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1.
旨在筛选并鉴定与鸭C4结合蛋白(C4b-binding protein,C4BP)互作的鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,R.anatipestifer)外膜蛋白。本研究将保存的R.anatipestifer复苏培养,提取外膜蛋白,以鸭C4BPα作为诱饵蛋白进行His pull-down及LC-MS/MS蛋白质谱鉴定,筛选与鸭C4BP可能发生互作的候选外膜蛋白;将各候选蛋白进行克隆、原核表达,免疫小鼠制备多克隆抗体,利用Far-western blot验证与鸭C4BP发生相互作用的R.anatipestifer外膜蛋白;针对候选蛋白及C4BPα各功能结构域进行克隆及原核表达,利用Far-western blot鉴定候选蛋白及与C4BP的相互作用位点;利用ELISA对补体因子C3b、C4b及C4BP在R.anatipestifer表面沉积情况进行测定,验证候选蛋白的功能。结果显示,经His pull-down及LC-MS/MS蛋白质谱分析,共筛选出3个与鸭C4BP发生相互作用的R.anatipestifer外膜蛋白,即ECE-1、SODs和Omp62;成功获得3个外膜蛋白多克隆抗体,ELISA检测3种多克隆抗体效价均超过1∶6 400,Western blot检测3种多克隆抗体可以与重组蛋白发生特异性反应;Far-western blot结果显示,仅ECE-1能够与C4BP发生相互作用,并且只有ECE-1全长能与鸭C4BP相互作用,而鸭C4BP与ECE-1的相互作用区域位于C4BPα的SCR 2和SCR 3;当健康鸭血清稀释度为3.125%时,ECE-1抗体能够显著促进补体因子C3b、C4b在R.anatipestifer表面的沉积作用(P<0.05),当健康鸭血清稀释度为6.25%时,ECE-1抗体能够显著抑制C4BP在R.anatipestifer表面的沉积作用(P<0.05)。本研究成功筛选并鉴定出1个与C4BP互作的R.anatipestifer外膜蛋白ECE-1,为进一步阐明R.anatipestifer免疫逃逸机制奠定了基础。 相似文献
2.
为研究鸭疫里默氏杆菌明胶酶对雏鸭免疫功能的影响,本研究将2000 u明胶酶经颈静脉注射10日龄健康鸭建立动物模型,测定了模型动物的部分免疫指标。结果显示,注射明胶酶的雏鸭外周血T淋巴细胞非特异性酯酶阳性率、白细胞杀菌指数、红细胞C3bR花环率、血清溶血和杀菌活性、脾淋巴细胞的增殖和分泌IgG能力等显著低于阴性和空白对照组(p0.05或p0.01);明胶酶可导致雏鸭脾脏严重损害,脾中央动脉内皮细胞肿胀、脱落,淋巴细胞变性、坏死及细胞核膜不规则与染色质周边浓集。结果表明,鸭疫里默氏杆菌明胶酶对雏鸭的免疫功能具有损害作用。 相似文献
3.
本文报道重庆某集约化种猪场爆发流产、死产胎儿中伪狂犬病毒(RB9901)和鹦鹉热衣原体(CR99株)分离鉴定结果,伪狂犬病病毒RB9901株能引起MDBK细胞典型细胞病变,被伪狂犬病病毒Fa株标准阳性血清中和,能引起家兔奇痒及死亡。鹦鹉热衣原体CR99株在鸡胚卵黄囊中生长良好,对青霉素敏感,对磺胺嘧啶不敏感,能引起妊娠豚鼠注产。 相似文献
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5.
采用常规资料、多普勒雷达资料、自动站资料,对2010年8月19~22日铁岭地区出现的暴雨到大暴雨天气过程进行诊断分析。结果表明,受高空槽、副热带高压后部深厚的暖湿气流和切变线共同影响,铁岭地区出现了暴雨到大暴雨天气;这次过程主要影响系统是地面气旋倒槽;700和850 hPa切变线、急流使中低层辐合加强,形成了较强的动力抬升和水汽辐合;铁岭地区处于强而宽的假相当位温锋区中,位势不稳定的建立是造成此次强降水的必要条件。 相似文献
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7.
柑桔害虫—海南油桐尺蠖的发生及防治 总被引:4,自引:0,他引:4
柑桔害虫——海南油桐尺蠖的发生及防治张格成李继祥(中国农科院柑桔研究所·重庆市·630712)我国危害柑桔的尺蠖,据作者等整理有9种,近20多年来,在广东、广西、福建、重庆等地先后大发生危害严重的有海南油桐尺蠖(Bugurasuppressariab... 相似文献
8.
腐植酸是一种结构复杂的有机高分子聚合物,类似激素物质。具有较高的生物活性,在提高果树产量和抗病力等方面的效应已被许多研究所证明。在果树幼果期或果实膨大期喷施0.01%-0.05%腐植酸溶液2-3次,能促使果实提早成熟,增加糖分,在18-30℃气候条件下喷施的效果最好。赵瑞英(1989)报道:在17年生温州安彬的花前、果实膨大期和秋梢抽发期与11月上旬,株施腐植酸混合肥刚、P‘K各240)4000g,果实可溶性固形物较同等的无机复合肥高0.5%,比饼肥高0.3%,产量分别比此二种肥料增加五.5%一33%和22.2%-~-.4%。且秋消抽… 相似文献
9.
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