2015-2016 年川南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传进化分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要引起母猪繁殖障碍与生长猪呼吸障碍性疾病,给养猪业造成严重损失.为了解川南地区2015-2016年PRRSV遗传变异情况,该研究收集了85份疑似感染PRRSV组织样品,通过RT-PCR扩增ORF5基因,对其进行克隆、序列测定和所测序列遗传进化分析.获得15个ORF5序列,其遗传距离与序列相似性为0.0~0.25和81.1%~100%.与VR2332,JXA1,NADC30和JX1411核酸序列相似性分别为83.4%~89.1%,83.4%~99.3%,81.9%~95.7%和81.4%~92.9%.进化树分析显示,15个ORF5序列形成3个亚群,8个ORF5序列与JXA1形成subcluster Ⅰ,5个与NADC30 like形成subcluster Ⅱ,2个与ZJ1503 like毒株形成subcluster Ⅲ.研究结果表明,该地区PRRSVs毒株基因型日趋复杂,建议通过合理疫苗免疫,减少通过重组导致出现复杂的PRRSV基因型,对PRRSV的防控具有重要意义.     

青果多酚超声波醇提工艺条件的研究

[目的]研究超声波醇提青果多酚的工艺条件。[方法]采用超声波醇提青果多酚,通过单因素试验和正交试验优化最佳超声波提取条件。[结果]影响提取率的因素顺序为乙醇浓度>料液比>超声波功率>提取时间;超声波最佳提取条件为乙醇浓度40%、超声功率40 W、料液比1∶20(g/ml)、提取时间45 min,在此条件下,青果多酚的得率为3.422%。[结论]该研究优选出了超声提取青果多酚的最佳工艺条件,为青果药用价值的开发奠定了基础。     

五倍子鞣质对生物被膜型白假丝酵母的干预作用

[目的]研究五倍子鞣质对生物被膜型白假丝酵母的抑制作用。[方法]在生物被膜形成的早期、中期和成熟期以不同浓度药物干预48 h,采用MTT法检测药物对膜型白假丝酵母的抑制率;以不同浓度药物干预成熟生物被膜24、48、72 h,再用MTT法检测抑制率;光镜直接观察生物被膜内白假丝酵母的形态结构变化;用吖啶橙/溴化乙锭染色,通过荧光显微镜观察生物被膜内白假丝酵母的死亡方式。[结果]五倍子鞣质对生物被膜的形成具有抑制作用,对成熟期生物被膜中白假丝酵母的抑制作用具时间和剂量依赖性;鞣质导致被膜内白假丝酵母细胞变形,形态结构改变,但未见确切细胞凋亡,同时抑制细胞芽管和假菌丝形成。[结论]五倍子鞣质对白假丝酵母生物被膜的形成及成熟期生物被膜中白假丝酵母均具较强的抑制作用;可能通过非凋亡途径导致被膜内白假丝酵母的死亡。     

分光光度法测定青果多酚的含量

以没食子酸为标准品,使用酚试剂,采用分光光度法对青果(Fructus canarii)多酚的含量进行检测。结果表明,酚试剂用量为1.5 mL,与6 mL质量分数10%的Na2CO3溶液混合,30℃反应60 min,于765 nm处测定吸光度,没食子酸浓度在0.5～2.5 mg/L范围内与吸光度有良好的线性关系,回归方程为y=0.121 2x+0.004 0。该方法能较准确地定量分析青果多酚含量,具有简便、快速、稳定,重现性好的优点。