步探索了酵母菌表达猪IL-18的发酵工艺.结果表明,摇瓶发酵时,诱导最佳时间为72 h,甲醇最适浓度为20 g/L,最适pH范围为6.0~8.0,最适接种量1∶1.与单纯甲醇诱导相比,甘油/甲醇诱导后的表达量明显提高.     

藏獒犬IFNγ基因的克隆表达及其生物学活性测定

通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆IFNγ全基因,其大小为501bp,编码167个氨基酸,前23个AA为信号肽,与GenBank上发表的犬IFNγ((NM001003174.1)比较,序列的同源性为99.4%。构建了原核表达载体pET-30a-IFNγ,转化BL2L,IPTG诱导后表达约23Kd的重组蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化后,纯度达90%以上;利用抑制病毒噬斑法测定重组藏獒犬γ干扰素的生物学活性,结果显示纯化的蛋白具有一定的抗病毒活性,本研究结果为进一步研究犬γ干扰素的抗病毒活性奠定基础。     

论科学发展观指导下的水利水电工程管理探讨简

摘要;水是重要的自然资源,水利、水电工程是综合利用水资源发展国民经济的重要手段,是保障经济建设和人民生命财产安全的重要措施,是国家和人民的宝贵财富。在科学发展观的指导下,加强对水利、水电工程的管理,使其发挥更大作用,为经济发展和人民生活做出更大贡献,是新时期发展建设的重要课题。对此,本文做粗浅探讨。     

浅析水利水电工程施工项目管理简

随着我国现代化建设的迅速发展,水利水电工程项目越来越多,相关工程的结构类型也日趋多样化。为了提高建设水利水电工程的质量,必须加强政府对_Y-程质量的监管,努力维护国家和公众的利益,建立相关的施工项目管理方法来进行项目的施工管理。     

兰州市城区犬细小病毒病发病情况调查与分析

为了掌握兰州市城区犬细小病毒病的流行情况及特点,为有效防控犬细小病毒病提供依据,项目组对2015年10月至2016年9月兰州市城区甘肃农业职业技术学院宠物门诊、安居宠物门诊、伊宝康动物医院等十家宠物医院前来就诊的4 052只患犬进行了犬细小病毒病的诊断,经检测有1 028只患细小病毒病,对1 028只患犬进行了流行病学调查。结果表明:兰州市城区犬细小病毒病1岁以内的犬最易感,其中主要以1月龄到3月龄的幼犬最易感;公犬较母犬易感染;未免疫犬比免疫犬易感;一年四季均可发生,冬春季节发病率相对较高。     

猪白介素18基因在BHK细胞中的表达

将猪白介素18(Porcine interleukin18,PIL-18)基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,构建了重组表达质粒pEGFP-PIL-18,利用脂质体法转染BHK细胞,采用荧光显微镜实时观察和RT-PCR检测技术确定目的蛋白的表达情况.结果在转染重组质粒24 h4、8 h后的BHK细胞中均观察到绿色荧光,转染的BHK细胞经G418筛选14 d后,用RT-PCR法检测目的基因,并扩增到长576 bpd的目的cDNA片段。表明在BHK细胞中成功地表达了PIL-18与EGFP的融合蛋白,这为下一步建立稳定表达PIL-18的细胞系奠定了基础.     

藏獒犬白介素18基因的克隆及原核表达

通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆白介素18基因全长,其大小为582bp,编码194个氨基酸。与GenBank上发表的犬IL-18(NM001003305)比较,序列的同源性为100%,与犬、猫、猪,牛、羊、人的IL-18基因核苷酸同源性分别为100%、91.2%、91.1%、88.5%、89.3%、84.4%。系统进化树可以看出,藏獒犬基因与犬的亲缘关系最近,与猫的其次,与人是较远的。然后构建-IL18去信号肽的原核表达载体pET-30a-IL18,转化BL2L,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE分析表明,表达出25kd融合蛋白而且目的蛋白主要以包涵体的形式存在,westbloting验证表达的蛋白正确。     

水利工程防渗处理施工技术应用分析

本文结合工作经验，对常用的各种防渗处理方式、方法进行总结整理，并结合小型水利水电枢纽工程的现状提出当前适用性较高的防渗方法。