猪圆环病毒2型和3型双重PCR方法的建立及在藏猪猪圆环病毒检测中的应用

为同时并快速检测和鉴别猪圆环病毒2型（PCV-2）与猪圆环病毒3型（PCV-3）,并调查西藏林芝地区猪圆环病毒的感染情况，根据笔者所在实验室PCV-2和PCV-3单重PCR方法，建立检测PCV-2和PCV-2双重PCR的方法，构建标准质粒并经优化反应条件和反应体系后进行特异性和灵敏性的测定，并对西藏林芝周边地区藏猪粪便进行检测。结果显示，建立的PCV-2和PCV-3双重PCR检测方法对PCV1、CSFV、PRRSV、PRV、PPV、PEDV等常见猪源病原的检测结果均为阴性；并且建立的PCV-2和PCV-3双重PCR的灵敏度与PCV-2和PCV-3单一PCR的灵敏度一致，均能达到10¹拷贝数/μL;利用建立好的双重PCR方法对西藏藏猪临床样品进行检测，PCV-2、PCV-3的阳性率分别为38.3%（18/47）、12.8%（6/47）,混合感染率为10.6%（5/47）,与单一PCR的符合度为100%。由此可见，本研究建立的PCR方法方便、特异、准确，并有很高的敏感度，适于临床样品的检测，为PCV-2与PCV-3的诊断和防控提供理论依据。