肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果研究

试验旨在研究新型肠杆菌肽对不同来源的10株大肠杆菌和10株沙门氏菌的抑菌效果。采用宏量肉汤法测定肠杆菌肽对不同菌株的最低抑菌浓度(MIC),从而确定大肠杆菌和沙门氏菌对肠杆菌肽的敏感性,并分析肠杆菌肽在人工胃液和肠液中的稳定性。结果表明:不同大肠杆菌和沙门氏菌菌株对肠杆菌肽的敏感性不同,其MIC均为64μg/mL;肠杆菌肽的抑菌效果不受人工胃液和肠液影响,其MIC为128μg/mL,效果优于土霉素钙;且肠杆菌肽对益生菌无抑制作用。综上可知,抗菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌的抑制效果较好。     

河南省樱桃谷鸭乙型肝炎病毒全基因组克隆与序列分析

对河南省樱桃谷鸭主产区信阳、新郑、焦作三地628份樱桃谷鸭血清样本应用PCR技术进行鸭乙型肝炎病毒（DHBV）检测,并将三地DHBV阳性样本各挑选1份进行DHBV全基因的扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,信阳、新郑、焦作三地樱桃谷鸭DHBV自然携带率分别为10.5%、8.9%、17.6%;3株DHBV基因组全长分别为3 021、3 027、3 024bp,均含有编码P、S和C蛋白的3个开放阅读框,各开放阅读框氨基酸同源性比较显示差异显著的区域位于P蛋白。序列分析显示,3株DHBV河南株核苷酸同源性为89.8%~93.9%,与参考株为89.4%~99.5%。遗传进化分析及P蛋白关键位点分析结果表明,信阳分离株为西方基因型,其余2株为中国基因型。本试验掌握了河南省樱桃谷鸭主产区DHBV自然感染情况,并成功克隆了3株樱桃谷鸭DHBV全基因序列,为该病毒的进一步研究提供了有益信息。     

日粮中添加天蚕素抗菌肽对降低断奶仔猪饲用抗生素使用量的影响

高剂量抗生素在畜牧业上的使用,特别是饲用抗生素为畜牧生产带来了如细菌耐药性、抗生素药物残留等一系列危害。试验旨在通过考察在日粮中添加天蚕素抗菌肽后断奶仔猪生长性能和抗病力变化来探讨日粮中添加天蚕素抗菌肽对降低断奶仔猪饲用抗生素的超剂量使用的影响。选取35日龄的健康断奶仔猪243头,随机分为3组,对照组(正常剂量抗生素组:基础日粮+1 0%杆菌肽锌500mg/kg+1 0%硫酸粘杆菌素400mg/kg)、试验1组(天蚕素抗菌肽组:基础日粮+1 0%杆菌肽锌500mg/kg+1 0%硫酸粘杆菌素400mg/kg+天蚕素抗菌肽300mg/kg)、试验2组(高剂量抗生素组:基础日粮+1 0%杆菌肽锌800mg/kg+1 0%硫酸粘杆菌素1 000mg/kg)。试验周期35d。试验结果表明,断奶仔猪日粮中天蚕素抗菌肽与抗生素配伍使用能具有较好的促生长与提高机体免疫效果,该效果与高剂量抗生素的促生长和提高免疫力效果相当,甚至略优于高剂量抗生素的使用。     

抗菌肽与喹乙醇体外抑菌效果的比较及对断奶仔猪生产性能的影响

为研究肠杆菌肽与喹乙醇体外抑菌效果以及替代喹乙醇对断奶仔猪生长性能的影响,体外试验选用大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌为指示菌测定抗菌肽与喹乙醇的抑菌效果。体内试验挑选28日龄左右,144头健康断奶仔猪,分为2个处理组,每组4个重复,每个重复18头,研究两组之间生产性能和腹泻率的差异。体外试验结果显示,以大肠杆菌ATCC25922为指示菌株,0.5%肠杆菌肽与50%喹乙醇最低抑菌浓度均为400μg/mL,而相对于沙门氏菌CVCC50094,0.5%肠杆菌肽的最低抑菌浓度低于50%喹乙醇最低抑菌浓度。体内试验结果表明,300g/t抗菌肽替代喹乙醇后,日采食、日增重有所增加,腹泻率明显降低,肠道中大肠杆菌数量降低。     

天蚕素抗菌肽对保育猪生长性能的影响

抗菌肽（Antimicrobial Peptide）又称抗菌生物肽或肽抗菌素，在生物体内广泛存在，是生物体用来抵御外来入侵病原体或癌细胞的一类小分子蛋白质，具有分子量小、等电点高、热稳定性好、广谱抗菌和快速杀菌等特点，对某些真菌和耐药性细菌也具有杀灭作用。抗菌肽作用机制缺乏特异性，且与抗生素不易产生交叉耐药性，在正常用量下不必考虑在畜禽产品中的残留问题，这些优点扩大了它的使用范围，使之成为一种替代抗生素的理想产品。     

枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的发酵工艺优化及培养基筛选的研究

研究旨在探索枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的最适发酵条件和最适培养基组成,以期提高发酵液中sublancin含量。试验先通过单因素试验筛选出最适发酵条件,确定发酵培养基需要的无机盐、碳源、氮源,再通过正交试验、最陡爬坡试验、Box-Behnken设计的响应面分析方法确定最适发酵培养基组成。结果表明：枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的最适发酵条件为菌种接种量1.0%、发酵温度37℃、发酵液初始pH 7.0;最适发酵培养基为K₂HPO₄ 5 g/L、KH₂PO₄ 5 g/L、MgSO₄ 10 g/L、可溶性淀粉30.2 g/L、蛋白胨23.6 g/L、玉米浆18.2 g/L;优化后sublancin产量由756 μg/mL提到1 581 μg/mL,是优化前的2.09倍。综上所述,本研究所筛选的最适发酵条件和最适培养基可为枯草芽孢杆菌YT168-6菌株工业化生产sublancin提供技术参考。     

饲粮中添加枯草芽孢代谢物对肉鸡生长性能及肠道健康的影响

为研究饲粮中添加枯草芽孢代谢物对肉鸡生长性能、肠道组织形态和盲肠微生物多样性的影响,试验选择612只1日龄体重相近[（37.10±0.10）g]的健康快大型白羽肉鸡,随机分为3个处理组,每处理组6个重复,每个重复包括34只肉鸡。对照组（CG）为基础饲粮+200 g/t枯草芽孢杆菌,试验组1（EG1）和试验组2（EG2）分别在基础饲粮中添加150 g/t和200 g/t枯草三十七肽,试验期42 d。结果表明：（1） 与CG相比,EG2的出栏均重、平均日增重（ADG）和欧洲效益指数（EPI）均显著提高（P < 0.05）。（2） 与CG相比,EG1和EG2的空肠绒毛高度显著提高（P < 0.05）,EG2的空肠绒隐比（V/C）显著提高（P < 0.05）,EG1的空肠、回肠和盲肠及EG2的回肠和盲肠V/C提高9.69% ~ 59.19%（P > 0.05）。（3） 与CG相比,EG1和EG2盲肠中产短链脂肪酸的瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）和毛螺旋菌科（Lachnospiraceae）相对丰度提高,产乙酸、乳酸等代谢产物的布劳特氏菌属（Blautia）相对丰度也提高|EG1的物种多样性显著高于CG（P < 0.05）。综上所述,饲粮中添加枯草三十七肽可显著增加肉鸡出栏均重、平均日增重和欧洲效益指数,提高肠道绒毛高度和绒隐比,改善盲肠微生物多样性,增强肉鸡的消化吸收能力,从而提高肉鸡的生长性能,改善肠道健康。 [关键词] 肉鸡|枯草三十七肽|生长性能|肠道组织形态|盲肠微生物多样性     

两步化学转化法构建猪圆环病毒2型ORF2基因重组腺病毒质粒

为了利用化学转化法快速构建携带猪圆环病毒2型ORF2基因的重组腺病毒质粒以便获得表达该基因的重组腺病毒,首先把骨架质粒pAdeasy-1通过化学法转化到氯化钙法制备的E.coli BJ5183感受态菌中,通过含氨苄青霉素的LB平板筛选出含骨架质粒的阳性菌BJ5183/p,再次用化学法把插入有猪圆环病毒2型ORF2基因的穿梭质粒rpShuttle-CMV-276经PmeⅠ酶切线性化后转化到BJ5183/p感受态细胞中进行同源重组,再在含卡那霉素的LB平板上培养,筛选出卡那霉素抗性菌进行质粒抽提纯化,酶切并电泳鉴定,获得重组阳性质粒rPAD-276.结果表明,运用2步化学转化法构建重组腺病毒质粒是一种简便、快捷且容易操作的方法.     

鸭乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速、特异的鸭乙型肝炎病毒(DHBV)SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,设计一对引物扩增DHBV基因组,将其克隆到pMD-18-T载体上,然后以该重组质粒为模板,选择DHBV S基因保守序列设计一对定量PCR引物,构建标准曲线,进行特异性、敏感性和重复性试验,并用所建立的方法评价拉米夫定和阿德福韦酯在鸭体内对DHBV-DNA复制的抑制效果。结果表明:该方法能特异性检测到DHBV;相关系数为1.00,扩增效率为105%;敏感度高,最低检测限为70个拷贝。拉米夫定和阿德福韦酯对DHBV感染后鸭外周血DHBV-DNA的复制均有很好的抑制效果,但停药后会出现轻度"反跳"现象。建立的DHBV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有特异、灵敏、快速等优点,可用于抗HBV药物的评价。     

新发鸡心包积液综合征研究进展

<正>1历史和分布在上世纪八十年代初,在南亚的巴基斯坦、印度和南美洲的肉鸡中暴发了一种临床症状与包涵体肝炎相类似的疾病。这种疾病的主要特点是形成心包囊积液和肝炎,因此给这个病命名为心包积水症。该病最早在巴基斯坦卡拉奇附近的安加拉哥特的3~5周龄的肉鸡中发现,因此在巴基斯坦普遍称为"安加拉病"。从此以后,该病蔓延到了伊拉克、墨西