高职院校提高动物外科手术教学质量的途径和方法——以甘肃农业职业技术学院动物外科手术教学为例

高职院校如何进一步深化和升华教学改革,提高动物外科手术教学质量,是畜牧兽医专业教师需要深入研究和探索的一个重要课题。方法和手段、加强实训基地建设、加强师资队伍建设和加强精品网络资源共享课程建设等方面进行了探讨,以供参考。     

通过耐酸性改造在昆虫细胞中组装FMDV空衣壳结构

 【目的】口蹄疫病毒（FMDV）对酸很敏感,当pH值低于7时,二十面体对称的衣壳结构就会裂解成12S的五聚体。而昆虫细胞培养基的正常pH值在6.3左右,很难应用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中组装天然的FMDV空衣壳结构。本研究旨在通过耐酸性改造,应用杆状病毒表达载体在昆虫细胞中组装产生AsiaⅠ型FMDV空衣壳结构。【方法】应用定点突变技术改变VP3上的H140和H143为亮氨酸,以提高空衣壳对酸的耐受性。将改造和未改造的P12A基因和3C基因插入带双启动子的杆状病毒转移载体pFastBacTM Dual 中,通过在大肠杆菌内转座重组,获得重组杆粒,转染Sf 9细胞,获得两株表达FMDV全衣壳蛋白的重组杆状病毒Bac mP12A3C和Bac P12A3C。重组杆状病毒经增殖后感染High FiveTM细胞,进行目的蛋白的表达。【结果】通过Western blotting检测表明目的基因均获得表达,且衣壳蛋白被3C蛋白酶成功地加工裂解。双抗体夹心ELISA和免疫荧光检测结果表明表达蛋白主要集中在细胞膜上,且具有很好的抗原性。通过电镜观察到P12A基因改造的重组杆状病毒在昆虫细胞内产生了直径为25～30 nm的空衣壳结构,而P12A基因未改造的重组杆状病毒观察到很多直径小得多的结构。【结论】本研究首次用电子显微镜在昆虫细胞中观察到FMDV完整的空衣壳结构,为基因工程亚单位疫苗和新型诊断试剂的研发奠定了基础。     

浅析H7N9禽流感的预防与控制

H7N9禽流感最早在2013年3月末,在我国上海和安徽发现了3例病例,疫情的发生为社会带来了巨大的经济损失,同时也为人们的工作和生活带来了影响,本文分析了H7N9禽流感的预防和控制措施。     

规模化养猪场疑似猪丹毒病例的诊治

猪丹毒是由猪丹毒杆菌感染引起的一种以高热和皮肤上出现特异性疹块为特征的人畜共患病。本文针对规模化猪场急性死亡的育肥猪采用了病理剖检、细菌分离培养、动物试验和药敏试验诊断法,结合流行病学、临床症状及分离菌对头孢类药物、青霉素、阿莫西林高度敏感的特性,判定该猪场育肥猪死亡是由猪丹毒杆菌感染所致。并采用中西医结合治疗措施,取得了明显得治疗效果,疫情得到了有效地控制。     

舍饲滩羊食毛症的诊治

食毛症是绵羊多发的一种代谢紊乱疾病,发病率较高,给养羊业带来严重的危害。本文结合舍饲滩羊食毛症的临床症状和剖检变化,采用病原检查、鉴别诊断等综合诊断方法对该病做出初步诊断,对病羊采取补饲硫酸钠、手术切开等治疗措施,取得了明显的治疗效果,有效地防治了舍饲滩羊食毛症。     

Asia Ⅰ型FMDV全衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达与免疫活性分析

将AsiaⅠ型FMDV全衣壳蛋白P12A基因插入到带有蜂毒溶血肽信号序列的杆状病毒转移载体pMel-Bac中,构建重组转移载体pMel-P12A。然后将含有目的基因的转移载体与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒。以感染复数（MOI）10的重组病毒感染Sf9细胞,72h后收获细胞,经Western blotting、间接免疫荧光检测,结果表明P12A基因在昆虫细胞中获得表达,相对分子质量约82ku,与预测蛋白大小一致,且能被FMDV阳性血清所识别。免疫荧光检测表明表达蛋白主要集中在细胞膜部分。夹心ELISA检测结果表明一部分表达蛋白分泌至培养基中,而有一部分蛋白仍在细胞中未能分泌。表达蛋白加入等量佐剂乳化后免疫豚鼠,间接ELISA检测结果表明豚鼠免疫后15d即产生了特异性FMDV抗体。本研究为空衣壳的体外组装及基因工程亚单位疫苗的研究进行了有益的探索。     

"粮-中药-蚯蚓-肉羊"种养结合模式的研究与实践

本文选取定西市通渭县部分地区家庭养殖肉羊为样本,分析当前家庭农场养殖现状;探索研究适合当地发展的"粮-中药-蚯蚓-肉羊"种养结合生态养殖循环模式,分析种养结合养殖模式效益,从理论上深化生态养殖模式的认知范畴,丰富关于生态循环养殖模式的研究,为欠发达地区的肉羊养殖提供一个新思路和新方法,减少农业面源污染,降低种植与养殖的生产成本,达到种养增收的目的.     

口蹄疫病毒VP31基因在昆虫细胞中的表达

研究了口蹄疫病毒(FMDV)VP31基因在昆虫细胞中的表达.结果表明:利用重组杆状病毒在昆虫细胞中成功表达了AsiaⅠ型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP31基因,目的基因经亚克隆插入到含有一段蜂毒溶血肽序列的转移载体pMelBac B中,构建出穿梭质粒pMel-VP31.将含有目的基因的穿梭载体与线性化的杆状病毒骨架共转染昆虫Sf9细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.重组病毒经扩增后感染Sf9细胞,用Western-blot和间接夹心ELISA检测,证实VP31蛋白获得了表达.