GA3介导miR171s及其靶基因VvSCLs调控葡萄种子发育的作用分析

【目的】鉴定vvi-miR171s成员及其靶基因,明确vvi-miR171s成员及其靶基因在葡萄种子发育中的重要作用及其响应赤霉素（Gibberellin,GA）调控种子发育的表达模式。【方法】以‘魏可’葡萄（‘Wink’）果实为试材,利用miR-RACE技术鉴定vvi-miR171a/b/e/f/g/h的成熟体序列;通过PsRNATarget软件预测vvi-miR171s的靶基因,利用生物信息学软件对其进行染色体定位、系统进化树、基因结构、保守结构域及motif分析;通过启动子作用元件分析预测vvi-miR171s及其靶基因的潜在功能;采用RLM-RACE和PPM-RACE验证vvi-miR171s对靶基因的裂解作用;利用qRT-PCR鉴定其应答外源GA₃在葡萄种子区中的表达模式。【结果】从‘魏可’葡萄果实中鉴定并克隆了6条葡萄vvi-miR171s成熟体序列,并用RLM-RACE和PPM-RACE鉴定到3条靶基因VvSCL6/15/22。靶基因的生物信息学分析显示,VvSCL6/22与苹果、桃子和樱桃同源基因遗传距离较近,而VvSCL15则与拟南芥、苹果、桃子和樱桃中的同源基因遗传距离相同,且VvSCLs的基因结构也与进化树中亲缘关系较近的基因相似;SCLs蛋白均具有GRAS结构域,鉴定到5个与GRAS结构域对应的保守motif,且它们含有的motif元件类型及排列顺序均相似,表明SCL家族结构较为保守。vvi-miR171s及靶基因的启动子均具有大量的GA、水杨酸（Salicylic acid,SA）和种子发育相关作用元件,表明它们可能参与响应GA、SA和种子发育过程;qRT-PCR表达分析显示,GA₃强烈抑制了种子区vvi-miR171a的表达,但同时显著上调种子区的VvSCL15和VvSCL22表达;vvi-miR171a和VvSCL15在对照组和GA₃处理后的种子/种子区均呈强烈的负相关,表明GA₃可能在葡萄种子/种子区显著增强vvi-miR171a对VvSCL15的负调控作用,从而介导葡萄种子发育。【结论】在‘魏可’葡萄中鉴定到vvi-miR171a/b/e/f/g/h 6个成员;均可裂解VvSCl6/15/22 3个靶基因;vvi-miR171a-VvSCL15可能作为主要的调控途径响应赤霉素并参与调控葡萄种子发育。     

稻草包芯栽培对马铃薯产量及土壤肥力的影响

采用马铃薯稻草包芯栽培技术和水稻-马铃薯水旱轮作方式,分析不同种植密度对马铃薯产量、商品薯率、大薯率的影响,及对稻田土壤pH值、有机质含量、有效氮、速效磷、速效钾含量的影响。结果表明,不同密度稻草包芯栽培的马铃薯产量均比不包芯的增产,以30 cm×20 cm株行距种植马铃薯产量及商品薯率最高;稻草包芯种植马铃薯显著提高了土壤有机质含量,但对土壤有效氮、速效磷、速效钾含量及土壤酸碱度没有显著影响。     

不同光质及其组合对山黧豆苗菜生长及品质的影响

以松柳种子为试验材料,采用发光二极管(light emitting diode,LED)作为光源,设置红、绿、蓝3种不同单色光质、复合光组合以及白光共9种不同的光质处理,研究不同光质对松柳芽苗菜生长和营养品质的影响。结果表明,纯红光处理的松柳芽苗菜可食用部分鲜质量、株高、可溶性蛋白含量最高,但其可食用部分干鲜比最低,含水量最多;红蓝绿3色混合光处理的松柳芽苗菜体内叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量最高;红蓝1∶1混合光处理的松柳芽苗菜维生素C含量最高;白光处理的松柳芽苗菜游离氨基酸含量最高;不同光质对松柳芽苗菜的硝态氮含量无明显影响;白光和蓝光可以促进松柳芽苗菜总黄酮的合成。与蓝绿光组合相比,红蓝光组合更有利于松柳芽苗菜生长和品质的增加。在实际生产中可根据所需品质要求选择合适的光质组合。     

苗期CO_2加富对设施甜瓜生长发育特性的影响

以甜瓜(Cucumis melo L.)幼苗为试材,研究了不同浓度CO2对其生长发育、产量与品质的影响。结果表明:CO2加富(700μL/L(处理Ⅰ)、900μL/L(处理Ⅱ)、1 100μL/L(处理Ⅲ)、1 300μL/L(处理Ⅳ))增加了幼苗干重,利于培育壮苗。与对照干物重(0.87g)相比,甜瓜幼苗CO2加富30d后,处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ全株干物重分别达到1.12、1.29、1.59、1.65g;壮苗指数分别为0.211、0.235、0.281、0.293。CO2加富提高了甜瓜产量和果实含糖量,增加了糖酸比,产量增幅达36.37%~83.12%。     

