苦瓜afp1基因的克隆与序列分析

通过异硫氰酸胍法提取苦瓜总RNA,采用一步RT-PCR方法获得394 bp苦瓜afp1基因序列.应用DNA star软件进行序列分析,表明这个片段包含了基因完整的编码.Blast分析表明,它与荠菜的防卫基因有很高的同源性,序列一致率为87％.该试验结果将为分子植物抗病育种提供基因材料.     

10个棉花品种的DNA多态性分析

采用RAPD技术,对10个棉花品种基因组进行DNA片断扩增,以研究品种间遗传多样性。结果表明:20个随机引物中,有8个引物能得到多态性条带。8个引物共扩增出96条带,其中33条多态性条带,多态率为34.4%。RAPD分析结果表明,用G06、G08、G11、G12、G17 5种引物可完全将这10个棉花品种区分开。此外,通过扩增BT基因发现,在非抗虫棉亚洲棉中也有BT基因的存在。     

陆地棉组织培养体细胞胚胎发生技术改进

以珂字312和冀无2031为材料,对陆地棉体细胞胚胎发生技术进行了改进,建立了一套培养程序。在悬浮培养中,加入50g·L-1的PEG6000的液体培养基可提高悬浮培养后正常胚的萌发率,对胚状体萌发有促进作用。悬浮培养后的胚性愈伤组织继代到含有80-160mg·L-1PEG6000的胚性愈伤组织萌发培养基中,暗培养1-2周,胚性愈伤组织明显疏松;在光照条件下继续培养两周可形成大量绿色萌发胚。加入500mg·L-1的CH及NH4NO3减半、KNO3加倍的培养基利于胚状体的分化,且异常胚的比例低。     

冀南地区3种猪病毒病血清抗体的检测与分析

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）对2009年1—12月采自冀南地区10个市县规模化猪场的421份血清分别进行猪瘟（CSF）、猪伪狂犬病（PR）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）抗体检测。结果表明,猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征抗体总阳性率分别为61.82%（251/406）、90.15%（293/325）、40.25%（128/318）,提示猪伪狂犬病的抗体总合格率较高,而猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征总阳性率均较低,应加强对其的监测和强化免疫。     

濒危植物缘毛太行花组培苗的生根培养与驯化移栽

将缘毛太行花的无根组培苗接种在9种不同植物生长激素配比的生根培养基上,结果在添加0.2 mg/LIBA的1/2 MS培养基上缘毛太行花组培苗生根率最高,可达93.3％.生根培养30d后敞口炼苗3d,而后移栽至不同配比的基质中,从中筛选出成活率较高的移栽基质,即蛭石,其移栽成活率为76.7％.本研究为缘毛太行花的扩繁和工厂化育苗奠定了一定的基础.     

棉花体细胞胚胎发生相关基因——亚硝酸还原酶基因的克隆与生物信息学分析

利用生物信息学方法,以水稻的NiR基因序列为基础,克降棉花亚硝酸还原酶基因的开放阅读框,并对序列进行氨基酸组成、二级结构、疏水性及信号肽进行等预测分析,同时与4个物种的NiR基因进行了同源性比较.结果成功地克隆了NiR基因,该研究结果对研究棉花体细胞胚胎发生和基因的关系奠定了一定的基础.     

棉花农杆菌介导转化体系中影响抗性愈伤组织诱导率的因素

 以冀无2031为材料,采用正交设计方法,研究了农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化过程中菌液浓度、侵染时间、共培养时间和共培养温度对抗性愈伤转化效率的影响。结果表明,4个因素均对抗性愈伤的诱导率有极显著影响,其诱导效应依次是共培养温度>菌液OD值>侵染时间>共培养时间。按照正交设计的原则,最终得到农杆菌介导转化棉花下胚轴的最佳条件是：菌液OD值为0.3,侵染15 min,24 ℃共培养24 h,下胚轴抗性愈伤的转化效率最高。用珂312、中521和农大94-7对所选出的最佳组合进行了进一步验证,结果3个品种在优选组合下的抗性愈伤组织诱导率都很高,分别为93.85%、86.72%和85.83%。     

棉花与拟南芥纤维素合成酶基因家族的生物信息学比较

为给克隆到的棉花纤维素合成酶CesA基因的功能分析提供参考,采用生物信息学、基因保守结构域搜索、聚类分析和电子拼接技术,分析了拟南芥和棉花纤维素合成酶在基因组上的分布,预测了从棉花中克隆到的纤维素合成酶CesA基因的功能.结果表明:棉花中克隆的纤维素合成酶基因与拟南芥纤维素合成酶基因参与纤维素、多糖生物合成的纤维素合成酶基因亲缘关系较近,推测克隆的基因可能参与纤维素合成或参与多糖的生物合成过程,该基因的具体功能有待进一步深入研究.     

Phenotype Variations in Plant Regeneration of Upland Cotton (Gossypium hirsutum L.)

以陆地棉冀无2031无菌苗下胚轴为外植体,在MS中附加激素0.1mg/LIAA 0.1mg/L2,4-D 0.1mg/LKT的培养基上诱导出愈伤组织。选择疏松愈伤组织继代到附加0.1mg/LZT的培养基中,经2-3个月的继代培养诱导出颗粒状疏松胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在无激素、每升加2g谷氨酰胺和0.5g天门冬酰胺的胚性愈伤增殖萌发培养基上培养2个月左右,可陆续形成不同时期的体胚苗。对冀无2031不同时期的体细胞萌发后的体胚苗进行观察,发现了真叶畸形苗、子叶节生根胚、胚轴侧生根胚、腋芽丛生苗和以腋芽发育为主的再生苗5种新类型的体胚苗。     

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 以陆地棉冀无2031无菌苗下胚轴为外植体，在MS中附加激素0.1mg/L IAA+0.1mg/L 2,4-D+0.1mg/L KT的培养基上诱导出愈伤组织。选择疏松愈伤组织继代到附加0.1mg/L ZT的培养基中，经2~3个月的继代培养诱导出颗粒状疏松胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在无激素、每升加2g谷氨酰胺和0.5g天门冬酰胺的胚性愈伤增殖萌发培养基上培养2个月左右，可陆续形成不同时期的体胚苗。对冀无2031不同时期的体细胞萌发后的体胚苗进行观察，发现了真叶畸形苗、子叶节生根胚、胚轴侧生根胚、腋芽丛生苗和以腋