不同生长期木薯叶片的品质比较分析

为提高木薯副产物综合利用率，以‘SC9’、‘SC12’、‘SC6068’、‘热引1 号’4 个食用木薯品种的叶片为研究对象，比较分析幼叶、嫩叶、老叶3 个生长期，不同脱氰处理对其氢氰酸、总黄酮、蛋白质等品质指标的影响，并利用SAS系统进行主成分综合评价。结果表明，烘干处理后叶片的营养损失较少，但氰化物含量极显著高于食品安全标准；70℃水浴处理后氰化物含量在食品安全范围内，但总黄酮含量急剧降低。从品种和叶片生长期各指标看，品种间和不同生长期间均存在显著差异，其中‘SC6068’叶片总黄酮最高，达31.663 mg/g。经主成分综合评价发现，从生育期看，4个品种嫩叶烘干处理优于70℃水浴处理，但氰化物含量偏高；从品种看，‘SC12’和‘SC6068’2 个品种烘干处理优于70℃水浴处理，其综合评价值F1分别是2.5892、2.5272，可考虑将其作为食品和抗氧化活性物质资源化开发利用。总之，本研究表明不同木薯品种叶片加工利用方式与叶片黄酮含量和氰化物含量密切相关，直接干燥对黄酮类物质的影响较小，适用于发酵型饲料加工利用；而70℃水浴处理叶片氰化物含量较低，适用于食品原料加工。     

木薯叶片中黄酮醇类物质的提取与检测

【目的】以木薯叶片为试材,对木薯叶中芦丁、烟花苷、槲皮素和山奈酚的提取和检测方法进行了探索和优化。【方法】在70℃条件下,以40%(芦丁、烟花苷)和80%(槲皮素、山柰酚)的乙醇水溶液,料液比1/75(g/mL)超声提取30 min;HPLC分析四种黄酮醇时,流动相以甲醇0.2%的磷酸水溶液进行二元梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速为0.8 mL/min,柱温为40℃。【结果】可有效提取和分离木薯叶片中芦丁、烟花苷、槲皮素;4种黄酮醇类物质线性关系良好,相关系数(R~2)0.9992,检出限为0.02~0.10μg/mL;方法的精密度、重复性和稳定性的标准偏差(RSD)都低于4.00%;样品的加标平均回收率为90.81%~99.83%,方法的准确度较好,RSD2.84%。对三个木薯品种不同生育期的叶片中4个黄酮醇含量进行测定,其含量呈现嫩叶期幼叶期成熟叶的趋势。【结论】该提取和检测方法简单、准确,重复性好,能实现不同生育期和不同品种木薯叶中4种黄酮醇类物质的同时测定。     

基于转录组测序的油梨 EST-SSR 引物开发

利用转录测序技术,开发油梨表达序列标签-简单重复序列（EST-SSRs）,为 SSR 标记在油梨种质资源鉴定、 品种选育及遗传连锁图谱构建奠定基础。采用 Illumina 二代测序的技术,共获得 37 639 条无冗余的序列,对其进行 SSR 搜索,共获得 6 419 条简单序列重复（SSR）。利用 Primer 3.0 软件设计 SSR 引物,并以 11 份油梨种质筛选多态性引物。 基于转录组序列开发出的 EST-SSR 的分布频率为 17.05%。在油梨 EST-SSR 中,单核苷、二核苷和三核苷的重复占主 导,占总数的 99.07%。单、二、三核苷酸重复单元分别占总 SSR 的 37.47%、31.80%和 29.80%;出现频率最高的二核 苷酸重复基元是 AG/CT,占总数的 29.15%,出现最高的三核苷酸重复基元为 AAG/CTT,占 12.01%。随机选择 315 个 SSR 位点合成引物,经 11 份油梨种质筛选鉴定,227 对引物可扩增获得产物,有效扩增率为 72.06%;其中 34 对引物 表现出良好多态性,占有效引物的 12.78%,占总引物的 10.79%。在 34 对多态性引物中,每对引物扩增等位基因数 2~12 个。利用高通量测序开发 SSR 引物有较好的实用性,开发获得的 34 个具有多态性的油梨 SSR 标记可用于研究油梨及 其相关近缘物种的遗传变异。     

基于转录组测序的油梨 EST-SSR 引物开发

利用转录测序技术,开发油梨表达序列标签-简单重复序列（EST-SSRs）,为 SSR 标记在油梨种质资源鉴定、品种选育及遗传连锁图谱构建奠定基础。采用 Illumina 二代测序的技术,共获得 37 639 条无冗余的序列,对其进行 SSR搜索,共获得 6 419 条简单序列重复（SSR）。利用 Primer 3.0 软件设计 SSR 引物,并以 11 份油梨种质筛选多态性引物。基于转录组序列开发出的 EST-SSR 的分布频率为 17.05%。在油梨 EST-SSR 中,单核苷、二核苷和三核苷的重复占主导,占总数的 99.07%。单、二、三核苷酸重复单元分别占总 SSR 的 37.47%、31.80%和 29.80%;出现频率最高的二核苷酸重复基元是 AG/CT,占总数的 29.15%,出现最高的三核苷酸重复基元为 AAG/CTT,占 12.01%。随机选择 315 个SSR 位点合成引物,经 11 份油梨种质筛选鉴定,227 对引物可扩增获得产物,有效扩增率为 72.06%;其中 34 对引物表现出良好多态性,占有效引物的 12.78%,占总引物的 10.79%。在 34 对多态性引物中,每对引物扩增等位基因数 2~12个。利用高通量测序开发 SSR 引物有较好的实性,开发获得的 34 个具有多态性的油梨 SSR 标记可用于研究油梨及其相关近缘物种的遗传变异。     

bukUV-C诱导对花生植株白藜芦醇及其衍生物的影响

白藜芦醇是多种植物中的抗病因子。采用高效液相色谱方法(HPLC),对紫外线辐射后花生植株不同组织部位中白藜芦醇及其衍生物含量进行了检测,系统地比较了花生不同组织部位白藜芦醇及其衍生物的时空含量分布。研究结果表明,紫外线辐射30min,在室温下(25℃)完全避光中放置,可明显提高花生植株中白藜芦醇及其衍生物含量。其中,花生根部Res及其衍生物对UV-C辐射诱导的敏感性远高于茎部和叶片,经紫外处理42h后,花生根部Res含量高达124.47μg/g,是对照的104.55倍。     

