猪附红细胞体病的实验室诊断方法

猪附红细胞体病是由附红细胞体感染引起的以溶血性贫血、黄疸等为主要特征的感染性疾病,该病不仅危害养猪业的健康发展,也威胁人类的健康。文章主要介绍了猪附红细胞体感染的临床症状及形态学、血清学等的实验室诊断方法,并结合近年的研究成果对这些方法进行了评价。     

我国的食源性寄生虫病及其相关研究进展

1食源性寄生虫病在食品安全中的战略作用和地位 食源性寄生虫病是指所有能够经口随食物（水源）感染的寄生虫病的总称,分为食物寄生性（内源性）寄生虫病与食物污染性（外源性）寄生虫病。根据食物种类可分为六大类,包括肉源性寄生虫病、植物源性寄生虫病、淡水甲壳动物源性寄生虫病、鱼源性寄生虫病、螺源性寄生虫病、水源性寄生虫病。     

微小隐孢子虫TSP3蛋白的定位分析

通过对微小隐孢子虫TSP3氨基酸序列进行生物信息学分析设计多肽片段,偶联KLH载体蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA方法检测血清效价并利用特异性亲和层析的方法纯化抗体。以该抗体作为一抗,利用Western blot检测虫体天然蛋白质在体内的表达情况,通过间接免疫荧光方法进行亚细胞定位分析。结果表明:制备的多克隆抗体能够特异性识别虫体天然蛋白,亚细胞定位发现其位于子孢子以及裂殖子的顶端。     

猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及真核表达

应用特异性引物,从猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）中扩增出HE蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pTHE。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTHE,回收目的基因HE片段并将其定向克隆到pPiCZαA中,构建重组质粒pPiCZαA HE。用BstXⅠ酶切pPICZαA HE使其线性化,并电击转化至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子,用1％甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及westem blot分析。结果在酵母菌培养基上清中检测到相对分子量为43kD的重组蛋白,且该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明HEV的HE蛋白片段在Pichia Pastoris中获得成功表达。     

隐孢子虫卵囊分离纯化的一种新方法

隐孢子虫卵囊分离纯化的一种新方法＊取含牛源鼠隐孢子虫（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｍｕｒｉｓ）卵囊的奶牛粪便，加入２倍体积的自来水，以６０目网筛过滤，滤液经３０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，弃上清，沉淀加入等量３３％硫酸锌，２５００ｒ／ｍｉｎ离心１...     

以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究

摘要：以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg／孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板，用10％免血清进行封闭，以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。     

鲤吉陶单极虫体被结构的扫描电镜观察

应用扫描电镜,对鲤鱼肠道内的吉陶单极虫体被进行了形态学观察。吉陶单极虫的孢子呈瓜子形,后端钝圆,向前一端逐渐尖细。从孢子的后端向前端方向常常包裹着一个无色透明的薄膜。孢子可分为背面和腹面,背面光滑无皱褶,并可见一长卵圆形的极囊,极囊一般较大,约为孢子长度的一半。孢子的腹面褶皱不平,形成形态各异、大小和数量不等的迷宫状沟回,沟回主要分布在孢子的中后端。偶见放出极丝的孢子,极丝较长,常为孢子长度的1倍以上。     

猪附红细胞体检测方法研究进展

猪附红细胞体病是由猪附红细胞体寄生在猪红细胞表面而引起的感染性疾病,以高热和急性黄疸性贫血为典型临床症状.有关该病原的分类地位国内外一直不统一.<伯吉氏细菌鉴定手册>第八版将其归属于立克次氏体目无形体科附红细胞体属.依据对各种附红细胞体16S rRNA基因序列的系统进化分析结果,Neimark等[1-2]认为附红细胞体16S rRNA基因序列与支原体属生物16S rRNA基因序列的亲缘关系较近,提议将其划入支原体属.目前,绝大多数英文学术论文已将附红细胞体属归为支原体属.我国学者对流行于国内的病原的遗传学和分子生物学特征尚未进行系统研究,因而仍然沿用附红细胞体的命名.     

犬贾第虫dsRNA病毒的鉴定及特性

对分离到的6株犬贾第虫（Giardia cnais)包囊进行核酸分析，在其中1株犬贾第虫核酸的琼脂糖凝胶电泳图谱上观察到1条长度约7.0kb的片段。经鉴定，该核酸不能被DNA酶（100mg/L）降解，对质量浓度低的RNA酶（0.1mg/L)不敏感，但可被质量浓度高的RNA酶（10mg/L）降解。纯化包囊经流氮冻融后，磷钨酸负染，电镜观察发现有球形、直径约为33nm的病毒样粒子存在，包囊超薄切片在胞质中也观察到该病毒样粒子存在。RNA依赖RNA聚合酶活性测定结果表明，该病毒具有RNA依赖RNA聚合酶的活性。犬贾第虫dsRNA病毒核经RT-PCR扩增后得到1条预计扩增大小的片段，将其回收后连接到pMD18-T载体上进行克隆并测序，所得序列仅与蓝氏贾第虫病毒具有较高同源性。     

免疫佐剂研究进展

佐剂的主要作用是提高抗原（免疫原）的免疫原性和免疫反应的可持续性，它能引导机体的免疫系统对抗原产生体液免疫或细胞免疫反应。对佐剂的选择取决于免疫的目的，从用途上分，佐剂可分为试验用佐剂和疫苗用佐剂。前者主要用于特异性抗体的制备，而后者则作为疫苗的必要成分。文章主要介绍目前常用的几种佐剂包括铝盐佐剂、弗氏佐剂、免疫刺激复合物（ISCOM）、脂质体和CpG及其在科研和疫苗中的应用。