猪瘟病毒NASBA-RT-LAMP快速检测方法的建立

本研究基于核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)和反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种针对猪瘟病毒的,快速、灵敏、特异的两步法检测技术。该方法的检测灵敏度与反转录巢式PCR(RT-NestPCR)相当,最低能检测出46 pg/μL的病毒RNA。该方法的建立为猪瘟病毒的快速诊断提供了新思路。     

广东、四川省和重庆地区鸭传染性浆膜炎流行病学调查

从广东省、四川省和重庆市的规模化养鸭场，收集临床表现为纤维素性心包炎、肝周炎或气囊炎的病死鸭进行细菌分离，结果共分离到34株细菌，经鉴定，均为鸭疫里默氏杆菌。利用玻片凝集试验对分离到的34株鸭疫里默氏杆菌进行血清型鉴定，其中AF型20株，占58．8％．DZ型4株。占11．8％，BSY型1株．占2．9％，另有9株目前不能确定血清型，这9株是否属于同一血清型或不同血清型有待下一步研究。     

特异性抗体对新城疫疫苗免疫原性的影响研究

对特异性抗体对新城疫活疫苗和灭活疫苗免疫原性的影响进行了研究。鸡源抗体与Ⅰ系苗制备的复合物(ND-IC)对有、无抗体的1,28日龄雏鸡安全,能诱导产生良好的免疫应答,免疫14d后获得完全的攻毒保护;18日龄鸡胚免疫接种后不影响孵化率和8日龄内雏鸡的死亡率,14日龄小鸡血清抗体滴度在5log2(HI)左右及获得80％～100％的攻毒保护率。特异性抗体与灭活病毒混合后制备的油佐剂苗免疫1,28日龄鸡,血清抗体水平高于传统油佐剂苗,且免疫原性不受母源抗体的影响。以上结果表明,鸡源特异性抗体能提高Ⅰ系苗的安全性,而不影响免疫原性;对灭活抗原具有免疫增强作用。     

支气管败血波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌同时检测的PCR方法的建立

在已经建立的支气管败血波氏杆菌(Bb)、多杀性巴氏杆菌(Pm)、副猪嗜血杆菌(HPS)的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件的优化,成功建立在一个循环条件下同时检测3种细菌的PCR实验室诊断方法。利用一次PCR即可同时扩增出Bb的237bp、Pm的457bp,和HPS的821bp的特异性片段。该方法可检测到1.34×103cfu1/mLBb,1.6×102cfu/mLHPS,2.6×102cfu/mLPm。该方法的敏感性与已报道的各单项PCR方法的敏感性一致。该方法的建立对临床上进行这3种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。     

重庆和四川地区鸭疫里默氏杆菌流行动态研究

对2004年9月至2005年5月收集的鸭疫里默氏杆菌感染浆膜炎病例进行了流行病学调查，结果分离到57株鸭疫里默氏杆菌，经凝集试验和琼脂扩散试验证明分属8个不同的血清型，其中AF、BSY、DZ是主要血清型。分离菌株对雏鸭有很强的致病性；各地分离菌株表现一致的形态特征和相似的生理生化特性；耐药谱很广，但对头孢唑啉、环丙沙星、丁氨卡那、利福平为高度敏感。     

特异性抗体对新城疫疫苗免疫原性的影响研究

对特异性抗体对新城疫活疫苗和灭活疫苗免疫原性的影响进行了研究.鸡源抗体与Ⅰ系苗制备的复合物(ND-IC)对有、无抗体的1,28日龄雏鸡安全,能诱导产生良好的免疫应答,免疫14 d后获得完全的攻毒保护;18日龄鸡胚免疫接种后不影响孵化率和8日龄内雏鸡的死亡率,14日龄小鸡血清抗体滴度在5 log 2(HI)左右及获得80%～100%的攻毒保护率.特异性抗体与灭活病毒混合后制备的油佐剂苗免疫1,28日龄鸡,血清抗体水平高于传统油佐剂苗,且免疫原性不受母源抗体的影响.以上结果表明,鸡源特异性抗体能提高Ⅰ系苗的安全性,而不影响免疫原性;对灭活抗原具有免疫增强作用.     

广东、四川两省规模化肉鸭养殖场病原菌调查研究

采取流行病学、临床症状、病理解剖、病原分离与墼定系列方法,对2008年5月至2008年11月之间,从广东和四川两省抽样调查的鸭病病原菌进行了研究。从2省6个市县的11个规模化养殖场,采集病死鸭头、肝等病料,接种巧克力LB平板和麦康凯培养基,共获得20株细菌。通过生化反应等系统鉴定,判为大肠杆菌的9株,占42．8％;鸭疫里默氏杆菌的11株,占57．2％。采用玻板凝集实验检测,11株鸭疫里默氏杆菌属于AF型的5株（占45．5％）、DZ型1株（占9．1％）、5株（45．5％）未能定型。