葡萄miR159及其靶基因VvGAMYB在花发育过程中的作用分析

以‘魏可’葡萄(Vitis vinifera L.‘Wink’)为试材,克隆得到一个葡萄赤霉素信号途径中的MYB转录因子基因Vv GAMYB。该基因开放阅读框(ORF)长1 680 bp,编码559个氨基酸,该蛋白序列含有GAMYB基因家族保守的R2R3 DNA结合域以及Box1、Box2、Box3保守域。洋葱表皮细胞的瞬时表达结果显示,VvGAMYB定位于细胞核中。VvGAMYB和其下游基因Vv LFY在葡萄花发育过程中的表达都呈现先上升后下降的趋势,而赤霉素处理促进了VvGAMYB和VvLFY的表达,从而使开花提前。VvGAMYB是miR159的靶基因,其作用受到miR159的调控。miR159和VvGAMYB的表达负相关,赤霉素处理下调miR159表达从而也降低了对VvGAMYB的裂解作用。由上述结果可以看出,VvGAMYB通过赤霉素开花途径参与葡萄的开花过程。在这一过程中,赤霉素抑制miR159裂解VvGAMYB的作用,从而上调VvLFY的基因表达,参与了调控葡萄开花过程。     

几种膨大剂对葡萄产量和品质的影响

葡萄膨大剂能够促进细胞分裂和果实膨大,在生产上已有广泛应用,但目前市场上膨大剂类型[1]较多,对葡萄产量和品质的影响有着较大差别。本试验选取3种类型的膨大剂分别应用于巨峰系列的3个品种———巨峰、藤稔和高妻的栽培过程中,结果表明每种膨大剂均改善了3种葡萄品种的产量和品质,但存在着较大的差异。1材料与方法1.1试验地点与材料试验在江苏农林职业技术学院农艺系实习农场葡萄园内进行。供试的3种类型的葡萄膨大剂分别编号为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,Ⅰ型为葡萄特效膨大灵,无色液体,主要成分为氨基酸和细胞分裂素,为上海市农科院植物所研制;Ⅱ型为…     

高等职业院校园艺技术品牌专业建设研究与实践——以江苏农林职业技术学院为例

专业建设是高校质量和内涵提升的核心内容,品牌专业建设是这一核心内容的实质体现。园艺技术专业品牌专业是江苏省第一批立项建设的品牌专业之一,经过3年探索与实践,形成了显著的建设成果。从标杆选择、差距剖析、关键问题解决、实施措施以及成果展示等方面,解析了品牌专业建设的方法与实践经验。     

VvmiR397a及其靶基因VvLACs在葡萄果实发育中的作用分析

以‘魏可’葡萄（Vitis vinifera‘Wink’）为试材,克隆了葡萄VvmiR397a前体基因（594 bp）,其可折叠成典型的茎环结构;同时鉴定了其成熟体序列（21 bp）,并为其预测到5条靶基因VvLAC4、VvLAC7、VvLAC11、VvLAC14和VvLAC17,它们属于木质素合成的关键酶漆酶家族（Laccase,LACs）。靶基因的domains、motif序列分析及三级结构预测显示,漆酶蛋白序列均具有3个相同的Cuoxidase结构域,其motif元件类型及排列顺序、三级结构均相似,表明漆酶结构较为保守。推测其功能比较保守,74个漆酶基因的进化分析显示葡萄漆酶基因与杨树漆酶基因亲缘关系近于拟南芥,葡萄漆酶基因在木本植物中的保守性高于草本植物。VvmiR397a及VvLAC4、VvLAC11、VvLAC14和VvLAC17的启动子均具有赤霉素响应顺式作用元件（TATC-box、GARE、P-box）,表明它们可能响应GA参与葡萄生长发育的调控。荧光定量PCR表达分析显示,VvmiR397a能被GA诱导显著上调,且在幼果、花和成熟叶中具有高的表达,其他组织中表达相对较低,尤其在幼果中表达量最高,硬核期表达量最低;而其靶基因VvLACs表现出相反的表达模式,在硬核期有最高表达,而该期是葡萄果核木质素合成量最大的时期,表明VvmiR397a可能通过负调控VvLACs参与葡萄果核发育的调控。利用RLM-RACE和PPM-RACE验证了VvmiR397a对VvLACs的裂解作用,且在幼果中裂解作用最强,而在硬核期果实中裂解作用最弱,与VvmiR397a的表达趋势相似。     

节能可移动日光温室的结构设计和性能分析

[目的]促进日光温室在苏南地区设施园艺生产中的应用。[方法]试验设计建造了以聚苯乙烯泡沫板作为主要墙体材料,并采用相变储热技术和太阳能集热技术进行辅助升温的新型节能可移动日光温室,并在2014年12月至2015年2月测定了日光温室的各方面性能。[结果]分析表明,节能可移动日光温室保温性较好,在2014年12月、2015年1月、2015年2月的平均最低气温分别达到14.3、14.8、15.7℃。节能可移动日光温室平均相对湿度在典型晴天和典型阴天分别是75.8%和85.1%,而塑料大棚平均相对湿度在典型晴天和典型阴天分别是87.2%和95.3%,与塑料大棚相比节能可移动日光温室相对湿度较低。[结论]新型节能可移动日光温室在苏南地区具有较好的应用前景。     

水杨酸对高温胁迫下南瓜幼苗生理生化的影响

对味平南瓜5-6叶期的幼苗分别喷施50、100、200μmol.L-1的水杨酸（SA）溶液,24 h后,以40℃的高温胁迫24 h和72 h。结果表明,不同浓度的SA溶液均可缓解高温胁迫对南瓜幼苗叶片的伤害,其中以100μmol·L^-1的处理效果较好。