次氯酸消毒液对猪源病原体的消杀效果

为评价次氯酸消毒液(以下简称消毒液)对猪源病原体的消杀作用,以猪场常见的5种病原菌和5种病毒为研究对象,测试消毒液在不同浓度和不同作用时间下的消杀效果.悬液定量杀菌试验结果表明,消毒液原液(次氯酸含量为210 mg/L)和1:2倍稀释消毒液(次氯酸含量为105 mg/L),作用30 s即可杀灭猪链球菌2型(SS2)、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪丹毒杆菌(ER)和猪大肠杆菌(ETEC);1:4倍稀释消毒液(次氯酸含量为52.5 mg/L)作用1 min能杀灭HPS、ER和ETEC,作用5 min能杀灭SS2和APP,杀灭对数值均>7.00,杀灭率均为100％.病毒灭活试验结果表明,消毒液原液作用1 min对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪细小病毒(PPV)的平均灭活对数值均≥5.00,杀灭率均≥99.999％;1:2倍稀释消毒液作用1 min对PEDV的平均灭活对数值为4.00、杀灭率为99.990％;消毒液原液作用5 min和10 min,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的杀灭率为99.899％,对猪伪狂犬病病毒(PRV)的杀灭率为92.921％,对猪圆环病毒2型(PCV2)的杀灭率为90.00％.表明次氯酸消毒液在推荐浓度下对猪场常见病原菌有快速高效的消杀效果,对PEDV和PPV等病毒亦有良好的消杀作用.     

西藏羊蜱蝇中巴尔通体检测及gltA基因序列分析

为了明确西藏部分地区绵羊体外寄生羊蜱蝇携带病原巴尔通体的感染情况,作者于2019年1-9月采集了西藏林芝、日喀则、那曲地区绵羊体外寄生羊蜱蝇298只,通过形态学鉴定、PCR扩增羊蜱蝇18S rRNA基因进行虫体鉴定,并对病原巴尔通体的gltA基因进行检测,将部分阳性PCR产物连接pMD^TM-18T后转入DH5α感受态细胞,将阳性结果进行测序并进行遗传进化分析。结果显示,雌性阳性率49.8%（113/227）,雄性阳性率42.3%（30/71）,雌雄之间差异不显著（χ²=0.944,P=0.267）;羊蜱蝇携带病原巴尔通体的总感染率为48.0%（143/298）,林芝极显著高于日喀则、那曲地区（χ²=13.801,P<0.01;χ²=17.067,P<0.01）,日喀则和那曲地区无显著差异（χ²=0.084,P=0.771）;散养模式羊蜱蝇携带阳性率44.3%（102/230）,圈养阳性率85.0%（34/40）,屠宰场阳性率23.3%（7/30）,宿主散养和圈养、屠宰场存在极显著差异（χ²=20.929,P<0.01;χ²=24.38,P<0.01）,宿主散养和屠宰场存在显著差异（χ²=3.989,P=0.046）;将测序结果上传GenBank数据库获得3个巴尔通体gltA基因登录号（MN623006、MN623007、MN623008）;序列比对表明和云南、新疆巴尔通体相似性为99.6%~100%。本次研究首次检测出西藏羊蜱蝇携带病原巴尔通体,为了解西藏绵羊体外寄生虫携带病原巴尔通体和病原防控提供依据。     

禽流感病毒疫苗研究进展

禽流感是由禽流感病毒引起的传染性强、传播速度快的呼吸道感染疾病,该病不仅对国内外养殖业的发展造成危害,也威胁人类健康。流感病毒疫苗是目前防控流感病毒的有效方法,为了人类健康和养殖业的健康稳定发展,国内外学者不断研发不同类型流感病毒疫苗,以防控大流行性流感再次来袭。本文旨在综述现如今国内外学者对流感病毒疫苗不同种类的研发进展,以及不同疫苗的实验效果,为今后科研工作者研发新型流感病毒疫苗提供新思路。     

藏猪产色葡萄球菌分离鉴定及生物学特性研究

为了解西藏林芝市健康藏猪的葡萄球菌感染情况，对从西藏林芝市工布江达县巴河镇屠宰场、林芝市巴宜区西藏农牧学院教学实习牧场、林芝市巴宜区屠宰场采集的232份样品进行了细菌分离培养与鉴定，并对1株分离菌株进行了较为系统的生物学特性研究。流行病学调查结果显示，在232份样品中，共检出73份葡萄球菌阳性，阳性率为31.47%，其中在西藏林芝工布江达县巴河镇屠宰场检出16份阳性，检出率为23.89%（16/67）；林芝市巴宜区西藏农牧学院牧场检出43份阳性，检出率为34.40%（43/125）；林芝市巴宜区屠宰场检出14份阳性，检出率为35.00%（14/40）；分离菌经PCR鉴定、基因测序、生化鉴定，证明分离到5株产色葡萄球菌，对其中一株（Sa LZ1）进行了系统的研究。Sa LZ1菌株在琼脂培养基上形成圆形凸起、边缘整齐、表面光滑、不透明的瓷白色菌落，革兰氏染色为阳性球菌；PCR测序结果显示，分离株与产色葡萄球菌（GenBank登录号：MG576253.1）同源性最高；生化鉴定结果显示，其对血清菊糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖等表现为阳性，对阿拉伯糖、马尿酸钠、棉子糖、木糖、尿素等表现为阴性，符合产色葡萄球菌的生化特性；Sa LZ1在接种后5~10 h处于对数生长期；小鼠致病性试验显示，当Sa LZ1菌株攻毒浓度达3.5×10⁹ CFU/mL时小鼠死亡率达100%，且病理切片结果表明，Sa LZ1菌株能引起小鼠内脏组织发生病变。以上结果为西藏林芝市藏猪葡萄球菌的防控提供理论依据。     

西藏那曲市1株牦牛源产气荚膜梭菌的分离鉴定

本试验采集一头疑似产气荚膜梭菌感染导致死亡牦牛的组织样品,通过对细菌的分离培养,结合染色镜检、生化实验和16S rRNA生物学鉴定试验,表明成功分离得到1株牦牛源产气荚膜梭菌。     

非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较

为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法(OIE-qPCR);并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较.以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10～102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中,进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies,进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10～102 copies,而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies.对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示:OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60％～99.03％.其中,阳性样品CT值的相关系数为0.988～0.997(Perason法),表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时,各试剂盒结果之间存在一定差异,其中,TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率,ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之.本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据.     

猪圆环病毒2型和3型双重PCR方法的建立及在藏猪猪圆环病毒检测中的应用

为同时并快速检测和鉴别猪圆环病毒2型(PCV-2)与猪圆环病毒3型(PCV-3),并调查西藏林芝地区猪圆环病毒的感染情况,根据笔者所在实验室PCV-2和PCV-3单重PCR方法,建立检测PCV-2和PCV-2双重PCR的方法,构建标准质粒并经优化反应条件和反应体系后进行特异性和灵敏性的测定,并对西藏林芝周边地区藏猪粪便...