鸡舍环境中病源性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

目的:从鸡舍的地表面分离大肠杆菌,试验研究大肠杆菌分离株的特征及其耐药性,为棚养鸡舍环境中大肠杆菌病的预防、控制和治疗提供资料。方法:从鸡舍表面和鸡舍地表下10cm土壤采集样本,采用分离培养、选择性培养、生化鉴定等方法,对分离的大肠杆菌进行鉴定;并通过药敏试验,了解大肠杆菌分离株对药物的耐药性。结果:本次从鸡舍表面和鸡舍地表下10cm土壤中采集的样本分离到的大肠杆菌对诺氟沙星、多种氨基甙类抗生素、红霉素、阿奇霉素和司帕霉素敏感,但对β内酰胺类的青霉素、甚至头孢唑啉、头孢哌酮却极不敏感。结论:从棚养鸡舍分离到的大肠杆菌,已对部分常规使用的药物产生了耐药性。     

罗非鱼无乳链球菌环介导等温扩增(LAMP)检测技术的建立及应用

针对罗非鱼无乳链球菌Sip基因建立了LAMP检测方法,并对野外样本进行了无乳链球菌的调查研究。结果表明,目标Sip基因可在63℃40 min内被LAMP检测到,比PCR快约2 h,其DNA检测最低浓度为3.55×10~(-5) ng/μL,灵敏度比PCR高100倍,且对参考细菌无扩增。野外样品检测结果表明,运用LAMP检测技术对GBS的检出率为81.3%,比PCR高约20.0%。应用LAMP和PCR分别检测健康罗非鱼GBS检出率4.4%和2.2%,检测池塘水样品GBS检出率分别为10.0%和6.7%。     

小鼠感染肝片吸虫早期IL-4/IFN-γ及M2巨噬细胞标记分子的变化

为弄清肝片吸虫感染早期的主要细胞免疫类型及选择性激活巨噬细胞(M2或AAMΦ)标记分子的变化,本试验采用肝片吸虫囊蚴为感染源,经口分别感染雌性BALB/c野生型小鼠,运用特异性PCR鉴定成功感染小鼠后用间接ELISA对腹腔中IL-4和IFN-γ的水平进行测定,并对细胞因子IL-4、转录因子GATA3和M2的标记蛋白Relm a、Ym1分子的mRNA进行荧光定量PCR检测.结果显示,在感染后1,3,5,7周,从所获取肝脏组织中扩增的ITS2片段条带清晰,大小正确,测序后确定为肝片吸虫ITS2序列,表明肝片吸虫感染成功.对腹腔中IL-4和IFN-γ的水平测定表明感染组IL-4在感染后1,3,5周比对照组的显著增加(P=0.013,P＜0.01,P=0.02),但在第7周时无显著差异.IL-4的水平显著高于IFN-γ(P=0.011),而在第7周两者间无显著差异；对腹腔中IL-4、GATA3、Relm α和Ym1 mRNA水平的测定结果表明,感染后IL-4和GATA3 mRNA水平在第3周达到最高峰；于感染后1,3,5,7周,IL-4和GATA3 mRNA水平都分别显著高于对照组(IL4:P=0.01,P=0.012,P=0.023,P=0.014;GATA3:P=0.011,P＜0.01,P=0.032,P=0.014),但IL-4和GATA3间无显著差异；Relm α和Ym1mRNA水平都分别显著高于对照组(Relm α:P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01,P=0.011;Ym1:P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01,P=0.012),且二者间无显著差异,并随时间推移mRNA水平都呈下降趋势,于第7周达到最低水平.本研究成功利用肝片吸虫-小鼠模型研究蠕虫感染早期细胞免疫类型及M2标记分子的变化,发现在肝片吸虫感染小鼠早期主要引起Th2为主的细胞免疫.IL-4和M2巨噬细胞标记分子Relm α和Ym1在感染后1,3,5,7周都显著增加且具有相似的变化趋势,但nelmα和Ym1在第1周的高表达可能受诸多因素的影响还有待深入研究.     

