肉牛肝脏miRNA对运输应激的响应

为分析运输应激对肉牛肝脏miRNA的影响,寻找肉牛运输应激候选诊断标志物。实验将10头体况良好体重相近的肉牛随机分为运输0 h组和运输3 h组,使用公路运输方式对肉牛进行运输应激,速度为80 km·h~(-1)。采集血液,制备血清,使用ELISA方法检测肉牛血清中CRP和SAA含量的变化。同时采集肝脏并提取总RNA,反转录成cDNA,运用qRT-PCR方法检测肉牛肝脏组织中miR-31、miR-194-5p、miR-125b和miR-186的表达。结果表明,与运输0 h组相比,运输3 h组血清中CRP含量显著升高(P0.05),SAA含量极显著升高(P0.01);与运输0 h组相比,运输3 h组肝脏组织中miR-31相对表达量极显著上升(P0.01),miR-194-5p相对表达量极显著下降(P0.01),miR-125b和miR-186相对表达量显著下降(P0.05),上述结果为运输应激诊断标志物的筛选提供参考依据。     

地方农业院校畜牧兽医专业“落地人才”培养体系的探索与实践

为实现地方农业院校畜牧兽医专业"落地人才"培养目标,结合黑龙江八一农垦大学的实际情况,对畜牧兽医专业"落地人才"培养模式和方法进行了探索与实践,以期整合教学资源,提高教学质量和学生的综合素质,树立"强实践,用技能"的教学理念,培养高素质的畜牧兽医专业应用型人才。     

分层次教学与专业分流提高动物医学专业人才培养质量的探讨

针对动物医学的专业特点,结合黑龙江八一农垦大学动物医学专业的教学改革与实践经验,探讨了分层次教学与专业分流教学方式的实施原因、实施措施与效果,并分析了其中存在的问题。认为分层次教学与专业分流有助于提高动物医学专业人才的学习兴趣和培养质量。     

大鼠肝细胞系BRL-3A细胞Hsp70过表达条件的优化

为了使热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)在BRL-3A细胞中过表达,试验以带有标签基因的腺病毒感染BRL-3A细胞,根据感染效率初筛病毒感染的最适浓度和作用时间;然后用初筛出的最适浓度(4×107,2×107,1×107,0.5×107,0.25×107pfu/mL)和时间(24 h和48 h)感染BRL-3A细胞,优化Hsp70重组腺病毒感染BRL-3A细胞的条件,并应用荧光定量RT-PCR和免疫蛋白印记方法检测Hsp70的mRNA和蛋白表达量。结果表明:当用1×107pfu/mL病毒AdCMV-Hsp70按照最佳感染条件的感染复数(MOI)=20感染BRL-3A细胞48 h时,能使Hsp70表达量比病毒空载体感染细胞和无病毒的对照组细胞极显著升高(P0.01)。     

研究性教学在动物生理实验教学中的实践与效果研究

简析了研究性教学的概念与特征，结合黑龙江八一农垦大学动物生理学实验教学的实践，阐述了研究性教学手段的实施内容与实施办法，并简析了实施效果与存在的问题。     

海兰褐蛋鸡卵巢与输卵管ESR基因定量研究

为了研究海兰褐蛋鸡卵巢、输卵管漏斗部(以下简称漏斗部)与输卵管子宫部(以下简称子宫部)雌激素受体基因表达水平,试验采用荧光定量PCR技术检测蛋鸡的卵巢、漏斗部与子宫部的雌激素受体表达情况。结果表明:漏斗部组织ESR1 mRNA表达水平与其他两组相比差异极显著(P0.01);子宫部、卵巢组织ESR1 mRNA表达水平差异不显著(P0.05)。说明雌激素受体与漏斗部功能可能存在着密切的关系。     

不同时间强度冷刺激对大鼠血清中炎症相关细胞因子的影响

将170只SPF级Wistar大鼠随机分为常温对照组及冷刺激试验组,冷刺激试验组又分为急性应激组及慢性应激组.急性冷刺激时间为3、6、12、24 h,慢性冷刺激时间为3、6、9、12d.试验大鼠均于人工气候室中饲养,对照组及冷刺激试验组的饲养温度分别为(24±0.05)C和(4±0.05)C.经不同时间强度的冷刺激后,采用心脏采血,采集大鼠血液,并分离血清,利用Luminex xMAP技术检测大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10以及IP-10的含量.结果显示,冷刺激能够提高各试验组大鼠血清中IL-6的含量,急性应激组与对照组相比TNF-α、IP-10 、L2和IL-4的含量变化水平呈上调趋势,而慢性应激组TNF-α、IL-2和IL4的含量变化呈下调趋势,IFN-γ和IP-10的含量在冷刺激9、12d时显著增强(P＜0.05).研究结果表明,冷刺激能够引起大鼠炎症相关细胞因子以及辅助性T细胞亚群的分泌,随着应激时间的延长,细胞免疫(Th1)向体液免疫(Th2)漂移,从促炎症细胞因子(特点是IL-1和TNF-α的升高)向抗炎症细胞因子(特点是伴随IL-4和IL-10的增强)转化,机体产生细胞免疫并刺激机体产生体液免疫.     

表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达

为构建表达籽鹅α-烯醇化酶(ENO1)基因的重组腺病毒,本研究利用RT-PCR技术,从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因,克隆至pShuttle-CMV穿梭载体中,并利用I-CeuI与I-SceI将ENO1基因的表达框切下,连接到腺病毒骨架的pAdxsi载体中。采用PacⅠ酶切,将其线性化,并转染至293(R)细胞进行病毒的包装,制备重组腺病毒。实验结果显示,制备的表达ENO1重组腺病毒的滴度达到1.1×1011pfu/mL。将重组腺病毒感染籽鹅卵泡颗粒细胞后,荧光定量RT-PCR与western blot检测显示细胞中ENO1基因和蛋白表达水平显著高于正常细胞(p<0.05),这些结果为研究ENO1生物学活性及功能奠定了基础。     

医学虚拟实验的使用对动物医学机能学实验教学的影响

黑龙江八一农垦大学动物医学机能学实验室将虚拟实验技术与动物医学传统实验教学相结合,借助二者的优势互补,实现搭建一个教学平台,优化一套完整的实验项目,培养一批优秀学生的新的实验教学目标。