非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较 |
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引用本文: | 肖琦,蒋彩霞,史慧,赵霞玲,钱雯娴,朱家平,张冯禧,温立斌,汪伟,何孔旺.非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较[J].江苏农业科学,2021,49(2):119-124. |
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作者姓名: | 肖琦 蒋彩霞 史慧 赵霞玲 钱雯娴 朱家平 张冯禧 温立斌 汪伟 何孔旺 |
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作者单位: | 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014;江苏省镇江市动物疫病预防控制中心,江苏镇江212003;江苏省连云港市畜牧兽医站,江苏连云港222001;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014;西藏农牧学院,西藏林芝860000;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014;西藏农牧学院,西藏林芝860000;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014;西藏农牧学院,西藏林芝860000;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014;西藏农牧学院,西藏林芝860000;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014 |
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基金项目: | 江苏省现代农业(生猪)产业技术体系生物安全创新团队项目 |
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摘 要: | 为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法(OIE-qPCR);并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较.以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10~102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中,进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies,进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10~102 copies,而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies.对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示:OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60%~99.03%.其中,阳性样品CT值的相关系数为0.988~0.997(Perason法),表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时,各试剂盒结果之间存在一定差异,其中,TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率,ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之.本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据.
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒 检测 荧光定量PCR 灵敏性 稳定性 敏感性 |
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