兴安县柑桔冻害后的挽救措施

受北方强冷空气南下影响,1999年12月21日-27日兴安县境内气温骤降近20℃,23日极端最低气温达-53℃,地面温度-75℃、并连续7天出现霜冻,个别地方出现结冰、致使全县8000ｈｍ2柑桔受到严重冻害。1冻害情况调查11　受冻情况:经调查,全县受冻柑桔8000ｈｍ2,其中,中熟温州柑4732ｈｍ2,早熟温州柑1416ｈｍ2、柑1235ｈｍ2,橙450ｈｍ2、柚167ｈｍ2。冻害程度一级占242%,2-3级占547%,3级以上至4级占211%,橙和柑受冻比较严重。12　同一果园,品种不同,冻害程度不同。调查道冠村委果场,柑8000株,橙3000株,早熟温州柑5000株、中熟温州柑4000株,其冻…     

常见猪腹泻病的鉴别诊断及综合防治

首先需要对腹泻病的概念澄清一下。腹泻只是一个征候群，并不是一种独立的病，引起腹泻的原因极其复杂，如细菌、病毒、寄生虫、营养和中毒等因素都会导致猪出现腹泻症状。     

附红细胞体生物学特性及检测、防制研究进展

附红细胞体病是一种血液性疾病。以前认为是由立克次氏体目(Rickettsiales)的附红细胞体属(Eperythrozoon)附红细胞体引起，Rikihisa,Y，Messick,J．B．Neimark，H．等比较了16srRNA基因序列，结果显示附红细胞体更接近巴尔通体属，因此建议重新将其与巴尔通体一起分类到支原体属。Anonymus，Neimark，H，Messickd．，B等对附红细胞体进     

大片吸虫组织蛋白酶L全长序列的获取及其生物信息学分析

根据文库载体序列与原组织蛋白酶表达序列标签（EST）设计引物,以大片吸虫cDNA文库为模板,进行Touchdown PCR与梯度PCR相结合的扩增反应,扩增产物克隆人pMD18-T载体。经鉴定后测序,并采用生物信息学技术对序列进行开放阅读框（ORF）、编码氨基酸序列、蛋白质同源性比较、二级、三级结构等分析;结果所获序列全长990bp,编码330个氨基酸,分子量36771.2u,等电点5．44;具有较明显的螺旋、片层和无规卷曲等二级结构,α螺旋占17．3％,β折叠占27．0％,无规卷曲占55．8％;具有2个较明显的跨膜区和2个疏水区,未发现明显的信号肽和糖基化位点;氨基酸序列同源性比对显示其属于半胱氨酸家族;三级结构同源建模预测显示其与组织蛋白酶K（PDB number 2f7dA）有49％的一致性。     

犬弓首蛔虫卵黄原蛋白基因的克隆及表达分析

为克隆犬弓首蛔虫(T.canis)的卵黄原蛋白(YP)基因,本研究根据T.canis cDNA文库中的EST数据,采用RT-PCR方法扩增T.canis的YP基因(TcF-YP),并克隆至pGEM-T载体中进行测序。测序结果表明,TcF-YP基因片段大小为492 bp,编码163个氨基酸残基。同源分析显示,TcF-YP基因与猪蛔虫的卵黄原蛋白基因同源性最高,为78%。同时对该基因在T.canis雌虫、雄虫和雌虫各组织的表达谱进行研究,结果显示TcF-YP基因只在T.canis雌虫中高量表达,是雌虫特异的基因。对雌虫各组织的基因表达谱分析显示TcF-YP基因在子宫和肠中高量表达,在卵巢中有极微量的表达。本实验为TcF-YP基因的功能研究奠定了基础。     

红提和黑提葡萄的栽培要点

我县于 1 998年冬引入数万株美国红提和黑提葡萄试种 ,为使广大果农掌握好提子的种植技术 ,尽快获得高效益 ,现将其管理技术介绍如下 ,仅供参考。1 整形修剪的方法　①多主蔓自由扇形整枝。整形修剪方法是 :种下第一年培养出 2— 4个茎粗 0 7ｃｍ以上 ,长 1ｍ左右的主蔓。第二年单立架 ,要培养出 4条主蔓 ,双立架可培养出 6— 8条主蔓。夏季管理时 ,对头年选留的主蔓上抽出的新梢 ,如有花序时选择少数健壮的留 3— 5个 ,其余的花序疏掉。冬剪时主蔓延长枝要按预定长度剪截 ,位于第一道铁丝上的新梢均留 2— 3个芽短截 ,作为结果母枝。第三…