规模化猪场致病性仔猪黄白痢大肠杆菌耐药性检测

为揭示规模化猪场致病性仔猪黄白痢大肠杆菌的耐药性,为生猪养殖选择用药提供借鉴,2012年至2014年期间,通过细菌分离鉴定,从贵州省贵阳市21家发生仔猪黄白痢的规模化猪场分离得到21株致病性仔猪黄白痢大肠杆菌。药物敏感性检测结果表明,分离细菌不同比例地对14种兽医常用抗生素表现耐药性,链霉素和氨苄青霉素耐药性最为严重;头孢噻呋钠和氟苯尼考是较为敏感的抗生素药物,但随着时间推移,头孢噻呋钠和氟苯尼考的敏感菌株比例在逐步下降。     

猪链球菌感染的诊断与控制治疗

通过临床症状观察、病猪剖检、触片革兰氏染色镜检和细菌分离鉴定、病原核酸检测,确诊猪群发生急性猪链球菌病,通过利用安乃近、安痛定、肾上腺素、柴胡等肌肉注射,头孢噻呋钠、青霉素、链霉素、维生素B和C等耳静脉注射和(或)肌注,对未发生急性死亡的病猪进行治疗,同时利用阿莫西林粉拌料饲喂预防疫情扩散,加强圈舍卫生和消毒,取得良好的治疗控制效果.     

人工感染雏鸭体内DEV强毒的荧光定量PCR检测

将鸭肠炎病毒(DEV)强毒GZ株经腿部肌肉注射感染15日龄雏鸭后,应用建立的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法检测病毒在雏鸭体内各组织的动态分布。结果显示,感染后3 h即可在肝、脾、脑、胸腺、肾和肺6种组织中检出病毒核酸;感染后6 h,除上述组织外还可在十二指肠和盲肠检测到;感染后10 h又可在胸肌和心肌等检测到。不同受检组织病毒核酸检出量有所不同,由高到低依次为脑、肝、脾、胸腺、肾、十二指肠、盲肠、肺、胸肌和心肌。为阐明DEV的致病机理提供了重要的试验数据。     

高质量鸭肝脏组织总RNA的提取及稳定性测试

为获得高质量的鸭肝组织RNA样本,通过优化提取方案,从1 g超低温(-80℃)的冻存组织中提取RNA,以紫外分光光度计对RNA的含量进行了测定,并对其纯度进行了分析;通过琼脂糖凝胶电泳对RNA的完整性进行了检测,并对所得样本的稳定性进行了测试.结果表明:试验得到了1 528 μg RNA,样品OD260/OD280＝1.93,电泳得到的28 s和18 s RNA条带清晰可见,没有发生降解,样品在室温条件可保存24 h以上,在-20℃可保存8 d以上.提取的RNA质量较高.     

三带喙库蚊携带猪繁殖与呼吸综合征病毒的初步证实

从3个临床发病猪场采集三带喙库蚊提取RNA样本,采用针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NSP2基因设计的引物进行RT-PCR检测,并进行克隆、测序和序列分析;同时取三带喙库蚊匀浆上清接种Marc-145细胞进行PRRSV的分离与鉴定.结果表明:从三带喙库蚊提取的3份RNA样品均扩增出大小约为1 060 bp的特异性DNA条带,其序列与从相应猪场病猪分离得到的猪源PRRSV毒株高度同源,与国内参考株CH-1a株相应序列比较均缺失90个碱基.将3份三带喙库蚊匀浆上清接种Marc-145细胞后,均可观察到明显的细胞病变;以间接免疫荧光试验进行检测,可观察到培养细胞内的特异性荧光;采用RT-PCR反应可检出培养细胞内的PRRSV核酸.上述试验证实,三带喙库蚊可携带PRRSV,可能是引起PRRS传播与流行的重要途径之一.     

复合中草药制剂对肉仔鸡生长及免疫性能的影响

为中草药作为鸡饲料添加剂的开发应用提供科学依据,根据中兽医组方原则,以黄芪、大黄、党参、黄连等原料配制复合中草药制剂用于肉仔鸡饲养,测定了鸡的生长速度、饲料转化率、新城疫(ND)和H5亚型禽流感(H5N1)的免疫抗体滴度。结果表明:在饲料中添加0.1%的中草药制剂,鸡的生长速度极显著高于对照组和全价商品日粮组;能提高饲料转化率,与对照组间差异不显著,但与商品日粮组间差异极显著;能极显著提高鸡群ND和H5亚型禽流感的免疫抗体滴度。     

贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查

为了解2007年4月至2008年7月贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分子流行病学特征,在此期间基于PRRSV的Nsp2基因在全省33个发病猪场展开调查。结果表明,有3种不同Nsp2基因缺失类型毒株在贵州省流行。参考PRRSV经典毒株相应序列,根据Nsp2基因缺失的不同情况将PRRSV贵州省流行毒株分为3种类型,类型Ⅰ(3/33)缺失177个碱基,类型Ⅱ(29/33)缺失90个碱基,类型Ⅲ(1/33)缺失93个碱基。类型Ⅱ毒株与近年来国内广泛流行的高致病性PRRSV缺失情况一致,类型Ⅰ和Ⅲ是2种新发现的缺失型毒株,但其系统发生地位与高致病性PRRSV接近。     

大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR检测方法的建立

为探索减毒胞内侵袭菌介导的粘膜免疫对宿主动物胃肠道微生态的影响,以大肠杆菌与葡萄球菌16 S rRNA基因拷贝数为研究对象,采用实时定量技术(Real-time PCR)对2种细菌进行定量检测,建立大肠杆菌与葡萄球菌数量快速检测方法.结果表明:扩增出的2种细菌核苷酸序列与GenBank上已知目的菌种同源性为100%,构建的2条标准曲线相关系数均接近1,误差较小,熔解曲线显示均成单一峰值.成功构建了大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR标准曲线,可为进一步研究减毒沙门氏菌介导的粘膜免疫奠定基础.     

金荞麦草粉对贵州地方猪的育肥效果评价

试验旨在研究金荞麦草粉作为地方猪养殖育肥饲料原料的可行性.选取20头仔猪,随机分为1组、2组、3组和4组,每组5头猪.1组采用基础日粮,2组、3组和4组在基础日粮中分别添加20％、30％和40％的金荞麦草粉.试验期150 d.结果 显示,与1组相比,2组试验育肥猪平均日增重和料重比均呈下降趋势,但差异均不显著(P＞0....     

猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州流行株ORF5序列变异分析

通过RT-PCR扩增9株贵州省PRRSV流行毒株的ORF5基因,并将其连接到pMD18-T载体进行克隆测序得到目的基因序列.参考国内外毒株,分析其变异特点.结果表明,9株PRRSV贵州流行株都属于美洲型毒株,其ORF5序列之间同源性为99.5%~100.0%.以GZCJ株为贵州省代表毒株,与美洲型参考毒株之间的同源性为89.7%~98.7%,与近年流行的毒株遗传距离较近,与早期流行毒株遗传距离较远,其发生了大量点突变.