银合欢种子研究进展

随着农业生产对银合欢种子需求的增加,确保银合欢种子的质量成为首要问题。综述近年来对银合欢种子成分、种子萌发、种子保存和种子健康等方面的研究概况,并对银合欢种子研究中存在的问题提出了展望。     

木薯粉及制品中高灵敏度AFB1快速检测方法研究

【目的】基于酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测原理,建立高灵敏度的直接竞争法检测木薯粉及其制品中的黄曲霉毒素B₁（AFB₁）,为木薯食品安全提供技术支持。【方法】通过对AFB₁抗原结构改造、免疫和细胞融合等过程获得抗原抗体,建立高灵敏度检测方法,并进行木薯粉及其制品样本的实例验证。【结果】制备的AFB₁抗原和抗体,其抗体亚型均为IgG₁,灵敏度最高的3F2细胞株产生的抗体对黄曲霉毒素G₁、G₂和B₂交叉反应率分别为21.4%、1.9%和8.8%,且对其他毒素类无交叉反应,建立的ELISA线性区间为0.02~0.48 μg/kg,半数抑制浓度（IC₅₀）为0.047 μg/kg,标准方程为y=-3.074x-4.3066（R2=0.9978）。以35%甲醇水溶液作为标准品稀释液,木薯食品原料用70%甲醇水溶液加0.2 g NaCl作为提取液,含油脂的木薯糕点用70%甲醇水溶液作为提取液,所有样本均为10倍稀释,检测限0.2~4.8 μg/kg,样品添加回收率81.5%~120.0%,变异系数均小于8.5%。应用验证试验表明,自建ELISA试剂盒对96份样本检出19份阳性样本,购买试剂盒检出7份阳性,大于2.0 μg/kg的样本检测结果完全符合,自建ELISA试剂盒方法灵敏度优于购买的ELISA试剂盒。【结论】本研究建立的直接竞争ELISA方法灵敏度高,操作简单,可广泛应用于木薯粉及其制品样本中AFB1的快速测定。     

银合欢种子研究进展

随着农业生产对银合欢种子需求的增加,确保银合欢种子的质量成为首要问题。综述近年来对银合欢种子成分、种子萌发、种子保存和种子健康等方面的研究概况,并对银合欢种子研究中存在的问题提出了展望。     

花生种子中芪化物的合成与抗黄曲霉菌产毒的相关性研究

以花生种子为试材,采用孢子浓度为l×l 06(个/ml)的黄曲霉菌接种花生种子,对抗产毒和易产毒品种间4种主要芪化物(resveratrol,ε-viniferin,δ-viniferin,pterostilbene)合成变化,相关抗性酶活性(PAL、POD、PPO)进行了比较,探讨了不同品种间芪化物的合成与抗黄曲霉菌产毒之间的相关性.结果表明:花生种子芪化物的合成速度与抗产毒有关.在接种黄曲霉菌第3天时,抗产毒品种黔花生3号4种芪化物含量达到峰值,含量为47.37 μg/g,为对照的54倍;易产毒品种花育22号芪化物含量仅5.5 μg/g;抗产毒品种芪化物含量和相关抗性酶(PAL、POD、PPO)活性都高于易产毒品种;在16个考察的花生品种中,发现了4个芪化物含量较高,病情指数和黄曲霉毒素含量相对较低的花生品种;相关分析发现,不同花生品种芪化物含量与病情指数、黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素总量呈极显著负相关,相关系数(r)分别为-0.789、-0.851、-0.850.因此,花生接种第3天时的芪化物含量可作为筛选和培育花生抗产毒品种的重要化学指标.     

激素和非生物胁迫对花生叶片白藜芦醇及其代谢产物合成的影响

花生中白藜芦醇含量较低,但逆境可诱导大量白藜芦醇的积累。通过3种激素[水杨酸(SA)、乙烯利(ETH)、茉莉酸甲酯(Me JA)]和3种非生物胁迫[UV-C、H2O2、百草枯(PQ)]的方式在不同条件下进行诱导。结果表明:避光放置有利于UV-C处理后的花生叶片中白藜芦醇及其代谢产物的合成,4种芪化物(Res、PS、ε-viniferin、δ-viniferin)总含量为38.17μg/gFW;不避光(光照和黑暗交替16/8h)放置有利于H2O2、PQ、SA、ETH和Me JA处理后白藜芦醇及其代谢产物的合成,这5种处理芪化物总含量分别为32.76、32.21、0.49、2.42和1.42μg/gFW。在适当的剂量范围内,花生叶片中白藜芦醇及其代谢产物的积累随剂量的增加而增加,最佳的处理剂量分别为2.0h UV-C,1mmol/L PQ、1%H2O2、10mmol/L SA、50mmol/L ETH和50mmol/L Me JA;4种芪化物中以Res含量增加较为显著,而代谢产物的含量较低。研究表明,激素或非生物胁迫可诱导花生叶片中白藜芦醇及其代谢产物的积累,花生可作为一种获取白藜芦醇及其代谢产物的植物源。